来宝网 2017/5/2点击1536次
海藻糖Trehalose
——高效的酶稳定剂
为提高含高GC含量或连续多个A/T的复杂基因的PCR扩增效率及扩增特异性，科研人员通常会尝试在PCR反应体系中添加增效剂。翊圣生物现为广大科研人员提供质量高、适用性广的两种PCR增效剂：甜菜碱与海藻糖。
其中，海藻糖（Trehalose）是一种双糖，能够在高温、高寒、干燥失水等恶劣的条件下在细胞表面形成特殊的保护膜，有效的保护生物分子结构不被破坏，从而维持生命体的生命过程和生物特征。翊圣生物提供的海藻糖，为海藻糖水合物，分子式为C12H22O11?2H2O，纯度≥99%，金属离子含量低，可用于分子生物学实验。
产品介绍
翊圣生物是在工具酶及其反应辅助试剂方面极具经验，确保原装进口高品质海藻糖，并大量现货，可保证批次间产品的稳定性。该产品可作为酶保护剂，用于DNA聚合酶、逆转录酶等工具酶的稳定剂，因此作为PCR、RT-PCR、qPCR等实验反应优化的添加剂成分，大大改善扩增效率和扩增特异性、改善逆转录效率等。
海藻糖特点
1. 海藻糖具有热稳定性和热激活特性。海藻糖在蛋白热变性过程中可维持蛋白的骨架，保持其天然结构。在分子生物学多种酶促反应中得到验证，如逆转录酶参与的cDNA合成，Dnase I参与的DNA降解，限制性内切酶的酶切反应等[1]。
2.海藻糖可作为PCR增强剂。通过降低DNA双链融解温度，维持Taq DNA聚合酶稳定性，提高PCR反应效率[2]。
3. 海藻糖可中和抑制剂对DNA聚合酶的抑制作用，维持PCR扩增效率。海藻糖作为SYBR Green I法实时荧光定量PCR添加剂，有效降低SYBR Green I对PCR的抑制[3]。
4. 海藻糖可作为珍稀样本基因组或极低浓度基因组的保存剂[4]。
图1. 海藻糖可保护Taq DNA聚合酶酶活性，提升PCR扩增性能
数据来源DOI: 10.1373/clinchem.2004.031336 Published June 2004
主要应用
1. 作为酶稳定剂，维持酶的活性及热活化后的酶活性。
2. 可应用于DNA的测序反应实验中，提升含有重复序列(连续多个A或T)的测序精准性。
3. 复杂模板的PCR扩增，如高GC含量的样本。
4. 适用于较长cDNA的逆转录反应，尤其是全长cDNA的合成，提升文库建立的覆盖度。
5. 微量DNA样品的保存剂。
6. qRT-PCR反应体系添加剂，提升反应性能。
溶液配制
溶于水。50mg/ml。
海藻糖参数
中文别名（Chinese Synonym） | α,α-海藻糖，α-D-吡喃葡萄糖基-α-D-吡喃葡萄糖苷 |
英文别名（English Synonym） | alpha-D-Glucopyranosyl-alpha-D-glucopyranoside; Mycose |
CAS 号（CAS NO.） | 6138-23-4 |
分子式（Molecular Formula） | · C12H22O11 2H2O |
分子量（Molecular Weight） | · 378.33g/mol |
外观（Appearance） | 白色或灰白色粉末 |
溶解性（Solubility） | 溶于水 |
纯度（Purity） | ≥99% |
结构式（Structure） |
|
参考文献
[1]. ButlerSL,Falke JJ.Effects of protein stabilizing agents on thermal backbone motions: a disulfide trapping study.Biochemistry.1996 Aug 20;35(33):10595-600.
[2]. SpiessAN,MuellerN,Ivell R.Trehalose is a potent PCR enhancer: lowering of DNA melting temperature and thermal stabilization of taq polymerase by the disaccharide trehalose.Clin Chem.2004 Jul;50(7):1256-9.
[3]. Horáková H.1,2-propanediol-trehalose mixture as a potent quantitative real-time PCR enhancer.BMC Biotechnol.2011 Apr 18;11:41. doi: 10.1186/1472-6750-11-41.
[4]. Smith S,MorinPA.Optimal storage conditions for highly dilute DNA samples: a role for trehalose as a preserving agent.J Forensic Sci.2005 Sep;50(5):1101-8.
相关链接
甜菜碱在分子生物学实验中的应用可参看：甜菜碱专题链接:http://www.labbase.net/News/ShowNewsDetails-2-55-D39253DF04F20FEF.html
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