来宝网 2009/9/24点击2081次
速率散射比浊法检测补体C3、C4
补体(complement，C)是由近20种不同血清蛋白组成的多分子系统，约占血清球蛋白总量的10％。补体在血清中的含量相对稳定，不因免疫应答而增加，仅在某些病理情况下才会发生波动。补体系统的基本组成包括9种血清蛋白成分，按发现的先后顺序而分别命名为C1-9。补体是一个复杂的反应系统，除了溶解细胞和协助杀菌作用外，还可促进炎症反应，与其他生物活性系统有相互促进、相互制约的关系，这些关系的紊乱是导致许多疾病损伤的物质基础。C3是一种β球蛋白，是补体中含量最多、作用最重要的一个组分，是补体两条主要激活途径的中心环节，有重要的生物活性作用，可在肝脏中产生。C4是由肝脏、巨噬细胞合成的，参与经典激活途径，是补体中含量仅低于C3的重要组分。常用检测方法为速率透射比浊法、速率散射比浊法等。
[检测方法] 速率散射比浊法
[方法学原理] 抗原(C3、C4)与抗体(抗C3、抗C4)在液相中可快速反应，形成的免疫复合物颗粒具有特殊的光学特性，使反应液出现浊度。速率是指单位时间内抗原、抗体形成免疫复合物的速度。随着时间的延长免疫复合物总量是逐渐增加的，而速率变化为慢+快一慢，其反应速率最快的某一时间称为速率峰。当反应体系中的抗体量过剩时，速率峰的高低只与C3、C4含量成正比，仪器将测得的速率峰值通过对应的标准曲线转换成相应的C3、C4浓度。
[标本准备] 空腹静脉血2ml，不抗凝。
[试剂] 免疫比浊仪配套C3、C4试剂盒，内含有稀释液、缓冲液、抗血清等，按说明书配制。
[仪器] 全自动特种蛋白分析仪。
[检测步骤]
1．标本处理，3 500rpm离心lOmin，分离血清。
2．根据操作程序进行样品测定：
(1)输入杯号；
(2)选择所测项目C3、C4；
(3)存盘；
(4)编程完毕后，将标本放人标本杯中，且放入标本盘中相应位置，将所做项目的试剂放人试剂盘中相应位置，确认无误后，开始运行特种蛋白分析仪。
[正常参考值] C3：0．8～1．
[注意事项]
1．试剂盒从冷藏环境中取出时应置室温环境中平衡。
2．试剂瓶盖打开时应注意打破瓶口的液膜，以防液感仪感应错误。
3．血清中若含有脂类应高速离心分离脂质，防止假浊度产生。
[临床意义] 在感染性疾病中，急性感染期可见C3、C4增高。由于补体在肝细胞中合成，所以重症病毒性肝炎、慢性病毒性肝炎，特别是转化为肝硬化后，C3、C4水平均下降。
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