来宝网 2009/12/3点击1636次
人组织因子途径抑制物(TFPI)ELISA试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
药品名称：
通用名：人组织因子途径抑制物(TFPI)酶联免疫分析试剂盒
使用目的：
本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中组织因子途径抑制物(TFPI)含量。
实验原理
本试剂盒应用间接法测定标本中人组织因子途径抑制物(TFPI)水平。用纯化的人组织因子途径抑制物(TFPI)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入已知浓度的组织因子途径抑制物(TFPI)标准品和未知浓度的TFPI待检样品，温育后，加入生物素标记的抗IgG抗体，再与链霉亲和素-HRP结合，形成免疫复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的组织因子途径抑制物(TFPI)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人组织因子途径抑制物(TFPI)浓度。
试剂盒组成
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1 |
20倍浓缩洗涤液 |
50ml×1瓶 |
9 |
标准品S1（90μg/L） |
0.5ml×1瓶 |
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2 |
链霉亲和素-HRP |
6ml×1瓶 |
标准品S2（60μg/L） |
0.5ml×1瓶 |
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3 |
酶标包被板 |
12孔×8条 |
标准品S3（30μg/L ） |
0.5ml×1瓶 |
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4 |
生物素标记的抗-IgG抗体 |
6ml×1瓶 |
标准品S4（15μg/L ） |
0.5ml×1瓶 |
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5 |
显色剂A液 |
6ml×1瓶 |
标准品S5（7.5μg/L） |
0.5ml×1瓶 |
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6 |
显色剂B液 |
6ml×1/瓶 |
10 |
密封袋 |
1个 |
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7 |
终止液 |
6ml×1瓶 |
11 |
封板膜 |
3张 |
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8 |
样品稀释液 |
6ml×1瓶 |
12 |
说明书 |
1份 |
标本要求
1．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
2．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于
操作步骤
1. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品，其余各步操作相同）、标准品孔、待测样品孔。然后在标准品孔中加入标准品50μl，在样本反应孔中先加入待测样品10μl再加入样品稀释液40μl（样品最终稀释度为5倍），盖上封板膜，轻轻振荡混匀，
3. 配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
4. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复4次，拍干。
5. 加生物素标记的抗-IgG抗体：每孔加入生物素标记的抗-IgG抗体50μl。
6. 洗涤：操作同4。
7. 加链霉亲和素-HRP：每孔加入50μl的链酶亲和素-HRP 推荐仪器
