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EB病毒抗体IgA(EBVAb-IgA)检测

    [测定方法]  ELISA法

    [方法学原理]  将纯化的EB病毒抗原预包被于微孔板上，若待测样本中存在EBVAb-IgA，则可与微孔板上预包被的EB—VAg结合，再加入酶联试剂与抗原抗体复合物结合，在显色剂作用下发生显色反应，颜色的深浅与样本中抗体含量呈正相关。

    [标本准备]  静脉抽血2ml，不抗凝。

    [试剂]

    1．微孔板

    2．样品稀释液

    3．酶结合物

    4．阴性对照

    5．阳性对照

    6．洗涤剂

    7．TMB显色液

    8．终止液

    [仪器设备] 酶标仪或全自动酶联免疫检测仪。

    [测定步骤]

    1．将待检血清编号，用样品稀释液作1：100稀释。

    2．根据用量取出相应孔数的微孔板条，其余部分密封后4℃保存。

    3．加入已稀释的待检血清，阴性对照，阳性对照各100t．tl至反应孔内，阴性对照、阳性对照设复孔，设空白对照1孔(空白孔不加任何试剂)，振荡混匀，37C环境中温育1h。

    4．弃去孔中液体，用洗涤液洗涤5次，拍干。

    5．每孔加入酶标记物100fA，混匀，37℃环境中水浴1h。

    6．弃去孔中液体，用洗涤液洗涤5次，拍干。

    7．向每孔加入底物A液和底物B液各2滴，置室温环境中10min，每孔再加终止液50ul终止反应。

    8．空白对照(只加蒸馏水200g1)校零，在波长450nm处读取各孔的OD值，凡样品孔OD大于或等于阴性对照孔 2倍，该样品即为阳性。

    [正常参考值]  EBVAb—IgA阴性

    [注意事项]

    1．使用前试剂盒应预先在室温环境中平衡30min。

    2．试剂盒在2～8℃避光保存，启用后应尽快用完。

    3．不同批次的试剂组分不能混用。

    4．实验后试剂、血清标本均应视为有传染性物质。

    5．用滴瓶滴加时，滴瓶应垂直，用力和速度应均匀；加样后充分混匀。

    [临床意义]  EBVAb-IgM阳性是EBV近期感染的指标，常见于传染性单核细胞增多症。该抗体在患者感染不久后就转阳，但通常存在时间较短。

    EBVAb—IgA阳性见于鼻咽癌，可用于鼻咽癌疗效观察与预后判断；也可见于肺癌、甲状腺癌、慢性鼻咽部炎症，但阳性率一般不高。正常人也有部分阳性，阳性率约为3．4％。

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