来宝网 2009/8/17点击1851次
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人抗小反刍兽疫抗体(PPR)ELISA试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
药品名称:
通用名:人抗小反刍兽疫抗体(PPR)酶联免疫分析试剂盒
使用目的:
本试剂盒用于定性测定人血清,血浆及相关液体样本中抗小反刍兽疫抗体(PPR)。
实验原理
本试剂盒采用间接法测定标本中人抗小反刍兽疫抗体(PPR)。用纯化的小反刍兽疫PPR)抗原包被微孔板,制成固相抗原,与样品中抗小反刍兽疫抗体(PPR)温育后,加入生物素标记的抗IgG抗体,再与链霉亲和素-HRP结合,形成免疫复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中人抗小反刍兽疫抗体(PPR)的存在与否。,
试剂盒组成
1 |
20倍浓缩洗涤液 |
50ml×1瓶 |
8 |
样品稀释液 |
6ml×1瓶 |
2 |
链霉亲和素-HRP |
6ml×1瓶 |
9 |
阴性对照 |
0.5ml×1瓶 |
3 |
酶标包被板 |
12孔×8条 |
10 |
阳性对照 |
0.5ml×1瓶 |
4 |
生物素标记的抗-IgG抗体 |
6ml×1瓶 |
11 |
密封袋 |
1个 |
5 |
显色剂A液 |
6ml×1瓶 |
12 |
封板膜 |
3张 |
6 |
显色剂B液 |
6ml×1/瓶 |
13 |
说明书 |
1份 |
7 |
终止液 |
6ml×1瓶 |
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标本要求
1.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于
操作步骤
1. 编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔
2. 加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,
3. 配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
4. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复4次,拍干。
5. 加生物素标记的抗-IgG抗体:每孔加入生物素标记的抗-IgG抗体50μl。
6. 洗涤:操作同4。
7. 加链霉亲和素-HRP:每孔加入50μl的链酶亲和素-HRP,轻轻振荡混匀,
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