产品介绍
蛋白质印迹(Western Blot)是将电泳分离的蛋白质组分从凝胶转移至固相支持体上，以特异性抗体作为探针检测目的蛋白的一种生化检测技术。Western Blot常用于鉴定某一蛋白，并能对其进行定性和半定量分析，具有分辨率高、特异性强和灵敏度高等优点，是基因表达和蛋白质研究中常用的经典技术。
瑞晶生物为您提供Western Blot一站式解决方案，您只需准备好样品，其余全部由我们来为您完成。实验中所用试剂全部为进口名牌产品，确保为您提供精确的检测数据，获得生物学相关的结果。
主要服务内容包括：
1. 总蛋白提取：
（1）组织样品：取500mg新鲜组织样品或正确保存的组织样品，加1ml总蛋白抽提试剂（或核蛋白抽提试剂、膜蛋白抽提试剂），匀浆后抽提总蛋白（或核蛋白、膜蛋白）。
（2）细胞样品：取1×107个细胞，PBS清洗三次，加1ml总蛋白抽提试剂（或核蛋白抽提试剂、膜蛋白抽提试剂），裂解细胞并抽提总蛋白（或核蛋白、膜蛋白）。
2. 蛋白质定量：
按BCA法蛋白质定量试剂盒说明书操作，测定样品浓度。
3. 电泳(SDS-PAGE)：
将制备好的总蛋白液和蛋白质分子量标准分别上样，SDS-PAGE分离蛋白质。
4. 转膜：
冰浴条件下，使用湿转法将蛋白质由凝胶转移至PVDF膜上，电压及转膜时间根据蛋白质大小不同而有所变化。
5. 膜的封闭和抗体孵育：
（1）室温下将膜置于5％BSA溶液中孵育1小时，以封闭膜上的非特异结合。
（2）将封闭后的膜加入经适当稀释的一抗溶液中，室温孵育1.5小时，使抗原抗体充分结合。
（3）加入经适当稀释的酶标二抗溶液，室温孵育1小时。
6. 结果检测：
膜与发光底物孵育后，经X光胶片曝光、显影。胶片扫描后，使用专业图像分析软件将每条特异性条带的灰度值数字化。
7. 数据分析：
统计目的蛋白灰度值与内参蛋白灰度值的比值，得到目的蛋白的相对表达量及变化趋势。
8. 实验报告：
（1）实验步骤
（2）数据结果及相关图表
您需提供：
（1）一抗(以发表文献中应用过的一抗为佳)。
（2）新鲜的组织或细胞样本，干冰保存。
（3）相关背景资料。
收费标准及实验周期：
1500元/膜，每张膜可做8个样品。
实验周期一般为2周。
经典案例：
有机阴离子转运蛋白1（OAT1）具有转运尿酸的功能。上图为不同药物处理后大鼠肾组织中的表达情况。
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