来宝网 2018/5/17点击1581次
行走江湖 靠的就是实力dsDNA HS Assay Kit for Qubit?数据测评
——简便、灵敏、准确、稳定
dsDNA Assay Kit for Qubit?是Yeasen生物开发的专门用于Qubit?荧光仪或荧光酶标仪的试剂盒，线性范围0.2-100 ng，即使在存在ssDNA、RNA和单体核苷酸的条件下，也可以选择性的检测dsDNA，且耐受较高浓度的蛋白质、盐类、洗涤剂等污染物。
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 储存 |
dsDNA HS Assay Kit for Qubit? | 12640ES60 | 100T | 2-8℃ |
dsDNA HS Assay Kit for Qubit? | 12640ES76 | 500T | 2-8℃ |
产品使用方法
1. 实验准备
1）在使用前，将试剂盒中的各组分恢复至室温。
2）准备足够量0.5 mL PCR薄壁管并标注。请勿在PCR管侧壁标注，以免影响荧光信号采集。推荐使用Qubit? assay tubes（Cat. No. Q32856）或Axygen? PCR-05-C tubes（part no. 10011-830）。
2. 配制检测工作液
在塑料容器中，使用dsDNA Buffer按比例将适量dsDNA Reagent稀释至1×（如：取1 μL dsDNA Reagent，加入199 μL dsDNA Buffer），现用现配。工作液配制好后，3小时内使用。
3. 配制待检样品
1）配制待检标准品。取190 μL检测工作液至标准品PCR管中，分别加入10 μL dsDNA Standard 1和dsDNA Standard 2至相应的标准品PCR管中，轻轻涡旋振荡2-3 sec，尽量避免气泡产生。
2）配制待检样品。取180-199 μL检测工作液至样本PCR管中，分别加入1-20 μL待检样本，使PCR管中每个样本终体积为200 μL，轻轻涡旋振荡2-3 sec，尽量避免气泡产生。
4. 检测
1）将所有待检PCR管置于室温避光孵育2 min。
2）按照Qubit?荧光仪的操作说明，选择dsDNA High Sensitivity检测程序测定荧光信号值。
产品评测
1. 高选择性
本试剂盒对dsDNA具有高度选择性，不定量RNA和ssDNA。
图 dsDNA Assay Kit for Qubit?试剂盒对DNA的选择性。样品使用λDNA，E. coli rRNA以及DNA+RNA 1:1混合物，每个测试3个平行，CV≤2%。
2. 灵敏度高，准确度高
本试剂盒可准确定量dsDNA浓度在0.2-100ng的样本，且不论在低浓度区间（0-1ng）或高浓度区间都能准确定量。使用2个标准品确定线性标准曲线后，定量真实样本，所有测定值均在线性曲线上，与T*品牌高灵敏型产品无明显差异，结果精密度CV≤5%，准确度在±10%以内。
图 dsDNA Assay Kit for Qubit?测试准确性。样品使用标准品，每个测试3个平行，CV≤5%。
3. 抗污染能力强
将本试剂盒应用于存在高浓度污染物的样本中定量dsDNA，结果表现优异，精确度CV≤5%，精密度±10%以内。除以下污染物外，本试剂盒还可耐受2%琼脂糖，200 mM醋酸铵，200 mM醋酸钠，2%苯酚，4%氯仿等污染物（10μL样本）。
表 污染物测试表
污染物 | 添加量(10 μL样品) | 测试平均值 | 精确度（CV%） | 精密度 |
对照(未加抑制物) | / | 9.213 | 0.54% | / |
NaCl | 200 mM | 9.080 | 1.65% | -0.8% |
MgCl2 | 40 mM | 8.653 | 1.21% | -5.5% |
TritionX-100 | 0.02% | 8.947 | 1.28% | -2.3% |
BSA | 400 μg/mL | 9.120 | 1.43% | -0.4% |
乙醇 | 20% | 9.373 | 0.53% | 2.3% |
PEG | 20% | 9.733 | 1.36% | 6.25% |
dNTPs | 2 μM | 9.133 | 2.18% | -0.29% |
4. 产品稳定
