来宝网 2020/5/8点击1344次
翊圣生物全能核酸酶Benzonase Nuclease
——核酸消除的“终极武器”
翊圣生物研发团队利用一流的基因工程改造技术，研制而成的核酸去除的“终极武器”—全能核酸酶，既保证了产品的纯度与酶活，又确保了产品的稳定性，目标客户攘括工业端与科研端两大科学研究链，可满足广大生物研究者的基本需求。
翊圣核酸酶，严格把控，品质优先
1、质检项目
货号 | 表达宿主 | 活性 | 内毒素 | 浓度 | 纯度SDS-PAGE | 纯度SEC-HPLC | 细菌检测 | 蛋白酶检测 |
翊圣20125（工业） | 酵母菌 | √ | √ | √ | √ | √ | √ | √ |
翊圣20156（科研） | 大肠杆菌 | √ | √ | √ |
2、质检结果
核酸酶超强特性
特性一：耐受性强
试剂 | 耐受剂量 | 耐受程度 |
盐酸胍 | >100 mM | 完全抑制Benzonase活性 |
EDTA | 1 mM | 部分抑制Benzonase活性 |
5 mM | 活性丧失90% | |
PMSF | 1 mM | 不会抑制Benzonase活性 |
Triton® X-100 | 浓度<0.4% | 保持70%的活性 |
浓度<0.4%<1% | 活性急剧降低 | |
浓度＞1% | 活性丧失70% | |
SDS | 浓度在0.1%~1% | 活性急剧降低 |
尿素 | >6 M | 活性急剧降低 |
特性二：操作简易，轻松使用
1、推荐使用条件
条件参数 | 最佳条件 | 有效条件 |
Mg2+ | 1-2 mM | 1-10 mM |
pH | 8-9 | 6-10 |
温度 | 37℃ | 0-42℃ |
DTT | 0-100 mM | >0 mM |
巯基乙醇 | 0-100 mM | >0 mM |
单价阳离子 | 0-20 mM | 0-150 mM |
磷酸根离子 | 0-10 mM | 0-100 mM |
2、推荐使用量
实验类型 | 蛋白电泳样品 | 药物生产-1g | 疫苗、病毒生产-1L | 细胞培养-1L |
推荐产品 | Benzonase（科研级，20156） | Benzonase（无内毒素级，20125） | ||
最低要求 | 125 U（0.5 µL） | 25 U/mL（1 µL） | 0.1 U/mL（0.4 µL） | 0.1 U/mL（0.4 µL） |
建议用量 | 500 U（2 µL） | 250 U/mL（10 µL） | 25 U/mL（100 µL） | 5 U/mL（20 µL） |
孵育时间 | 通常作用时间37℃在15~60 min；25℃在30~120 min； | |||
注：以上仅仅是推荐，可根据实验自主摸索最优实验条件。 | ||||
助阵四方，应用甚广
应用1，除去生物制品中的DNA/RNA
全能核酸酶可用于疫苗、多糖、蛋白等工业生物制品中核酸的去除，使生物制品的最终核酸含量符合要求，同时提高生物制品功效。并且研究者还提供了一种可获得HIV测序文库的方案HIV-SMART，其中全能核酸酶的运用，可显著提高HIV病毒测序覆盖度，且不影响病毒核酸的回收率。
图3 （+）添加和（-）不添加全能核酸酶处理的CHU1756NGS覆盖图[1]
应用2，用于降低细胞破碎后的粘度
全能核酸酶可以降解所有形式的核酸，降低细胞裂解液的粘度，提高蛋白得率，改善分离效果，使之易于过滤（尤其是超滤），利于下游层析纯化操作。
图4 细胞裂解液Benonase处理（A）和未处理（B）比较图
应用3，生化分析样品的制备
在ELISA、色谱分析、双相电泳和足迹分析等过程中，用全能核酸酶处理含有核酸的蛋白样品，可提高分辨率，并提高回收率。
图5 小鼠脑核蛋白Benonase处理（A）和未处理（B）双向电泳比较图[2]
应用4，CAR-T治疗相关行业（慢病毒包装）
FAQ——如何摆脱后续核酸酶干扰？
措施1：采用EDTA螯合金属离子会可逆地抑制全能核酸酶活性，极端条件会造成不可逆失活，例如100 mM NaOH，70℃处理30 min等；
措施2：对于带某种标签的Benzonase核酸酶可通过相应的标签蛋白纯化树脂直接去除，去除率>95%；
措施3：对于不带标签的Benzonase核酸酶，可通过色谱纯化去除核酸酶，然后可通过检测残留活性或ELISA检测来判断去除是否成功。
产品订购信息
产品名称 | 货号 | 规格 | 价格（元） |
Benzonase Nuclease全能核酸酶 | 20156ES25 | 25 KU | 418 |
20156ES50 | 50 KU | 768 | |
20156ES60 | 100 KU | 1398 | |
Benzonase Nuclease (Endotoxin-free) 全能核酸酶（无内毒素） | 20125ES25 | 25 KU | 1125 |
20125ES50 | 50 KU | 1965 | |
20125ES60 | 100 KU | 3245 |
文献引用
[1] Berg M G, Yamaguchi J, Alessandri-Gradt E, et al. A pan-HIV strategy for complete genome sequencing[J]. Journal of clinical microbiology, 2016, 54(4): 868-882.
[2] Jankowska U, Latosinska A, Skupien-Rabian B, et al. Optimized procedure of extraction, purification and proteomic analysis of nuclear proteins from mouse brain[J]. Journal of neuroscience methods, 2016, 261: 1-9.
HB200509
