产品介绍
产品介绍】
1)新城疫病毒(NDV)通用型荧光定量RT-PCR检测试剂盒采用TaqMan探针法实时荧光PCR 技术,用于禽肉、禽类组织脏器、禽类排泄和分泌物,及其泄殖腔和咽喉拭样中的新城疫病毒的检测。符合行业标准SN/T1686-2005《新城疫病毒中强毒株检测方法:荧光RT》国家标准要求。
2)检测灵敏度:对于接种的鸡胚尿囊液,检测的最高稀释度可达10-8~10-7,与鸡胚病毒分离方法的灵敏度接近。定量检测线性范围可达10-1010拷贝/ml。
3)特异性:新城疫病毒(NDV)通用型荧光定量RT-PCR检测试剂盒根据新城疫病毒的 fusion protein基因最新DNA序列设计,并通过系统验证,能够检测所有已知新城疫病毒毒株。对于其它禽类感染因子,本试剂盒检测结果为阴性。
【本试剂盒优点】
1)快速:将检测时间缩短,约2小时就可得到检测结果。
2)灵敏:由荧光PCR仪自动收集荧光信号,进一步提高灵敏度。
3)特异:采用一对特异引物进行目标基因片段的扩增及一条可与模板互补配对的荧光探针进行检测,提高了特异性。
4)准确:荧光(RT-)PCR检测方法与常规的病原分离方法的敏感性基本一致。
5)安全:扩增采用全封闭反应,无需PCR后处理,无需电泳检测、不使用溴化乙锭,杜绝了PCR产物的气溶胶污染。
6)简单、实用:本试剂盒系列给检测者提供了质量优异的试剂及优化的操作程序,经过简单的培训,检测者就可胜任该项。
【储存与运输条件】
本试剂盒必须在-20℃下避光保存,有效期为6个月。
【实验操作步骤】
1)RNA提取:用户可采用通用型病毒RNA提取试剂盒提取禽流感病毒RNA用于检测或保存于-20℃(-80℃更佳)以待检测。
2)PCR反应
PCR反应液 19.1 µl
Taq酶 0.4 µl
逆转录酶 0.5 µl
RNA样本 5 µl
PCR反应程序:
50℃ 30 min 反转录
95℃ 3 min
95℃ 10s
60℃ 40s 40次循环
【注意事项】
1)本试剂盒仅用于体外检测使用,操作人员必须经过培训并具有一定的经验,试剂盒使用前请仔细阅读说明书全文。
2)请严格按照基因扩增检验实验室的管理规范进行实验操作。
3)PCR实验严格分区操作;各区应有专用的手套、移液器等,不得交叉使用,避免污染;工作人员应遵循从一区到二区的单方向工作原则,各工作区相对隔离;进行PCR实验的工作桌面和及相关物品应定期用1%次氯酸钠、75%酒精、1mol/L盐酸或紫外灯进行灭菌和消毒。
4)所用的吸头和离心管都需要经DEPC水处理,以灭活 RNA 酶,75%乙醇也要用DEPC处理过的水配制。
5)试剂盒中各试剂充分融化后请短暂离心。反应液分装时应尽量避免产生气泡。上机前应注意检查各反应管是否盖紧,以免污染仪器。