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利用高速冷冻离心机提取南芥基因组DNA

来宝网 2012/11/5点击1877次

利用高速冷冻离心机提取南芥基因组DNA实验步骤:

    1. 取新鲜采摘的植物拟南芥叶片1-2片,加入0.4mL CTAB提取液,放入研钵中研磨至均匀。

    2. 将研磨好的悬浊液进行装样,用移液管将研磨液加入入1.5 mL离心管中,并放在65℃水浴锅中水浴45分钟。

    3. 加入等体积的氯仿抽提,然后将离心管对称放入高速冷冻离心机转子上,平衡装载转子,将转速调制12000r/min,高速运转5分钟。

    4. 离心后倾取上清液,并在上清液中加入2倍体积的无水酒精,将酒精与上清液混匀后,移入离心管中,再次使用高速冷冻离心机www.ytyq.com离心5分钟。

    5. 倾去上清液,然后在离心管中加入70%的酒精进行洗涤。

    6. 短时间离心来去除酒精,将离心后的样品晾干后加入适量水将样品溶解。

    这样拟南芥基因组DNA溶液就支制成了,我们可以进行下一阶段对南芥基因组DNA的实验和检测。离心技术在生物学科的应用非常广泛,其中高速冷冻离心机在实验室细胞组分提取,分离以及提纯发挥着不可估量的作用。本实验主要是介绍如何利用高速冷冻离心机来提取拟南芥基因组DNA的详细步骤。

    附:实验试剂、设备和原料

    实验用到的试剂:CTAB提取液(2%CTAB,50mMEDTA,50mM Tris-HCl,PH 8.0,0.84M NaCI,0.05%巯基乙醇),氯仿,无水酒精,70%的酒精

    实验用到的设备:1.5 mL离心管,65℃水浴锅,高速离心机,研钵

    实验原料:拟南芥叶片

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