产品介绍
RIPA裂解液
(RIPA Buffer)
Cat No. Size
BDIT0037-50 50ml
BDIT0037-100 100ml
产品描述
本品是裂解贴壁或悬浮培养的哺乳动物细胞的理想试剂，可用于提取胞浆、胞膜及细胞
核内的蛋白，提出的蛋白可以用于包括蛋白纯化、蛋白分析和免疫分析等多种实验。
保存
4℃保存，常温运输。
操作方法（哺乳动物贴壁细胞）
1. 根据实验所需取合适数量的细胞。
2. 完全去除贴壁细胞培养液（最好用真空吸出）。
3. 用冰预冷的PBS 洗细胞2次。
4. 加入冰预冷的RIPA 裂解液（如果需要，可在此处添加蛋白酶和磷酸化酶抑制剂）。
每个75 cm2 方瓶或10cm 培养皿的细胞上面加1ml 裂解液，继续放冰上5分钟，
期间晃动几次以确保覆盖均匀。
5. 用细胞刮刀将细胞刮下来，并转移至离心管中。
6. 13,000 – 15.000 ×g 离心15分钟。
可选：如果想提高产量，可对沉淀进行30秒的超声（50%间隔脉冲）
6. 将上清转移至新管中，进行后续实验。
注意事项
1. 本品不含蛋白酶或磷酸酶抑制剂，但如果需要，可在使用前添加上述抑制剂，以避
免发生蛋白降解和磷酸化。
2. 经本品处理得到的样品可直接用于BCA 蛋白检测试剂盒和DC 蛋白检测试剂盒。
3. 本品在4℃长时间放置，可能会出现沉淀。属正常现象，只需把本品放在室温平衡
10 分钟，即可将沉淀重新溶解。
4. 每1ml RIPA 裂解液可处理5 × 106 细胞。
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