产品介绍
氟喹诺酮检测试剂盒产品描述:
一、概要
氟喹诺酮类(FQNS)又称吡酮酸类或吡啶酮酸类,是一类十分重要的广谱抗生素药物,能抑制细菌DNA螺旋酶。其常在牛、猪和鸡等家禽养殖中被作为兽药使用。特别是鸡、猪和鱼/虾等的养殖企业均使用其来防治家禽传染病已成为兽医临诊和水产养殖中最重要的抗感染药物之一,由于其耐药性和潜在的致癌性引起广泛的关注。欧盟理事会条例中对部分氟喹诺酮的最大限量值MRL作出了明确的规定。
氟喹诺酮检测试剂盒是应用ELISA技术研发的新一代药物残留检测产品,操作时间仅需60min,能最大限度地减少操作误差和工作强度。
二、试验原理
氟喹诺酮检测试剂盒采用直接竞争ELISA方法,在酶标板微孔条上预包被氟喹诺酮抗体,样品中残留的氟喹诺酮类药物和酶标抗原竞争微孔条上预包被的抗体,用TMB底物显色,样品吸光值与其残留物氟喹诺酮类药物的含量成负相关,与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数,即可得出样品中氟喹诺酮类药物的含量。
三、适用范围
氟喹诺酮检测试剂盒可定性、定量检测动物组织(肉类、水产)、蜂蜜、鸡蛋等样品中氟喹诺酮类药物的残留量。
四、操作步骤:
1、将所需试剂从冷藏环境中取出,置于室温(20~25℃)平衡30min以上,注意每种液体试剂使用前均须摇匀。
2、取出需要数量的微孔板,将不用的微孔板放进原锡箔袋中并且与提供的干燥剂一起重新密封,保存于2~8℃。不要冷冻。
3、洗涤工作液在使用前也需回温。
4、编号:将样品和标准品对应微孔按序编号,每个样品和标准品做2孔平行,并记录标准孔和样品孔所在的位置。
5、加标准品/样品:加标准品/样品50l到对应的微孔中,再加入酶标物50l/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置室温避光环境中反应30min。
6、洗板:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,用洗涤工作液300l/孔,充分洗涤5次,每次间隔30s,用吸水纸拍干(拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破)。
7、显色:加入底物液A液50l/孔,再加底物液B液50l/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置室温避光环境反应15~20 min。
8、测定:加入终止液50l/孔,轻轻振荡混匀,设定酶标仪于450nm处(建议用双波长450/630nm检测,请在5min内读完数据),测定每孔OD值。(若无酶标仪,则不加终止液用目测法可进行判定)。
五、检测方法灵敏度、准确度、精密度
试剂盒灵敏度:0.1ppb
氟喹诺酮类药物检测下限:
环丙沙星 (CIF) 检测下限 ………………………… 2ppb
恩诺沙星 (ENR) 检测下限………………………… 约 1ppb
依诺沙星 (ENO) 检测下限 …………………… 约2ppb
氧氟沙星 (OFL) 检测下限 …………………… 约2ppb
诺氟沙星 (NOR) 检测下限 …………………… 约2ppb
培氟沙星 (PEF) 检测下限 …………………… 约2ppb
达氟沙星 (DAN) 检测下限 …………………… 约2ppb
洛美沙星 (LOM) 检测下限 …………………… 约2ppb
氟啶酸 (ENX) 检测下限 ……………………… 约2ppb
回收率:
组织样品………………………………………85±10%
蜂蜜样品……………………………………………85±10%
精密度:试剂盒的变异系数均小于10%
六、注意事项
1、室温低于20℃或试剂及样品没有回到室温(20~25℃)会导致所有标准的OD值偏低。
2、在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况,则会出现标准曲线不成线性,重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。
3、每加一种试剂前需将其摇匀。
4、反应终止液为2M硫酸,避免接触皮肤。
5、不要使用过了有效日期的试剂盒;也不要使用过了有效期的试剂盒中的任何试剂,掺杂使用过了有效期的试剂盒会引起灵敏度的降低;不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。
6、储存条件:保存试剂盒于2~8℃,不要冷冻,将不用的酶标板微孔板放进自封袋重新密封。标准物质和无色的发色剂对光敏感,因此要避免直接暴露在光线下。
7、试剂变质的迹象发色试剂有任何颜色表明发色剂变质,应当弃之。0标准的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)时,表示试剂可能变质。
8、在加入底物液A液和底物液B液后,一般显色时间为15~20 min即可。若颜色较浅,可延长反应时间到35min(或更长),但不得超过40min。反之,则减短反应时间。
9、该试剂盒最佳反应温度为25℃,温度过高或过低将导致检测吸光度值和灵敏度发生变化。
七、贮藏条件及保存期
贮藏条件:保存试剂盒于2~8℃。
保存期:该产品有效期为12个月。