来宝网移动站

庚型肝炎病毒检测

    庚型肝炎病毒(HGV)呈世界性分布，与人类急性和(或)慢性肝炎有关。主要以血液途径传播，如输血及血制品、静脉吸毒、使用污染的注射器、经常接触血源等。HGV为单股正链RNA病毒，基因组全长9 392个核苷酸。基因结构分为：5’非编码区、编码区(结构区和非结构区)、3’非编码区，结构区编码核心蛋白和包膜蛋白，非结构区有NSl、NS2、NS3、NS4、NSs等5个区，其中NS2编码蛋白酶。庚型肝炎病毒(HGV)实验室检测指标主要为HGVAb-IgG。

    [测定方法]  ELISA法

    [方法学原理]  庚型肝炎病毒(HGV)特异性抗原预包被于微孔板条上，样品加入已有样品稀释液的反应孔中，在随后的温育过程中，若样品中含特异性抗体(HGVAb—IgG)，则该抗体与包被抗原形成抗原—抗体复合物被吸附到微孔板上，再加入酶标记的第2抗体，最终形成抗原—抗体—酶标记第2抗体复合物，洗涤除去未结合的游离酶，加入显色剂后显色。反之，若样品中不含特异性抗体(HGVAb-IgG)，则加入显色剂后不显色。

    [标本准备]  静脉抽血2ml，不抗凝。

    [试剂]

    1．包被反应板

    2．样品稀释液

    3．阴性对照

    4．阳性对照

    5．洗涤剂

    6．酶标记第2抗体

    7．显色剂A、B

    8．终止液

    [仪器设备]  酶标仪或全自动酶联免疫检测仪。

    [测定步骤]

    1．用加样器在微孔反应条中加入样品稀释液，每孔100ul。

    2．将待测标本各l0ul分别加人已有样品稀释液的各孔中，直接加阴性对照、阳性对照各100u1，设空白对照1孔。

    3．充分混匀，37℃环境中温育20min。

    4．倾去内容物，用洗涤液洗板5次，确保每次吸净无残留，全部洗完后在吸水纸上用力拍干。

    5．各孔加入酶标记第2抗体100fA，振荡混匀。

    6．倾去内容物，用洗涤液洗板5次，确保每次吸净无残留，全部洗完后在吸水纸上用力拍干。

    7．每孔加入显色剂A、B各1滴，显色10min。

    8．终止显色后，在酶标仪上比色(波长为450nm)，样品吸光度大于阴性对照2．1倍者为阳性。

    [注意事项]

    1．试剂盒从冷藏环境中取出时应置室温平衡30min后方可使用，未用完的微孔条用自封袋密封保存，温育酶标板的时间和温度必须严格控制。

    2．加液时必须用移液器，并经常校对移液器的准确性。

    3．洗涤时各孔均需加满洗涤液，防止孔内有游离酶不能洗净。使用洗板机洗涤应设定30～60s浸泡时间。

    4．所有样品和废弃物都应按传染源处理，终止液为2mol／L的硫酸，使用时必须注意安全。

    5．操作过程中禁止将预包被微孔板与其他试剂、次氯酸类消毒剂接触。

    [正常参考值]  HGVAb-IgG阴性

    [临床意义]  HGVAb-IgG阳性是对HGV进行诊断的重要依据。HGVAb-IgG持续时间较长，具有流行病学调查意义。

厦门慧嘉生物科技有限公司专业提供各品牌ELISA试剂盒

详情请登入: http://www.biohj.com

查询，或联系0592-6020891  18906011628  邮箱：sale@biohj.com