来宝网 2014/7/17点击967次
蛋白胨细胞不易培养，只有在适宜情况下，如接种在胶原底层上，或加入神经生长因子和胶质细胞因子时，可出现一定程度的分化，长出突起等现象，但很难使之增值。而神经胶质细胞是神经组织中比较容易培养的成分。
人、鼠等脑组织即可用于神经胶质细胞培养，不仅能获得生长的胶质细胞，也可形成能传代的二倍体细胞系。一般说来，胶质细胞在培养中生长不稳定，不易自发转化，但对外界因素仍保持很好的敏感性，可用ROUS病毒和SV4等诱发转化。
其方法如下：
1、从手术室无菌取脑髓灰质或白质后，仔细剥除脑膜、血管和纤维成分，置Hanks液中漂洗一、二次。
2、置于30—50倍体积的Hanks液中，此时脑组织比较柔软，反复吹打即制成细胞悬液。
3、把悬液注入离心管室温中直立5—10分钟后，蛋白胨细胞或细胞团快自然下沉，脂肪等杂物易漂浮，可吸除上层、反复二、三次，即可排除脂肪成分和其它碎块并获较多细胞成分。
4、在沉降物中加入适量培养液，通过纱网成纱布过滤，计数并调整细胞密度。
5、接入培养瓶或皿中，置5%CO2温箱中培养。
该细胞适应环境过程较长，接种后贴壁较慢。贴壁后短期内也可能不见细胞分裂现象，然而一旦生长后即能迅速进入旺盛的增殖状态。细胞传代可以0.25%胰酶消化处理。
用于梭菌的分离培养(Merck方法) Reinforced Clostridium Medium 强化梭菌培养基(RCM) 250
用于产气荚膜梭菌的平板计数(Merck方法) TSN Agar TSN 琼脂 250
用于乳酪产品中梭菌的计数(Merck方法) Tyrobutyricum Broth Base TBB 培养基 250
用于厌氧菌的糖生化反应(Acumedia 方法) CHO Medium Base CHO培养基基础 250
用于厌氧菌的分离培养(Acumedia 方法) SCHAEDLER AGAR SCHAEDLER 琼脂 250
用于厌氧菌的分离培养(Acumedia 方法) WILKINS-CHALGREN AGAR WILKINS-CHALGREN琼脂 250
