来宝网 2017/5/4点击1517次
——不将就!快速PCR预混液
研发背景
扩增速度慢,扩增得率低,阳性克隆易出现突变?
此时你需要找到具有多种能力的PCR Mix
目前市场上PCR Mix种类繁多,不同实验需要选择不同PCR Mix。使用时,经常出现扩增速度慢、PCR扩增产物得率低、克隆基因有突变或者扩增效率低等等,给科研人员带来了极大困扰。为此,翊圣生物研发团队在多年的工具酶研发经验的基础上,经过多年研发,配制出了一款新型的PCR Mix——HieffTM PCR Master Mix,它集快速、扩增得率高、长片段扩增能力强和稳定性强等能力于一体,满足您对PCR Mix的多种需求。
同时,翊圣生物具有的大规模的发酵系统和高通量的酶纯化系统,保证了该PCR Mix具有最小的批间差异,保证为您提供大规模、高纯度和批次稳定的高品质产品。
产品描述
主动出击,从根源解决问题
碱基错误掺入是导致PCR意外延伸终止的罪魁祸首
HieffTM PCR Master Mix在传统PCR Mix基础上优化配方,添加独特的校正因子和延伸因子,降低碱基错误掺入率,帮助Taq DNA聚合酶有效识别错误插入碱基,并校正为正确碱基;优化镁离子浓度,dNTP浓度及添加PCR增强剂,实现高效扩增。
产品图片
快速,长片段扩增,超强稳定性,
HieffTM PCR Master Mix完成基因鉴定及协助高效克隆
快 速:延伸速度达到15-30sec/kb;
长片段扩增:简单模板10kb,复杂模板6kb;
稳定性强:4℃放置3个月,性能有保证;
T载体克隆:PCR产物具有3’-dA突出端;
高GC含量扩增:已验证70% GC含量的DNA片段。
竞品对比
品牌 | 货号 | 名称 | 价格(50ul反应体系) | 扩增速度 | 最大扩增长度 | 稳定性 | 克隆保真度 |
Yeasen | 10102 | 2×HieffTM PCR Master Mix | 0.75元/次 | 15-30sec/kb | 简单模板10kb 复杂模板6kb | 4℃ 3个月 -20℃ 2年 | ★★ |
Tiangen | KT201 | 2×Taq Plus PCR Master Mix | 3.00元/次 | 60sec/kb | - | 4℃ 3个月 -20℃ 1年以上 | ★★ |
TAKARA | RR003A | Premix Taq™ DNA Polymerase (Ex Taq™ Version 2.0) | 1.91元/次 | 60sec/kb | 简单模板20kb 复杂模板3kb | -20℃ | ★ |
Thermo | K0171 | PCR Master Mix (2×) | 3.205元/次 | 60sec/kb | 5kb | -20℃ | ★ |
NEB | M0270L | Taq 2× Master Mix | 5.098元/次 | 60sec/kb | 简单模板5kb 复杂模板4kb | 4℃ 3个月 -20℃ | ★ |
Promega | M7502 | PCR Master Mix | 6.68元/次 | 60sec/kb | 2kb | 4℃ 3个月 -20℃ | ★ |
产品数据
① 行进性提升,扩增能力高 —— 简单模板10kb,复杂模板6kb
图1. 优越的扩增能力
NC:模板阴性对照;退火温度:60℃;延伸时间:30sec/kb。M:1kb ladder。
②. 缓冲体系优,扩增速度快 ——最快可达15-30s/kb
图2. 扩增速度快
延伸速度15s/kb,仍然可以有效扩增。模板:拟南芥基因组;退火温度:60℃;M:1kb ladder。
③. 模板结构易被打开,适合高GC模板的扩增 ——已验证70% GC含量的DNA片段
图3. 高GC含量基因可轻松扩增
基因GC含量:泳道1-4分别为40%、50%、60%和70%。
泳道5-8为泳道1-4的模板阴性对照。
模板:人293T细胞基因组。退火温度:60℃。
延伸速度:30s/kb。M:1kb ladder。
④. 含酶稳定剂,稳定性极强——4℃ 3个月,扩增性能稳定
图4. 极强的稳定性
产品分别在-20℃放置1年,4℃放置3个月,25℃放置1个月,均可有效扩增目的片段。
模板:拟南芥基因组。退火温度:60℃;延伸时间:30s。M:1kb ladder。
匠心品质,快乐科研
① 清华大学医学院:小鼠基因型鉴定
图1. 2×HieffTM PCR Master Mix判定基因敲除小鼠基因型。与同类品牌T产品在相同体系下扩增目的基因,HieffTM Mix扩增效率明显较高,结果更明确。单一条带(825bp):野生型纯合子;单一条带(603bp):基因敲除纯合子;两个条带:基因敲除杂合子。模板:泳道1:野生型;2/5/6:杂合子;3:纯合子;4:空白对照。 M:100bp DNA ladder。
