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蛋白提取系列专题

-多方位获取您所需要的样本蛋白

背景介绍

蛋白质种类很多，在理化特性方面差异较大，因此不可能有一个固定的程序适用各类蛋白质的分离。动物蛋白提取一般遵循如下原则：尽可能提高蛋白的溶解度，抽提最大量的总蛋白，减少蛋白质的损失；减少对蛋白质的人为修饰；破坏蛋白与其他生物大分子的相互作用，并使蛋白质处于完全变性状态。

产品信息

1、裂解液形式：

RIPA裂解液（Radio Immunoprecipitation Assay Lysis buffer，放射免疫沉淀法裂解缓冲液）是一种传统的可用于裂解细胞或组织的快速裂解液，其原理为利用表面活性剂等裂解细胞膜（包括核膜），从组织或动物细胞中抽取可溶性蛋白。RIPA裂解液裂解后得到的蛋白一般可直接用于常规的WB、IP、co-IP等实验。

2、Kit形式：

蛋白提取实验是蛋白功能研究，客户可购买商品化的蛋白提取试剂盒。图1简单的介绍了不同部位蛋白提取所利用的提取试剂盒，并且需要注意以下事项：

（1）所要研究的样本种属----动物 、植物、细菌、真菌、昆虫、酵母等；

（2）蛋白获得的部位----总蛋白、膜蛋白、核蛋白、跨膜蛋白等；

（3）下游的实验---考虑提取得到蛋白的活性等；

FAQ

1.如何选择合适的RIPA裂解液？

如果您只是要做普通的WB、IP或者co-IP，我们建议您使用免疫印迹及免疫沉淀用（WB/IP）裂解液(20118)，该裂解液在裂解细胞或组织后一般不会形成粘滞的透明状DNA团块，不必采用超声处理就可进行下一步操作。同时，该裂解液还适用于磷酸化蛋白的WB检测。

如果使用免疫印迹及免疫沉淀用（WB/IP）裂解液(20118)的效果不是很好，那您的蛋白可能比较特殊，我们建议您可以尝试另外几种裂解液。如果您的蛋白是难溶性的蛋白，建议您可以尝试使用裂解强度更高的裂解液，如RIPA裂解液(强/中)；如果您在做IP实验的时候发现背景很高，即有很多非特异性蛋白被IP下来，这时候您需使用裂解强度较强的裂解液，比如RIPA裂解液(强/中)。反之，如果您发现目的蛋白无法IP下来，则说明您使用的裂解液强度过强，此时需使用裂解强度较弱的裂解液，比如RIPA裂解液(弱)。

2. RIPA裂解液可以获得细胞中的不同蛋白吗？ 

RIPA裂解液提取的是全蛋白，包括核蛋白、浆蛋白、膜蛋白等。如果要提取特定的蛋白（如：核蛋白、膜蛋白）则可利用专门提这类蛋白的试剂盒进行提取。

文献引用

[1] Yang Zhang, Zhixue Fang, Xiong Guo, et al. lncRNA B4GALT1‐AS1 promotes colon cancer cell stemness and migration by recruiting YAP to the nucleus and enhancing YAP transcriptional activity[J]. Journal of Cellular Physiology, 2019,234(10): 18524-18534.

20126ES50 和20101ES60  IF:4.522

[2] Li Z, Han S, Jia Y, et al. MCPIP1 regulates RORα expression to protect against liver injury induced by lipopolysaccharide via modulation of miR‐155[J]. Journal of cellular physiology, 2019, 234(9): 16562-16572.   

20126ES50   IF:4.522

[3] Wang Q, li Wu Z, Yuan X, et al. Bilobetin induces kidney injury by influencing cGMP-mediated AQP-2 trafficking and podocyte cell cycle arrest[J]. Phytomedicine, 2019, 64: 153073.    

20127ES50   IF:4.18

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RIPA   IF: 4.067

[5] Liu X Y, Li D, Li T, et al. Effects of intranasal oxytocin on pup deprivation-evoked aberrant maternal behavior and hypogalactia in rat dams and the underlying mechanism[J]. Frontiers in neuroscience, 2019, 13: 122.

RIPA   IF: 3.648

[6] Han S, Li Z, Han F, et al. ROR alpha protects against LPS-induced inflammation by down-regulating SIRT1/NF-kappa B pathway[J]. Archives of biochemistry and biophysics, 2019, 668: 1-8.  

20126ES50  IF: 3.559

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