来宝网 2017/10/20点击2033次
DNA Marker
DNA Marker是分子量不同的DNA片段的组合,主要用途为DNA 分子凝胶电泳时,与样品共同加入凝胶中进行电泳分离,通过样品条带与DNA Marker对应条带大小及亮度的对比,可以粗略估算样品DNA分子量的大小以及在溶液中的浓度。翊圣生物DNA Marker分子量大小范围覆盖了从100 bp到12 kb的DNA片段,符合绝大多数实验需求。
产品特点
l 背景干净、带型稳定、大小精准;
l 含指示带,各条带浓度已知,便于定位及半定量分析;
l 已含上样缓冲液,可直接电泳,方便快捷;
l 稳定性强,可在室温保存3-6个月。
电泳图示
订购信息
产品名称 | 产品货号 | 规格 | 价格 |
10501ES60 | 2000 DNA Marker | 100T | 126.00 |
10501ES80 | 10*100T | 996.00 | |
10504ES60 | 5000 DNA Marker | 100T | 126.00 |
10504ES80 | 10*100T | 996.00 | |
10507ES60 | 100bp DNA ladder | 100T | 146.00 |
10507ES80 | 10*100T | 1166.00 | |
10510ES60 | 1kb DNA ladder | 100T | 146.00 |
10510ES80 | 10*100T | 1166.00 |
Tips:
1、保存方法:室温稳定保存3~6个月,更长时间请于4℃或-20℃保存。
2、凝胶浓度及缓冲液的选择:
琼脂糖浓度 | 有效分离范围(bp) | 推荐缓冲液 |
0.8% | 800-10000 | 1×TAE |
1.0% | 400-8000 | 1×TAE |
1.2% | 300-7000 | 1×TAE |
1.5% | 200-3000 | 1×TAE/0.5×TBE |
2.0% | 100-2000 | 1×TAE/0.5×TBE |
3.0% | 25-1000 | 0.5×TBE |
【注】:大片段选择低浓度凝胶,用TAE缓冲液体系电泳,小片段选择高浓度凝胶,用TBE缓冲体系电泳。
3、核酸染料的选择:
EB(溴化乙锭)是一种高度灵敏的荧光染色剂,用于观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的DNA。溴化乙锭用标准302 nm 紫外光透射仪激发并放射出橙红色信号,方便观察。溴化乙锭可以嵌入碱基分子中,导致错配,具有一定的毒性。
YeaRed是一种新型无毒核酸染料,具有独特的油性分子结构,不能穿透细胞膜进入细胞内,不易挥发升华,人体不会吸入,从而最大程度上保证了实验者安全。另外,YeaRed与EB具有相同的光谱特性,故无需改变现有的成像系统即可完美取代EB。
常见问答
1、为什么无DNA条带或条带微弱?
答:①DNA Marker上样量不够,需加大上样量;②DNA条带已跑出凝胶;③DNA条带被示踪染料遮盖;④凝胶中未加核酸染料;⑤使用新鲜制备的凝胶。
2、为什么条带会弥散或分离不开?
答:①DNA有部分降解;②电泳时电压过低,使DNA条带发生扩散;③DNA上样量过大,条带变粗,条带间不易分离;④使用不合适浓度的琼脂糖凝胶;⑤琼脂糖凝胶质量较差。
3、为什么样品条带与DNA Marker条带相比,出现大小不一致现象?
答:①DNA的迁移不仅与实际大小有关,也与是否结合有蛋白、离子状态、DNA结构、凝胶等因素有关。
核酸的电泳迁移率与DNA/染料的量的比例关系比较重要,当核酸染料量不足时,就会发生迁移率误差较大的情况; ②样品中如果含有较高的盐离子浓度,也会引起较大的迁移误差;③样品上样量与DNA ladder条带的量相差较大或体积相差较大时,也会引起较大的迁移误差。