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产品介绍

小干扰性RNAs（siRNAs， small interfering RNAs）正在成为导向性基因沉默领域中的重要的研究工具。RNAs干扰机制最初是通过观察线虫在外源性因素作用下产生长双链RNA的应答反应而产生基因沉默而被发现。 目前已逐步明确了在进化过程中各种机体（包括植物、真菌和后生动物）都存在这种由dsRNA（double-stranded RNA）所介导的基因沉默现象。遗传学和生物化学方面的研究表明这种现象有一种共同的机制。比较公认的模式是dsRNA在一种RNA酶 III （又称为为切割器，dicer），的作用下被裂解成siRNAs，这些siRNAs结合到一种核酸复合体中，形成RNA介导的沉默复合体-RISC（RNA induced silencing complex）。RISC可以将siRNA作为模板来识别和破坏同源性的mRNA从而导致序列特异性的基因表达抑制。

哺乳动物中的RNAi:  在哺乳动物细胞中，这种长链dsRNA的使用被抗病毒/干扰素反应包括PKR通路所限制。PKR通路可以对大于30个核苷（30bp）的dsRNA反应从而启动非特异性翻译抑制和凋亡，甚至当PKR活性被去掉时长链的dsRNA仍然可以启动基因表达的非特异性抑制。

由于PKR通路不能被少于30个核苷（30bp）的dsRNA活化，因此避免非特异性dsRNA应答的最简单的方法是采用长度小于30bp的dsRNA。Tuschl和他的同事首次证明当小dsRNA被暂时转染至哺乳动物细胞中后，可以介导序列特异的基因沉默。这些小siRNA是用化学合成方法制成的RNA酶 III 的切割产物的仿制品。他们是由19–22 nts组成，在每个链的在3′端有2 nts的小dsRNAs。 这些siRNA按理可以不通过RNA酶 III 而直接介入RNA介导的沉默复合体中。

避免非特异性dsRNA应答还有其他的方法。Hannon等人发明了一种体内制作类似于内源性表达的发卡RNA小dsRNA的方法。这种方法使用一种RNA聚合酶 III 所催化的反向重复（19-20nt）来创建短的发卡RNAs，后者被为切割器，dicer，处理后参与到RNA的干扰通路。另外，siRNA在体内可以通过分别的RNA聚合酶 III 转录单位产生互补的19-21 nt RNA表达而产生。这种方法和化学合成的方法比起来具有多种优点，比较稳定并可以在体内介导基因沉默。

多数的RNA干扰可以保证在基因水平的表达抑制，但不一定保证在蛋白水平的抑制。多数产品也不提供检测蛋白水平的工具。