产品介绍
UltraClean?Endotoxin-Free Maxi Plasmid Prep Kit* 在质粒提取过程中整合了一个高效率的内毒素去除步骤,使其成为目前最快速无内毒素质粒大提试剂盒。获得的无内毒素DNA可直接用于转染、微注射。
无需额外的吸附柱分离脂多糖。使用改进的碱性裂解液裂解细胞,内毒素由特殊的缓冲液沉淀分离。质粒DNA吸附到硅胶离心柱上,经过洗涤重悬于无内毒素水(试剂盒提供)中。质粒DNA浓度足够直接进行转染实验。
内毒素作为脂多糖类物质,存在于革兰氏阴性细菌(如大肠杆菌)的细胞壁。通常会随着质粒被一起提取,能显著降低内毒素敏感细胞株的转染效率。在转染实验中常导致结果无法判定和解释。
DNA浓缩
最终洗脱到无内毒素水中的质粒DNA体积是3ml。若要浓缩DNA,请确保乙醇法浓缩使用的是无内毒素盐和缓冲液。
搅浑了底部红色沉淀
就算吸到了红色沉淀,还是可以继续你的操作。步骤10中的离心步骤是用来确保完全去除所有的endotoxin removal solution。确保上清液中没有endotoxin removal solution非常关键。
低回收率
若加入Solution EF3离心20min后未能看到紧实的白色沉淀,而是松散絮状溶液,说明为裂解充分。有少量絮状物是正常现象。主要是步骤2中培养基未完全吸掉或使用过量菌液所引起。