产品介绍
一氧化氮(NO)检测试剂盒说明书
规格:100T
一、 原理
NO遇氧及水可生成硝酸及亚硝酸盐,硝酸盐与硝酸及萘乙烯二胺盐酸盐反应生成粉红色偶氮化合物,通过比色可间接测知NO浓度。本方法适用于测定血清或血浆中的NO含量。
二、 试剂
1. 磺胺试剂A 15ml
2. 萘乙烯二胺盐试剂B 15ml
3. 硫酸锌试剂C 100ml
4. 氢氧化钠试剂D 15ml
5. 亚硝酸钠试剂E 100mg
三、 方法
测定步骤:取血清或血浆0.1ml加0.6ml C试剂混匀,加双蒸水0.4ml,混匀,加0.1mlD试剂混匀,冰上孵育60分钟,12000转离心2分钟,取上清0.6ml加0.4ml双蒸水及0.1mlA试剂冰上孵育15分钟,之后加0.1ml B试剂,室温放置1小时,545nm比色,读OD值。
四、制作标准曲线
以亚硝酸钠为标准品,制作标准曲线,步骤如下:
1. 当日配制1.0m M亚硝酸钠溶液 取E试剂6.9mg,用双蒸水定容至100ml。
2. 配制亚硝酸钠浓度系列
(1)当样品中NO含量高时,按下列浓度系列制作标准曲线
NO(µM) 0 10 20 40 60 80 100
1m M亚硝酸钠(µl) 0 10 20 40 60 80 100
双蒸水(µl) 1000 990 980 960 940 920 900
(2)当样品NO含量低时,按下列浓度系列制作标准曲
NO(µM) 0 2 4 6 8 10
1m M亚硝酸钠(µl) 0 2 4 6 8 10
双蒸水(µl) 1000 998 996 994 992 990
3. 每一浓度0.1ml,按步骤进行。
五、计算
根据样品OD值,按标准曲线计算NO含量。
六、保存
4℃保存,有效期一年。