来宝网 2022/6/30点击1065次
Rho1D4 tag / 1D4 tag
Rho1D4，也叫“1D4”，是一种亲和标记物，包含了九种氨基酸(T-E-T-S-Q-V-A-P-A)。该标记物优先与目标蛋白的C端结合。琼脂糖和磁珠与相对应的Rho1D4-抗体能够纯化标记了Rho1D4标签的蛋白。Rho1D4蛋白纯化实验不仅拥有基于其它抗体为基础的蛋白纯化极高的专一特异性，并且蛋白的产量也很高。关于Rho1D4的更多信息，我们撰写了一本指南为您提供所有必须信息。
产品技术参数
用途 | 特异性结合和纯化Rho1D4标记的蛋白 |
特异性 | 具有与Rho1D4标记的蛋白亲和力 |
稳定性 | 高耐受去污剂 |
微球配基 | Rho1D4抗体 |
蛋白产量 | 3-4 mg/ ml琼脂糖或磁珠 |
标记序列 | TETSQVAPA |
为什么选择库柏生物（Cube Biotech）的Rho1D4 Tag蛋白纯化产品?
选择Cube Biotech公司的理由有很多。以下为其中几点:
标记的大小：902.9 Da， 9个氨基酸(TETSQVAPA)
每毫升树脂蛋白产量：3-4 mg/ml
相互作用的特异性：KD：20 nM
洗脱条件：Rho1D4肽、低pH值或标记裂解
Cube Biotech的Rho1D4亲和蛋白纯化的产品概览：
Rho1D4 琼脂糖 (40 µm) | Rho1D4 琼脂糖 (40 µm) | Rho1D4 磁珠(30 µm) |
Rho1D4琼脂糖(90µm大粒径) | Rho1D4琼脂糖 (40 µm) 通用型预装柱 | Rho1D4磁珠 (大粒径) |
Rho1D4 Starter试剂盒——面向所有首次想要尝试Rho1D4标签的用户。 | ||
Starter试剂盒 1 (1 mL 琼脂糖 + 5 mg 肽) | Starter试剂盒3 (1 x 1 mL 预装柱 + 5 mg 肽) | Starter试剂盒 2 (1 mL 磁珠+ 5 mg 肽) |
Starter试剂盒 4 (1 x 1ml 小型预装柱 + 5mg 肽) |
Rho1D4蛋白纯化支持产品:
Rho1D4 肽 (用于蛋白竞争洗脱) | Rho1D4 带 GFP标签 (用于对照) | Rho1D4 抗体 [鼠源] (用于western blot) |
Cube Biotech的Rho1D4产品在以下论文刊物中出现：
高特异性和高产量的蛋白纯化
PureCube系列琼脂糖依据严格的质量标准进行生产，每一批次均经过质量检验，以确保加载的基质具有高蛋白载量。由于抗原-抗体表位相互作用的特异性，针对目标蛋白优化的纯化操作流程可以产生极高产量的洗脱组份。图1 展现了趋化因子受体4（CXCR4）的纯化过程。标记的目标蛋白在大肠杆菌中表达，用Fos-Choline®-14进行溶解，并在装有PureCube Rho1D4琼脂糖的预装柱上进行纯化。以Rho1D4肽作为洗脱剂，4个洗脱组分的蛋白质总复原浓度为0.8、1.0、0.85和0.6mg/mL。通过western blot显示CXCR4约在 65 kDa 和 35 kDa之间。这些条带代表 39.7 kDa 膜蛋白的二聚体和单体。单体和二聚体的分离，就像去除洗脱肽的方式一样，可以通过排阻层析的方式完成。
纯净且活性的膜蛋白
膜蛋白纯化结果无法用更常用的琼脂糖（如 Ni-NTA）进行保存。因此，Rho1D4是您获得纯净且活性的膜蛋白可以选择的方式。
图1.使用 Rho1D4 标记膜蛋白成功纯化的考马斯亮蓝色染色。A：~65kDa的蛋白质单体。B：~135kDA的四聚体。C： 异二聚体，均可见亚基，和一条较小的不可识别条带。怀疑为降解产物。
References:
1. Mattle D. et al.(2015). Mammalian Expression, Purification, and Crystallization of Rhodopsin Variants. In: Jastrzebska B. (eds) Rhodopsin. Methods in Molecular Biology, vol 1271. Humana Press, New York, NY
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3. Ahmed, Chulbul M., et al. "SRD005825 Acts as a Pharmacologic Chaperone of Opsin and Promotes Survival of Photoreceptors in an Animal Model of Autosomal Dominant Retinitis Pigmentosa." Translational Vision Science & Technology 8.6 (2019): 30-30.
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