PAXgene Blood DNA系统包括用于血液采集和稳定的PAXgene Blood DNA
Tubes和用于单管纯化DNA的PAXgene Blood DNA Kit。
性能
PAXgene Blood DNA System分离的DNA A260/A280比值在1.7–1.9。片段大小20–200 kb，平均长度50–150 kb（参见High
quality and high molecular weight of genomic
DNA）。DNA平均产量为150–500 μg，由血样中的核细胞数目决定。纯化的DNA可用于PCR、定量和real-time PCR（参见Efficient
multiplex PCR of 3 mitochondrial
genes）。
原理
PAXgene Blood DNA
System是整合的标准化体系，用于收集和稳定全血样本并分离基因组DNA。该体系通过PAXgene Blood DNA
Tubes收集和稳定血液，并使用PAXgene Blood DNA Kit纯化DNA。
PAXgene Blood DNA
Tubes包含可防止血液凝结以及可稳定白细胞的混合试剂，用来收集血液。血液样本可在室温下在管中储存长达14天。用PAXgene Blood DNA
Kit中提供的缓冲液获得的高纯度的基因组DNA适合各种下游应用。
操作流程
PAXgene Blood DNA操作步骤如流程图PAXgene
Blood DNA procedure所示。血液样本（8.5 ml）由PAXgene Blood DNA
Tubes收集，并储存或运输。如需纯化DNA，则将血液转入处理管中（已预充细胞裂解缓冲液），将溶液混合，裂解红细胞和白细胞。细胞核和线粒体通过离心收集、洗涤，重悬于裂解缓冲液中。蛋白污染物经蛋白酶孵育后去除。DNA用异丙酮沉淀、70%乙醇洗涤、干燥，并重悬于缓冲液。
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