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生物缓冲液HEPES(7365-45-9)的那些用途

来宝网 2021/9/27点击1197次

HEPES中文名羟乙基哌嗪乙磺酸 分了式C8H18N2O4SHEPES 它是一种两性离子有机化学缓冲剂,对细胞无毒性作用,同时它也是一种氢离子缓冲剂,能较长时间控制恒定的PH值范围,在PH值为7.2-7.4范围内具有较好的缓冲能力。

HEPES的使用方法有两种:

1、按照所需浓度直接加入到配置的培养溶液中,过滤除菌,每1000毫升培养液中加入2.38HEPES,溶解后用1N NaOHPH7.2,过滤除菌后可使用。此时 HEPES的使用浓度为10mmol/L。  

2、配成100x贮存液(1mol/L),取23.8gHEPES溶于90ml的双蒸水中,用1NNaOHPH7.5-8.0,然后用水定容至100ml,过滤除菌分小瓶装,4摄氏度至20摄氏度保存。使用前取99ml培养液加入1ml贮存液最终应用浓度仍为10mmol/L

HEPES是一种两性缓冲液,溶于水,不与金属离子形成稳定的配合物,其在pH7.2-7.4范围内具有较好的缓冲能力。多数情况下,不会干扰生物化学过程,可广泛应用于多种生物化学反应

1HEPES常用于各种类型生物体的细胞培养基中用作缓冲试剂,细胞-细胞黏附,细胞短期聚集培养,清洗组织、细胞所用缓冲液

2、在蛋白质研究中,PIPES常用作阳离子交换色谱法中结合缓冲液的组分和洗脱习液 

3、在DNA研究中,PIPES用作磷酸钙和 DNA沉淀物形成体系的绥冲滴 AFM以及电穿孔实验中的缓冲液。

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