来宝网 2021/7/12点击1058次
AbMole精研抑制剂十年，最新的科研动态不断与您分享。本期与您分享的是：MagT1通过ERK信号通路调控TGC CM诱导的BMMSCs的牙源性分化。
骨髓间充质干细胞 (BMMSCs) 是牙髓再生的合适细胞来源，但 BMMSCs 分化为牙源性谱系的机制尚不清楚。本研究的目的是揭示镁转运蛋白 1 (MagT1) 和 MAPK 通路在 BMMSCs 牙源性分化中的作用。
进行RNA测序（RNA-seq）以探索由牙胚细胞条件培养基（TGC-CM）诱导的牙源性分化的BMMSCs转录组的改变。进行通路分析以探索差异表达特征的丰富通路。使用自动化蛋白质印迹、实时PCR、shRNA慢病毒和流式细胞术检测MagTl和MAPK通路在BMMSCs的牙源性分化中的功能。RNA-seq 鉴定了 622 个与 TGC-CM 诱导的 BMMSCs 牙源性分化相关的差异表达基因，其中一些基因负责 MAPK 通路。本研究证实 TGC-CM 通过激活 ERK/MAPK 途径诱导 BMMSCs 的牙源性分化，并且 ERK/MAPK 途径的失活抑制了 TGC-CM 诱导的牙源性分化。我们还发现在 TGC-CMM 诱导的 BMMSCs 牙源性分化过程中 MagT1 蛋白显著增加，相应地，MagT1 敲低显著降低矿化结节的程度和碱性磷酸酶 (ALP)、牙本质基质蛋白 1 (DMP-1 ) 和牙本质唾液酸磷蛋白 (DSP)。流式细胞术显示，敲低 MagT1 的 BMMSCs 中细胞内 Mg2+ 显著降低，表明抑制 MagT1 通过降低细胞内 Mg2+ 来抑制 BMMSCs 的牙源性分化。最后，我们进行了 RNA-seq 以探索发生牙源性分化的 MagT1 敲低 BMMSC 的转录组改变，并鉴定了 281 个差异表达基因，其中一些基因参与 MAPK 通路。一致地，自动蛋白质印迹分析发现 ERK/MAPK 通路在牙源分化过程中 MagT1 敲低的 BMMSCs 中受到抑制，表明 MagT1 的抑制通过 ERK/MAPK 通路抑制了 BMMSCs 的牙源性分化。
U0126（Abmole，M1977，纯度99.56%）被用于抑制ERK/MAPK信号通路，浓度为50μM。
Fig. 4 Inactivation of ERK/MAPK signaling pathway inhibited the odontogenic differentiation of BMMSCs induced by TGC-CM.
本研究通过 U0126 抑制了 ERK/MAPK信号通路并发现矿化结节的范围，以及 BMMSC 中 ALP、DSP 和 DMP-1 的蛋白质水平显着降低 在牙源性分化7天期间。
鸣谢：Jian-Mao Zheng, et al. Stem Cell Res Ther. 2019 Jan 31;10(1):48.
