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人纤维介素蛋白(fgl2) ELISA试剂盒使用说明书

来宝网 2009/8/17点击1542次

厦门慧嘉生物科技专业代理和经销众多国际生命科学领域的知名品牌。致力于各种生物试剂、抗体、ELISA试剂盒、耗材、仪器的销售推广及服务工作。ELISA试剂盒代理国外R&DUCLRBGBD等各品牌试剂盒。各种标本、种属、具体指标齐全。种属非常齐全:标本种类较多:

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纤维介素蛋白(fgl2) ELISA试剂盒使用说明书

本试剂盒仅供研究使用。

药品名称:

通用名:纤维介素蛋白(fgl2)酶联免疫分析试剂盒

使用目的:

本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中纤维介素蛋白(fgl2)含量。

实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人纤维介素蛋白(fgl2)水平。用纯化的人纤维介素蛋白(fgl2)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入纤维介素蛋白(fgl2)再与HRP标记的纤维介素蛋白(fgl2)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMBHRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的纤维介素蛋白(fgl2)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人纤维介素蛋白(fgl2)浓度。

试剂盒组成

1

20倍浓缩洗涤液

30ml×1

7

终止液

6ml×1

2

酶标试剂

6ml×1

8

标准品(360ng/L

0.5ml×1

3

酶标包被板

12孔×8

9

标准品稀释液

1.5ml×1

4

样品稀释液

6ml×1

10

说明书

1

5

显色剂A

6ml×1

11

封板膜

2 

6

显色剂B

6ml×1/

12

密封袋

1

标本要求

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20保存,但应避免反复冻融

2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤

1.         标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为240ng/L160ng/L 80ng/L40ng/L 20ng/L)。

2.         加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3.         温育:用封板膜封板后置37温育30分钟。  

4.         配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用

5.         洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6.         加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7.         温育:操作同3

8.         洗涤:操作同5

9.         显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37避光显色15分钟.

10.     终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11.    

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