来宝网 2022/6/12点击930次
随着干细胞治疗和基于类器官药物开发的技术推进，基质胶作为干细胞培养和类器官、3D细胞培养的营养和支持载体，在其中发挥着举足轻重的作用，其它应用包括血管生成、体内成瘤实验等。基质胶是从富含胞外基质蛋白EHS小鼠肿瘤中提取取的可溶性基底膜制备物，其主要成分由层粘连蛋白，Ⅳ型胶原，巢蛋白等组成，还包如TGF-β、EGF、IGF、FGF等多种生长因子。在室温条件下，基质胶聚合形成具有生物学活性的三维基质，能模拟体内细胞基底膜的结构、组成、物理特性和功能，有利于体外细胞的培养和分化。 翌圣生物开发生产的CeturegelTM基质胶不含LDEV（乳酸脱氢酶增高病毒），超低内毒素含量，并全部经过支原体检测保证无支原体污染，包括基本浓度、高浓度、低生长因子等不同类型。 安全性高：不含LDEV（乳酸脱氢酶增高病毒） 浓度多样性：浓度范围在8~20 mg/ml之间 批次稳定性好：严格生产质检过程保证批次间性能稳定 低内毒素：内毒素含量≤4 EU/ml 污染物检测： 经检测无支原体和细菌、真菌残留 单批产量高：单批产量在L级别以上 兼容性好：可与任何类型的细胞培养基兼容 迁移侵袭实验 在Transwell上室加入稀释后CeturegelTM基质胶，铺上细胞并置于37℃、5%CO2培养箱内孵育24h后，4%多聚甲醛中固定后用含0.1％的结晶紫染液染色，在倒置相差显微镜下观察并计数细胞。 
图1.细胞侵袭后经结晶紫染色的结果 3D细胞培养 将CeturegelTM基质胶与调整好浓度的单细胞HepG2悬液1:1轻轻混匀，用预冷的移液枪头按50μl上述混匀单细胞悬液加入预冷24孔板中，使其形成拱型细胞液滴，于37℃、5%CO2培养箱培养，每天观察并拍照记录。 图2.3D细胞培养结果 表1：3D细胞培养基质胶使用参考 培养板（皿）类型 细胞培养面积（cm2） 推荐量(浓度≥3 mg/mL)* 6孔板 9.6 200 μL/cm2 12孔板 4.5 180 μL/cm2 24孔板 2 180 μL/cm2 96孔板 0.32 160 μL/cm2 35mm培养皿 11.78 200 μL/cm2 100mm培养皿 58.95 200 μL/cm2 注：不同批次基质胶有一定的浓度差异，推荐用量仅供参考。 类器官培养 图3.类器官操作流程 01 拿到的基质有色差的变化（淡黄色到深红色）是什么原因？ 对于含酚红的基质胶主要原因是由于酚红和碳酸氢盐与CO2作用引起的，但是与5％CO2平衡后色差即会减少。冻融后，轻轻摇晃试剂瓶使基质胶分散均匀。 02 基质胶的操作要注意哪些事项？ 所有操作需在无菌环境下进行，应使用预冷的移液器以保证基质胶呈匀浆状。 03 基质胶的如何分装冻存使用？ 可将冻融后的CeturegelTMMatrix LDEV-Free基质胶分装在多个小管，所有分装均需用预冷的冻存管，迅速冷冻并保存，避免多次冻融。所有涉及到使用的物品在使用前需预冷，使用预冷的移液管、吸头及小管等操作基质胶。 产品类型 产品名称 产品货号 规格 基本浓度 40183ES08/10 5/10 mL CeturegelTM Matrix Phenol Red-Free，LDEV-Free 基质胶 40184ES08/10 5/10 mL 低生长因子 40185ES08/10 5/10 mL CeturegelTM Matrix GFR， Phenol Red-Free，LDEV-Free 基质胶 40186ES08/10 5/10 mL 高浓度 CeturegelTM Matrix High Concentration，LDEV-Free 基质胶 40187ES08/10 5/10 mL CeturegelTM Matrix High Concentration，Phenol Red-Free，LDEV-Free 基质胶 40188ES08/10 5/10 mL CeturegelTM Matrix High Concentration，GFR，LDEV-Free 基质胶 40189ES08/10 5/10 mL 干细胞专用 CeturegelTM Matrix hESC-Qualified，LDEV-Free 基质胶 40190ES08/10 5/10 mL 类器官专用 CeturegelTM Matrix for Organoid culture，Phenol Red-Free，LDEV-Free 基质胶 40191ES08/10 5/10 mL 点击上方蓝字产品名称，查看详情
