产品介绍
T7 Endonuclease I
描述:T7内切酶I识别和切割不完全配对DNA、十字形结构DNA、Holliday结构或交叉DNA、异源双链DNA,或以较慢的速度切割有缺口的双链DNA。这种酶在不匹配的碱基的5'端切割第二或第三个 Phosphodiester bond。
存储条件:-20℃,1 year
使用方法:
1) 分别以突变体DNA和野生型DNA为模板,PCR扩增含突变位点的片段,片段长度约500bp, 突变位点避免位于片段中间,便于区分切割后条带;
2) 变性退火PCR产物
3) 酶切反应:上一步反应液中加入0.5 μL T7 E1酶,37℃保温15-30min,立即加入DNA loading buffer终止反应,混匀后65℃保温10min,琼脂糖凝胶电泳检测酶切结果
注意事项:
1. 用T7核酸内切酶I是一种具有底物结构选择性的酶。该酶以不同的活性作用于不同的DNA底物。切割特定底物时,必须控制酶量和反应时间。反应温度
超过42℃时,会增加非特异性核酸酶活性。避免反应温度超过55℃,会导致酶活性降低。
2. 本产品专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。