来宝网 2021/9/22点击963次
▲ 图源Pixabay ▲ 图源Pixabay RAW264.7细胞具有强吞噬能力,细胞在吞噬抗原后释放趋化因子,促使细胞分化出伪足,因此造成细胞极难消化。细胞吞噬抗原过多、培养环境恶劣都易促使细胞呈现梭形,造成最终实验数据不理想。 有时细胞看起来一切正常,但却生长缓慢,究其原因多半是感染了支原体,支原体感染导致生长变慢、状态变差,虽不会马上致死,但会影响其机体内的各种参数,且难以被观察到,是影响细胞状态的隐形杀手。 在日常培养过程中发现RAW264.7细胞容易出现的问题主要为以下几种:1.复苏不易成功2.细胞形态变异明显3.消化困难4.细胞生长缓慢,当你的细胞培养遇到上述瓶颈,不妨试一试以下几种解决办法。 复苏难以成功 原因:RAW264.7对空间十分敏感,复苏密度太高,细胞增殖太快,加剧细胞营养缺失,加速细胞老化。 细胞变异明显 原因:细胞吞噬抗原过多、培养环境恶劣都会促使该细胞呈现梭形、长梭形 消化困难 原因:细胞老化后,细胞伪足多且长,使细胞难消化,使用胰酶或细胞刮会对细胞损伤较大 生长缓慢 原因:支原体污染会导致细胞生长缓慢,甚至难以贴壁 ▲ 图1.一步法支原体检测操作流程 ▲ 图2.Yeasen MycAwayTM 支原体去除效果的展示 ▍ 支原体去除试剂的特点 » 稳定性强:-20℃试剂能较长时间保存并保持高效用; » 操作简单:只需将产品添加至支原体污染的培养基中孵育即可; » 起效快:最快3天即可见效; ▲ 图3.支原体去除试剂细胞毒性检测图示 限时线下促销正在进行,详情请咨询当地销售 类别 产品 货号 规格 支原体检测 40601ES10/20 10/20 assays MycAway™ Plus-Color One-Step Mycoplasma Detection Kit 一步法快速支原体检测试剂盒 40612ES25/60 25/100T 支原体 40605ES02/03 1 / 2×500 mL MycAway™ Treatment (1000×)-Mycoplasma Elimination Reagent MycAway™ 支原体去除试剂(1000×) 40607ES03/08 1/ 5×1mL 支原体 MycAway™ Prophylactic (2000×)-Mycoplasma Prevention MycAway™ 支原体预防试剂(2000×) 40608ES03/08 1/5×1 mL MycGuard™-1 Solution (100×), for Disinfecting Water Bath of CO2 Incubator 细胞培养箱水盘1号消毒卫士 40609ES60 100 mL MycGuard™-2 Solution (500×), for Disinfecting Ordinary Water Bath 40610ES60 100 mL
解决办法:T75培养瓶复苏细胞数量控制在104~105
解决办法:改善细胞培养环境,例如与细胞接触的玻璃器皿均高温灭菌,换flask培养瓶,采用一次性器具,使用质量较高的胎牛血清
解决办法:无需胰酶使用吸管重复吹打,可消化大部分正常状态的细胞;但若细胞为“长脚”状态,即使加入胰酶消化超过10min,也难以消化下来,勉强消化,对后续的实验数据也有较大影响。
解决办法:定期进行支原体检测(如翌圣生物一步法恒温支原体检测试剂),如发现支原体污染,即刻使用支原体去除试剂(如翌圣生物MycAwayTM 支原体去除试剂)
去除试剂
预防试剂
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