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血清的存在会影响脂质体的形成，建议配制核酸转染试剂复合物时采用无血清培养基（一般推荐MEM 培养基）。

不能。本试剂一定要4 ℃保存，要注意避免反复多次长时间开盖，长时间开盖会导致脂质体氧化而影响转染效率。

1）细胞铺板密度较高，以90%-95%为佳；

2）使用高纯度的DNA有助于获得较高的转染效率；

3）制备转染复合物时要求用无血清培养基稀释DNA和转染试剂；

4）转染的时候培养基中不能添加抗生素；

5）试剂应该在4度保存，要注意避免多次反复长时间开盖；

6）初次使用应优化DNA浓度和阳离子脂质体试剂量以得到最大的转染效率。DNA 和转染试剂的比例，通常推荐是1:2-1:3。

不需要。脂质体复合物可以稳定存在6个小时。如果在进行转染前没有进行细胞换液，为了保证细胞正常生长所需的营养，需要在4～6小时后换用新的培养基。但如果转染之前已进行过换液则在脂质体转染后不需要进行再次换液。

1）转染时细胞的密度，90%-95%。

2）转染时，核酸和脂质体稀释液要用MEM无血清培养基。

3）转染后4-6h可选择换液。

DNA和siRNA的共转染时候，siRNA转染效率差。

1）siRNA由于只有二十几个碱基对，相比DNA几千上万对碱基，小了许多。

2）用于转染DNA的转染试剂和方法并不适用于转染siRNA。

3）siRNA转染比DNA转染对转染试剂细胞毒性的要求严格。

对于换液可以区分两种情况：

1）转染之前如果没有换液应在转染6 小时左右后换液，以保证细胞生长所需营养。

2）如果转染之前如果有换液，可以按照平时等到培养基出现营养不足时换液。

不可冻存，因为转染试剂是一种PEI阳离子转染试剂，低温下冻存，会破坏PEI转染试剂的活性，因此最好是4 度储存，保持最好的转染效能。

1）转染时细胞的密度，90%-95%。

2）转染时，siRNA和脂质体稀释液要用Opti-MEM 无血清培养基。

3）转染后4-6h 可选择换液。

与许多其他转染试剂相反，在有血清的环境下，jetPRIME的效率更高。因此，转染复合物可以直接加到含血清培养基的细胞中。

该比值指的是每微克DNA相对应的jetPRIME微升数。例如，DNA/jetPRIME比值为1: 2意思是每微克DNA加2微升jetPRIME。

jetPRIME的转染效率不受抗生索的影响。jetPRIME的常规批次质检都是在含血清和抗生索的培养基中进行的。

优化的第1步是将DNA的量增加1.5倍。我们也推荐增加DNA/jetPRIME比值(每μg的DNA，2-3μl jetPRIME)。另一种方法是缓慢离心培养板(5 min at 210g)。

细胞密度和传代次数将影响转染效率。我们推荐细胞融合度在60%至80%。对于使用jetPRIME的转染优化条件，请参见jetPRIME转染说明书中的Table1，根据不同培养板推荐的细胞数。此外，如果细胞已经培养很长时间(超过20代)，我们建议从液氮中取1管新细胞，重新进行培养。

已优化的jetPRIME操作步骤可用于多种细胞，例如A549, MCF7, U-2 OS, NIH-3T3, B16-F10, Caco-2等。但是，我们也提供了针对具体细胞的特异性操作步骤，以便获得更高的转染效率。这些具体条件可以参见Polyplus cell transfection database。