来宝网 2014/7/1点击1261次
Western Blot 属于经验依赖性的多步骤实验，结果的优劣受到多个因素的影响，传统的手工操作容易引入误差，难以保证重复性。美国Precision Biosystems公司携手环亚生物科技有限公司（APG BIO）推出的BlotCycler全自动化的蛋白质印迹杂交系统可以很好的解决了这些问题。
BlotCycler 是全自动化的蛋白质印迹杂交系统Western Blot洗液工作站，自动化完成封闭、孵育、清洗和一抗回收的一系列工作，很好地解放您的劳动力。更为重要和有意义的是：专利的流体清洗可以减少二抗在膜上的附着，降低背景，提高信噪比和相对灵敏度；自动化的操作流程避免了手工操作的误差，保证了批次内和批次间实验的重复性；高通量操作和多条件的设定可以辅助您优化Western Blot 实验的条件，例如合适的抗体浓度。
自动化操作，可以获得更好的重复性
如上图所示，使用BlotCycler 平行处理5 张膜，检测Tubulin 和IL-2蛋白，条带信号使用分子量标准进行均一化处理，
目的条带的相对信号值在5 次实验中的偏差较小。由此可见，BlotCycler 的自动化操作能够保证较好的重复性
专利的流体技术降低背景，提高信噪比和相对灵敏度
通过一系列对比实验发现，使用BlotCyclerTM 进行Western Blot 可以获得更低的背景值，目的蛋白质条带更加清晰锐利。
如上图所示，泳道1、2、3 分别上样Hela 细胞的裂解液、重组的人IL-2 蛋白和前两者的混合物，加入小鼠源Tubulin
和兔源IL-2 的一抗，以及DyLight549 标记的抗鼠二抗和DyLight649 标记的抗兔二抗。
设立4 组平行实验：BlotCyclerTM 4℃环境操作，手工4℃环境操作，BlotCyclerTM 室温环境操作，手工室温环境操作，膜信号检测使用相应的荧光成像设备。不同组内蛋白条带的信号通过分子量标准品进行均一化处理。结果发现，使用BlotCyclerTM 操作所获得的IL-2 和Tubulin 的相对信号值均高于手工操作，不论是4℃还是室温环境。由此可见，BlotCyclerTM 的自动化操作确实能够降低背景值，提高信噪比和相对灵敏度。
通过以上对比我们可以看出，BlotCycler全自动化的蛋白质印迹杂交系统可以很好的避免手工所引起的误差，降低背景，提高信噪比和相对灵敏度，
对从事Western Blot实验的科研工作者来说是个不错的选择。
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