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甜菜碱Betaine

——高性能的PCR增强剂

为提高含高GC含量或连续多个A/T的复杂基因的PCR扩增效率及扩增特异性，科研人员通常会尝试在PCR反应体系中添加增效剂。翊圣生物现为广大科研人员提供质量高、适用性广的两种PCR增效剂：甜菜碱与海藻糖。

甜菜碱

甜菜碱是一种从甜菜中发现的生物碱，是胆碱氧化代谢的终产物，参与甲硫氨酸（蛋氨酸）生物合成路径，是非常重要的渗透调节物质。翊圣生物提供的甜菜碱有两类，盐酸甜菜碱和甜菜碱水合物，后者分子式为C₅H₁₁NO₂ H₂O，是分子生物学级别，纯度（TLC）≥99%，可用于分子生物学实验。

产品介绍

翊圣生物是在工具酶及其反应辅助试剂方面极具经验，确保原装进口高品质甜菜碱，并大量现货，可保证批次间产品的稳定性。该产品可作为原料用于PCR、RT-PCR、qPCR等实验反应优化的添加剂成分，大大改善扩增效率和扩增特异性、改善逆转录效率等。

甜菜碱特点

1. 甜菜碱可帮助DNA聚合酶顺利通过DNA某些复杂二级结构，防止DNA聚合酶的从模板DNA中解离。DNA局部区域因含有多个复杂碱基（Py-G-C），会促使DNA聚合酶的停滞，最终导致DNA聚合酶停止有效延伸。而甜菜碱可提高DNA小沟中富含鸟嘌呤和胞嘧啶区域的鸟嘌呤和胞嘧啶的水合作用，影响DNA分子结构，改变DNA灵活性，帮助DNA聚合酶沿着DNA模板延伸^[1]。

2.甜菜碱可消除变性温度对碱基的依赖性。浓度依赖性降低高GC含量序列的Tm，并使PCR两引物的Tm相接近，最终降低DNA Tm值^[2]。

3. 高浓度的甜菜碱溶液可稳定DNA-蛋白复合物。

4.在逆转录温度条件下，甜菜碱可减少RNA二级结构的形成。在甜菜碱和海藻糖联合用于逆转录实验时，甜菜碱减少RNA分子内复杂二级结构的形成，降低RNA溶解温度；海藻糖稳定逆转录酶，保持逆转录酶活性。通过二者联合，确保更长cDNA的合成长度^[3]。

主要应用

1. 可应用于DNA的测序反应实验中，提升含有重复序列(连续多个A或T)的测序精准性。

2. 提升长片段DNA的PCR成功率。

3. 适用于复杂模板的PCR扩增，如高GC含量DNA的PCR扩增。

4. 适用于某些粗糙模板的直接测序，如经NaOH溶液裂解的细胞裂解物。

5. 适用于较长cDNA的逆转录反应。

6. 作为LAMP环介导等温扩增的添加剂。

甜菜碱参数

溶液配制

溶于水。浓度为10%水溶液，质量体积比。溶液无色透明。

参考文献

[1]. MytelkaDS,Chamberlin MJ.Analysis and suppression of DNA polymerase pauses associated with a trinucleotide consensus.Nucleic Acids Res.1996 Jul 15;24(14):2774-81.

[2]. Rees WA,YagerTD,KorteJ,von Hippel PH.Betaine can eliminate the base pair composition dependence of DNA melting.Biochemistry.1993 Jan 12;32(1):137-44.

[3]. SpiessAN,Ivell R.A highly efficient method for long-chain cDNA synthesis using trehalose and betaine.Anal Biochem.2002 Feb 15;301(2):168-74.

相关链接

海藻糖在分子生物学实验中的应用可参看,海藻糖产品专题链接:http://www.labbase.net/News/ShowNewsDetails-2-55-4AFA2A4DF55D3355.html

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