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免疫化学发光法(双抗体夹心法)测定IgE

    [检测方法]  免疫化学发光法(双抗体夹心法)。

    [方法学原理]  加入与磁性颗粒共价结合的鼠抗人IgE抗体、待测标本以及吖啶酯标记的羊抗人IgE抗体(1gElite试剂)，经过温育形成固相包被抗体—抗原(1gE)—吖啶酯标记抗体复合物，经洗涤后，加人氧化剂(H₂O₂)发光，其光量子数与IgE浓度呈良好的线性相关。通过光量子数与IgE浓度制作标准曲线，根据样本产生的光量子数可得出IgE含量。

    [标本准备]  静脉血2ml，不抗凝。

    [试剂]

    1．免疫化学发光法配套试剂及定标液

    2．质控物(高、中、低)

    [仪器]  ACSl80免疫发光仪。

    [检测步骤]

    1．将血清编号后加入反应管内，插入样品盘；

    2．将试剂放入试剂盘；

    3．将编号及样品盘号对应输入电脑，并选择检测项目IgE，保存；

    4．按START键运行。

    5．ACSl80仪将30／Il样本液装入反应杯中；将100u1 IgE lite试剂与450ul总IgE固相试剂加入，并于37℃环境中温浴7．5min；用去离子水冲洗、分离反应相；加入300tA试剂1与试剂2以启动光化学反应，反应完成后自动报告结果(详情见各仪器系统操作说明)。

  [正常参考值]  0—378U／m1

  [注意事项]

  1．试剂取出应充分混匀。

  2．样本应充分凝固，无纤维、气泡及其他物质。

    3．样本检测应在8h内完成，否则应置2～8℃保存。

    4．48h内不检测，应将样本于一20℃冻存，且只能冻融1次。

    5．若试剂室温放置超过40h应弃之不用，不使用任何过期试剂。

    [临床意义]  IgE升高，主要见于过敏性疾病。在感染性疾病中，如寄生虫感染、支气管—肺曲霉菌病也可升高。

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