本试剂盒包含高度浓缩的分析试剂、稀释缓冲液和预稀释的标准品，在常温条件下配合使用Qubit?进行dsDNA浓度测试。其中，将标准品于37℃放置20天以上，仍可获得优异的测试结果，精密度CV≤5%，准确度均在10%以内。
图 dsDNA Assay Kit for Qubit?标准品稳定性测试。样品使用Yeasen标准品与T*品牌标准品，每个测试3个平行，CV≤5%。
客户测评
1. R*基因公司
标品 | T*品牌 | 翊圣 | 品牌A | 品牌B | 品牌C | |||||
4ng/μL | 4.08 | 4.14 | 3.76 | 3.92 | 4.26 | 4.19 | 5.08 | 5.06 | 3.56 | 3.56 |
4.1 | 3.74 | 3.9 | 4.96 | 3.78 | ||||||
4.24 | 4.26 | 4.4 | 5.14 | 3.34 | ||||||
2ng/μL | 1.78 | 1.65 | 1.47 | 1.6 | 1.65 | 1.45 | 1.87 | 1.94 | 1.39 | 1.37 |
1.71 | 1.65 | 1.37 | 2.04 | 1.37 | ||||||
1.45 | 1.68 | 1.33 | 1.92 | 1.34 | ||||||
1ng/μL | 0.884 | 0.87 | 0.846 | 0.85 | 0.684 | 0.69 | 1.09 | 1.05 | 0.666 | 0.64 |
0.886 | 0.828 | 0.726 | 1.06 | 0.664 | ||||||
0.862 | 0.866 | 0.674 | 1.01 | 0.598 | ||||||
0.5ng/μL | 0.404 | 0.39 | 0.388 | 0.39 | 0.326 | 0.35 | 0.462 | 0.42 | 0.29 | 0.28 |
0.4 | 0.41 | 0.304 | 0.4 | 0.272 | ||||||
0.368 | 0.374 | 0.408 | 0.41 | 0.28 | ||||||
2. Y*生物公司
样本 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | |||||
翊圣（ng/μL） | 3.98 | 4 | 5.1 | 5.05 | 5.52 | 5.41 | 6.46 | 6.39 | 5.32 | 5.25 |
4.02 | 5 | 5.3 | 6.32 | 5.18 | ||||||
T*品牌（ng/μL） | 3.74 | 3.83 | 5 | 4.98 | 5.38 | 5.155 | 6.16 | 6.19 | 5.1 | 5.16 |
3.92 | 4.96 | 4.96 | 6.22 | 5.22 | ||||||
样本 | 6 | 7 | 8 | 9 |
| |||||
翊圣（ng/μL） | 5.32 | 5.43 | 3.78 | 3.84 | 7.24 | 7.31 | 5.96 | 5.94 |
|
|
5.54 | 3.9 | 7.38 | 5.92 |
| ||||||
T*品牌（ng/μL） | 5 | 5.23 | 3.66 | 3.63 | 6.78 | 6.81 | 5.14 | 5.36 |
|
|
5.48 | 3.6 | 6.84 | 5.58 |
|
| |||||
3.R*公司
样品 | P*品牌 (ng/ul) | Yeasen (ng/ul) |
1 | 31.8 | 26 |
2 | 58.6 | 60.8 |
3 | 32.8 | 29.2 |
4 | 78.6 | 80.2 |
5 | 10.1(P*品牌 标准品 10ng/ul) | 10.4 (P*品牌 标准品 10ng/ul) |
6 | 10(Yeasen 标准品2) | 9.66 (Yeasen 标准品2) |
产品订购
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格（元） |
dsDNA HS Assay Kit for Qubit? | 12640ES60 | 100 T | 686.00 |
dsDNA HS Assay Kit for Qubit? | 12640ES76 | 500 T | 2696.00 |
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