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产品介绍

Prussian Blue Iron Stain Kit

普鲁士蓝染色试剂盒（核固红法）

产品信息

产品描述

含铁血黄素(Hemosiderin)是一种血红蛋白源性色素，为金黄色或棕黄色颗粒，因其含铁，且为金黄色，故称为含铁血黄素。当红细胞被巨噬细胞吞噬后，在溶酶体酶的作用下，血红蛋白被分解为不含铁的橙色血质和含铁的含铁血黄素。

Perls普鲁士蓝反应 (Prussian blue reaction)又称为含铁血黄素染色，即经过亚铁和稀酸处理后可以产生蓝色，常见于吞噬细胞或间质内，其染色原理在于亚铁溶液使三价铁离子从蛋白质中被稀盐酸分离出来，三价铁与亚铁反应，生成一种不溶解的蓝色化合物即三价铁的亚铁物。该法也是诊断学中检测灵敏度极高的一种铁染色方法。

本试剂盒可用于显示局部组织内的各种出血性病变，常见于吞噬细胞内，可以很好地区分含铁血黄素与其他色素。该染色液稳定性好、可以长期保存、不易产生沉淀、应用范围广，可以进行复染。该染色液的复染液采用核固红，是最经典、最常用的复染液。

产品组分

运输和保存方法

冰袋运输。4℃，避光保存。有效期6个月。

使用方法

（一）石蜡切片染色：

1、组织固定于10%中性福尔马林（未提供），常规脱水包埋。

2、切片厚度4 μm，常规脱蜡至水。

3、蒸馏水水洗1 min。

4、切片入Perls stain (见注意事项3)，浸染15～30 min。5、蒸馏水充分冲洗2～5 min。

6、入核固红染色液，淡染细胞核5～10 min。

7、自来水冲洗1～5 s。

8、常规脱水透明，中性树胶封固

（二） 冰冻切片染色：

1、无需脱蜡，直接迅速用蒸馏水冲洗2～3 min。

2、染色、封固步骤同石蜡切片的染色步骤，时间可以相应缩短。

（三）细胞染色：

1、4%多聚甲醛固定10～20 min。

2、自来水冲洗2次，每次2 min。

3、蒸馏水冲洗2次，每次2 min。

4、染色、封固步骤同石蜡切片的染色步骤，但操作时间应相应延长。

结果参考

含铁血黄素或三价铁，结果呈蓝色；细胞核、其他组织，结果呈红色。

阴性对照

取相同切片脱蜡至水。入5%草酸孵育2～6 h，经Perls stain，其余步骤同上。结果为阴性。

注意事项

1）使用前应恢复室温，用前请摇匀试剂。

2）工作液现配现用。

3）所有玻片及器具应洁净、无铁污染（事先经除铁处理，尤其是载玻片），Perls stain染色时，应根据样本情况调整着色时间。

4）切片脱蜡应尽量干净。组织固定常采用10%中性福尔马林，经普通福尔马林长期固定后，组织会有损伤。避免使用酸性固定剂，铬酸盐处理也会妨碍铁的保存。

5）所有切片都应使用同一个阳性对照切片，选择适合的对照非常重要。尸检肺组织是一个很好的对照，包含相当数量的铁阳性巨噬细胞(心衰细胞)。

6）每次试剂使用后，请迅速盖好密封保存，以免挥发及影响效果。

7）本试剂盒仅限于形态学染色观察使用。

8）冰冻切片和细胞染色，最好根据具体情况摸索实验条件。

9）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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