② 中国科学院植物研究所:菌落PCR鉴定
图2. 2×HieffTM PCR Master Mix进行菌落PCR。在相同体系下扩增目的基因(1500bp),与国外品牌Q同类产品相比,HieffTM Mix表现优秀,结果可靠。M:D2000 plus。
③ 吉林大学:疟原虫转基因株鉴定
图3. 2×HieffTM PCR Master Mix进行转基因鉴定。HieffTM Mix能较好地鉴定出转基因虫株(目的片段:550bp),结果可靠。泳道1-8:同源重组后的疟原虫虫株;以疟原虫基因组为模板,NC:野生型疟原虫虫株。M:DL1000 DNA marker。
④ 中国农业大学玉米中心:玉米SSR分型分析
图4. 2×HieffTM PCR Master Mix进行玉米SSR分型分析。HieffTM Mix可有效扩增出100bp-800bp不同基因片段。扩增效果好,成功率高。模板:玉米基因组DNA(100ng)。M:DNA markerⅠ。
HieffTM PCR Master Mix已得到广大用户认可——使用课题组超过500个
主要有:中国科学院上海生命科学研究院植生生态研究所,国家蛋白质科学中心,清华大学生命科学学院,中国科学院生物物理研究所生物大分子国家重点实验室,华南农业大学,中国农业科学院中国水稻研究所,中国科学院微生物所植物基因组学国家重点实验室,上海植物逆境生物学研究中心,中国农业科学院上海兽医研究所,复旦大学附属华山医院,昆明理工大学,中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所,浙江大学医学院附属第二医院,武汉大学基础医学院,南京农业大学生命科学学院,中国科学院植物研究所,中国科学院南京土壤研究所,中山大学生命科学学院,武汉大学病毒学国家重点实验室等超过五百个课题组
引用文献举例
【1】Zhou Z, He H, Ma L. Overexpression of a GmCnx1 gene enhanced activity of nitrate reductase and aldehyde oxidase, and boosted mosaic virus resistance in soybean. PLoS One. 2015 Apr 17;10(4):e0124273. doi: 10.1371/journal.pone.0124273. eCollection 2015.
实验应用
普通基因克隆、菌落PCR鉴定、基因型鉴定、TA克隆等。
常见问题(Q&A)
Q1. 使用PCR Master Mix扩增目的基因,琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物时,为什么会出现涂抹带?
A1:造成涂抹带的原因有很多,因PCR Master Mix预混有浓度优化的Mg2+浓度(3mM)和Taq DNA聚合酶,可着重从以下几个方面考虑:污染、模板量过多、引物特异性不高或退火温度过低、循环数过多、甚至模板GC含量过高等。可以通过以下方法尝试解决:设置阴性对照(NTC)确认是否污染;建立模板浓度梯度;提高退火温度或进行touch down PCR;减少循环数。
Q2. 使用PCR Master Mix扩增目的基因,琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物时,为什么无条带?
A2:PCR反应成败很大程度上依赖于高质量的DNA模板,我们建议进行阳性对照(引物已验证具备扩增能力),排除模板对PCR反应的抑制。另外,建议优化引物Tm温度和增加延伸时间。对于低丰度基因,建议增加循环数。
Q3. 产品特异性如何?
A3:大多数引物可直接使用55-60℃扩增,特异性良好。若出现非特异性扩增,建议优化引物退火温度。
拥有高品质的同时保持低价位
关于我们
我们秉承“Good Science,Good Products”理念,用心做产品。我们拥有来自国内一线科创新研院所的研发人员,组建有顶级的技术顾问团队,在丰富的经验基础上不断创新。翊圣生物具有健全的工具酶平台,可大规模的进行生产。
订购信息
产品名称 | 货号 | 规格 | 价格(元) |
2×HieffTM PCR Master Mix (With Dye) | 10102ES08 | 5ml | 150.00 |
2×HieffTM PCR Master Mix (No Dye) | 10103ES08 | 5ml | 150.00 |
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产品名称 | 货号 | 规格 | 价格(元) |