产品介绍
SILAC即细胞培养条件下稳定同位素标记技术(Stable Isotope Labeling By Amino Acids In Cell Culture,SILAC),其实验原理是在细胞培养基中加入轻、中或重型稳定同位素标记的必需氨基酸(赖氨酸和精氨酸),通过细胞的正常代谢,使新合成的蛋白带上稳定同位素标签。等量混合各类型蛋白质,酶解后进行质谱分析。通过比较一级质谱图中同位素峰型的面积大小进行相对定量,同时二级谱图对肽段进行序列测定从而进行蛋白鉴定。
技术优势
标记率高:活细胞水平标记技术,标记效果稳定,其标记效率不受裂解液的影响。标记效率可高达100%。
灵敏度高:样本需求量少,通常每个样品只需要几十微克的蛋白量。
通量高:采用质谱定量,可同时鉴定并定量数百至数千种蛋白质。
精度高:多个样品混合后同时进行分离、酶切和鉴定,后续实验对样品的影响是一致的,减少了实验操作和仪器设备产生的影响,具有更高的精密度和重现性。
活性高:标记采用的是体内标记技术,更接近样品真实状态。
技术平台
Triple TOF 5600, Q-Exactive, Orbitrap Fusion? Tribrid?
应用领域:
机理和调控机制研究
动态过程中机制研究
疾病标志物的筛选
用药及预后标志物筛选