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人端粒酶(TE)ELISA试剂盒使用说明书

来宝网 2010/5/16点击1576次

人端粒酶(TE)ELISA试剂盒使用说明书

本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关

液体样本中端粒酶(TE)的含量。

实验原理:

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人端粒酶 (TE)水平。用纯化的人端粒酶 (TE)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入端粒酶 (TE),再与 HRP标记的端粒酶(TE)抗体结合,形成抗体 -抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB显色。 TMBHRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人端粒酶 (TE)呈正相关。用酶标仪在 450nm波长下测定吸光度( OD值),通过标准曲线计算样品中人端粒酶 (TE)浓度。
试剂盒组成:

试剂盒组成

      48孔配置

96孔配置

保存

说明书

1

1

 

封板膜

2片(48

2片(96

 

密封袋

1

1

 

酶标包被板

1×48

1×96

2-8保存

标准品:9000ng/L

0.5ml×1

0.5ml×1

2-8保存

标准品稀释液

1.5ml×1

1.5ml×1

2-8保存

酶标试剂

3 ml×1

6 ml×1

2-8保存

样品稀释液

3 ml×1

6 ml×1

2-8保存

显色剂A

3 ml×1

6 ml×1

2-8保存

显色剂B

3 ml×1

6 ml×1

2-8保存

终止液

3ml×1

6ml×1

2-8保存

浓缩洗涤液

20ml×20倍)×1

20ml×30倍)×1

2-8保存

 

样本处理及要求:

1.血清:室温血液自然凝固 10-20分钟,离心 20分钟左右( 2000-3000/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

2.血浆:应根据标本的要求选择 EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合 10-20分钟后,离心 20分钟左右( 2000-3000/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。

3.尿液:用无菌管收集,离心 20分钟左右( 2000-3000/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心 20分钟左右( 2000-3000/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用 PBSPH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞

浓度达到 100/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心 20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的 PBSPH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持 2-8的温度。加入一定量的 PBSPH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心 20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于 -20保存,但应避免反复冻融 .

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