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产品介绍

 Cat. #:  AB1071 (50preps)

    AB1072 (100preps）

    AB1073 (200preps）

v 试剂盒组成、储存、稳定性：

v 操作步骤：（实验前请先阅读注意事项）

提示：第一次使用前请先在漂洗液PB和WB中加入指定量无水乙醇，充分混匀，加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!

处理材料：

1.将在面颊内擦拭过的棉签用剪刀将棉签部分从其杆上剪下（尽量剪细）， 转置于2ml离心管中，加入400μl缓冲液BB。 

可选步骤：如果需要去除 RNA，可加入4μlRNaseA（100mg/ml）溶液，振荡 15 秒，室温放置5分钟。 

2.  加入 20μl 蛋白酶 K 溶液，涡旋 10 秒混匀，70℃放置 10 分钟，其间每 2 分钟涡旋混匀数次。 

3.  加入600μl结合液PB，充分颠倒混匀，70℃放置10 分钟，此时溶液应变清亮，

简短离心以去除管盖内壁的液滴。 

加入缓冲液时可能会产生白色沉淀，一般 70℃放置时会消失，不会影响后续实验。如溶液未变清亮，说明细胞裂解不彻底，可能导致提取量少和提取出的不纯。 如果由于拭子上细胞数少导致提取的基因组少于 1μg，可以在添加结合液PB的同时添加Carrier。 

4.  将上一步所得溶液和絮状沉淀（连同棉签）都加入一个吸附柱AC 中（吸附柱AC 放

入收集管中），12000rpm 离心 30 秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱 AC 放回收集管中。 

5.  加入500μl抑制物去除液IR，12,000 rpm 离心30秒，弃废液。 

6.   加入700μl漂洗液WB（请先检查是否已加入无水乙醇!），12,000 rpm 离心30秒，弃掉废液。

7.   加入500μl漂洗液WB，12,000 rpm 离心30秒，弃掉废液。

8.   将吸附柱AC放回空收集管中，13,000 rpm离心2分钟，尽量除去漂洗液， 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。

9.   取出吸附柱AC，放入一个干净的离心管中，在吸附膜的中间部位加100μl洗脱缓冲液EB （洗脱缓冲液事先在 65-70℃水浴中预热效果更好）， 室温放置3-5分钟，12,000 rpm 离心1分钟。将得到的溶液重新加入离心吸附柱中，室温放置2分钟，12,000 rpm离心1分钟。

洗脱体积越大，洗脱效率越高，如需要DNA浓度较高，可以适当减少洗脱体积， 但是最小体积不应少于50μl，体积过小降低DNA洗脱效率，减少DNA产量。

10. DNA可以存放在2-8℃，如果要长时间存放，可以放置在－20℃。