产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格（元） |
2×Hieff UNICON? HotStart PCR Master Mix (With Dye) | 10732ES01 | 100μl | 0 |
2×Hieff UNICON? HotStart PCR Master Mix (With Dye) |
10732ES03 | 1 mL | 96.00 |
2×Hieff UNICON? HotStart PCR Master Mix (With Dye) | 10732ES08 | 5×1ml | 432
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产品描述
2×Hieff UNICON? HotStart PCR Master Mix (With Dye)是即用型的PCR预混合溶液，含有Hieff UNICON? HotStart Taq DNA Polymerase，dNTP以及优化的缓冲，只需加入引物和模板即可进行扩增，大大简化了实验的操作步骤，提高了高通量操作和实验结果的重现性。Hieff UNICON? HotStart Taq DNA Polymerase是Hieff UNICON? Taq抗体和Hieff? Taq DNA Polymerase的混合产品。Hieff UNICON? Taq抗体与Hieff? Taq DNA Polymerase具有很高的亲和力，高温50℃处理30 min，依旧可以封闭Hieff? Taq DNA Polymerase的活性。Hieff UNICON? HotStart Taq DNA Polymerase在预变性温度下加热30 sec完全失活，释放出DNA聚合酶活性。使用该热启动taq酶可以有效抑制引物非特异性退火导致的扩增。
预混液中已加入电泳缓冲液和染料，使得PCR产物可以直接进行电泳，染料的存在不会干扰扩增效率。PCR产物具有3’-dA突出端，可轻松克隆至T载体。
产品应用
低拷贝基因扩增、基因型鉴定、菌落PCR
运输与保存方法
冰袋运输。-20℃保存。有效期2年。
注意事项
1）为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
2）本产品仅作科研用途！
PCR反应（50 μL）
组分 | 体积 | 终浓度 |
ddH2O | to 50 μL | - |
模板DNA | 适量 | - |
Primer正向 (10 μM) | 2 μL | 0.4 μM |
Primer反向 (10 μM) | 2 μL | 0.4 μM |
2×Hieff UNICON? HotStart PCR Master Mix (With Dye) | 25 μL | 1× |
【注】：针对不同模板的反应浓度有所不同，下表为50 μL反应推荐模板使用量，仅供参考。
模板种类 | 模板使用量 |
基因组DNA | 50 ng-200 ng |
质粒DNA | 100 pg-20 ng |
cDNA | 1-5 μL (不超过反应的1/10) |
PCR扩增程序
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 95℃ | 5 min | 1 |
变性 | 95℃ | 30 sec | 35 |
退火 | 50-60℃ | 30 sec |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb |
终延伸 | 72℃ | 10 min | 1 |
【注】：1）退火温度和时间：温度推荐使用50-60℃。退火温度过低会导致非特异性扩增。引物设计参考荧光定量引物标准。推荐退火时间设置为30 sec，可以在10-30 sec内调节。退火时间太长可能导致扩增产物在胶上呈弥散状。也可根据需要，设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度和时间。
2）延伸温度和时间：温度推荐使用72℃。时间推荐使用30 sec/kb。
3）扩增产物：请将PCR扩增产物放置于-20℃保存，防止DNA发生降解。
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产品名称 | 货号 | 规格 | 价格（元） |
2×Hieff UNICON? HotStart PCR Master Mix (No dye) | 10733ES03 | 1 mL | 96.00 |
2×Hieff UNICON? HotStart PCR Master Mix (No dye) | 10733ES08 | 5×1 mL | 432.00 |
HB210831
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