来宝网 2017/3/22点击1799次
Exosome外泌体一体化研究工具
——提供目前Exosome最全面的研究策略
Exosome是由多种活细胞分泌的50-100nm的膜性小囊泡，来源于晚期核内体（也称为多囊泡体）的囊泡，是由细胞内多泡体（MVBs）出芽形成，再与细胞膜融合后释放到细胞外基质中。几乎所有类型的细胞都能分泌，广泛存在于各种体液中。不同细胞来源的Exosome所含有的具体成分不尽相同，根据分泌的细胞类型不同，在血液、尿液、羊水、恶性肿瘤、腹水等动物体液中的Exosome通常含有特定的miRNA和蛋白质。因此，Exosome为研究潜在的各种biomarker提供了很好的生物学材料。Exosome参与调控重要的细胞生理活动，在免疫应答、凋亡、血管生成、炎症反应、凝结过程中的作用均有报道，可以成为多种疾病的早期诊断标记物，也能作为靶向药物的载体进行疾病治疗。作为囊泡的一种，Exosome受到越来越多的关注。其分泌过程如图[1]：
SBI公司是一家提供最先进的供全面外泌体研究所需产品和试剂盒，包括分离，检测和定量试剂盒，探测（表征和分析试剂盒），为广大研究者提供了最新的研究手段。2009年，SBI公司的研究团队们发现了Exosome的巨大研究价值后开发了第一款商业化的外泌体分离试剂盒，期间也一直在壮大Exosome研究团队，提升产品质量丰富产品种类成为世界上最大的Exosome研究供应商。SBI将会把最新的技术和方法转化成加快您外泌体研究进程的最有力的工具。
外泌体的提取 | 分离完整的Exosome |
FACS磁珠分选 | |
IP高通量免疫沉淀Exosome | |
不含Exosome的培养基 | |
Exosome的验证分析 | 抗体 |
Elisa定量分析 | |
CETP活性定量分析 | |
Exosome RNA的研究 | RNA的提取 |
RNA二代测序建库试剂盒 | |
Exosome功能研究 | 荧光标记 |
转染试剂 | |
X PACK 技术 | |
XMIR miRNA packing system | |
XStampExosome Targeting Technology |
一外泌体的分离
SBI公司研究和开发了一款基于多聚体形式的Exosome提取试剂，能够快速有效地提取及分离血清和肿瘤组织样本中的Exosome囊泡。这些多聚体能够形成类似于网状结构，从而将60-180nm直径的微泡分离出来。其纯度和产量皆优于传统方法。
（一）外泌体分离纯化产品选择
分离完整Exosome | ExoQuick： | 适合富含Exosome样本如：血清、腹水 |
ExoQuick-TC： | 适合Exosome含量较少的样本如：细胞培养上清、尿液、脑脊液 | |
ExoQuick Plasma Kit： | 血浆（试剂盒中含Thrombin及ExoQuick试剂） | |
ExoQuick-CG： | 药品生产管理规范标准级别的用于临床前的应用研究（适用于各种培养液、体液如尿液、唾液、脑脊液等等样本的Exosome提取） | |
预处理血清或血浆样本，以出去脂蛋白 |
产品信息
货号 | 产品 | 规格 | 价格（元） |
EXOQ5A-1 | ExoQuickExosome precipitation solution | 5ml(75T) | 4203.2 |
EXOQ20A-1 | ExoQuickExosome precipitation solution | 20ml(300T) | 13561 |
EXOTC10A-1 | ExoQuick TC Exosome precipitation solution | 10ml(10T) | 4189 |
EXOTC50A-1 | ExoQuick TC Exosome precipitation solution | 50ml(50T) | 14072 |
EXOCG50A-1 | ExoQuick-CG? Exosome Precipitation Solution | 50ml(30R) |
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EXOQ5TM-1 | ExoQuick Plasma prep and Exosome Precipitation Kit | 75T | 9471.4 |
关联产品
货号 | 产品 | 规格 | 价格（元） |
TMEXO-1 | Thrombin Plasma prep for Exosome Precipitation | 100T | 6347.4 |
EXOLP5A-1 | ExoQuick-LP Lipoprotein PreClear&Exosome Precipitation Kit | 10T | 5751 |
SBI为您推荐Exo-Flow抗体磁珠试剂盒，该试剂盒能够捕获Exosome特定的表面标记蛋白，利用流式分选技术，从而分离出不同亚型的Exosome。试剂盒中提供的9.1μM直径的Exo-Flow磁珠与传统的4μM Dynabeads磁珠相比，能够更好地捕获Exosome，特别适用于数量较少的Exosome样本，并且有多种标记抗体供选择。
产品信息
货号 | 产品 | 规格 | 价格（元） |
EXOFLOW100A-1 | CD9Exo-Flow capture kit (Magnetic streptavidin beads, CD9-biotin capture antibody, Wash and Elution Buffers, Exo-FITC stain) | 10 reactions | 5736.8 |
EXOFLOW150A-1 | TetraspaninExo-Flow combo capture kit (Magnetic streptavidin beads, CD9, CD63, and CD81-biotin capture antibodies, Wash and Elution Buffers, Exo-FITC stain) | 10 reactions | 8718.8 |
EXOFLOW200A-1 | CD31 Exo-Flow capture kit (Magnetic streptavidin beads, CD31-biotin capture antibody, Wash and Elution Buffers, Exo-FITC stain) | 10 reactions | 5736.8 |
EXOFLOW210A-1 | CD44 Exo-Flow capture kit (Magnetic streptavidin beads, CD44-biotin capture antibody, Wash and Elution Buffers, Exo-FITC stain) | 10 reactions | 5736.8 |
XOFLOW300A-1 | CD63 Exo-Flow capture kit (Magnetic streptavidin beads, CD63-biotin capture antibody, Wash and Elution Buffers, Exo-FITC stain) | 10 reactions | 5736.8 |
EXOFLOW400A-1 | CD81 Exo-Flow capture kit (Magnetic streptavidin beads, CD81-biotin capture antibody, Wash and Elution Buffers, Exo-FITC stain) | 10 reactions | 5736.8 |
EXOFLOW500A-1 | Rab5b Exo-Flow capture kit (Magnetic streptavidin beads, Rab5b-biotin capture antibody, Wash and Elution Buffers, Exo-FITC stain) | 10 reactions | 5736.8 |
EXOFLOW600A-1 | HLA-G Exo-Flow capture kit (Magnetic streptavidin beads, HLA-G-biotin capture antibody, Wash and Elution Buffers, Exo-FITC stain) | 10 reactions | 5736.8 |
EXOFLOW610A-1 | CD14 Exo-Flow capture kit (Magnetic streptavidin beads, CD14-biotin capture antibody, Wash and Elution Buffers, Exo-FITC stain) | 10 reactions | 5736.8 |
EXOFLOW620A-1 | CD68 Exo-Flow capture kit (Magnetic streptavidin beads, CD68-biotin capture antibody, Wash and Elution Buffers, Exo-FITC stain) | 10 reactions | 5736.8 |
EXOFLOW630A-1 | EpCAMExo-Flowcapture kit (Magnetic streptavidin beads, EpCAM-biotin capture antibody, Wash and Elution Buffers, Exo-FITC stain) | 10 reactions | 5736.8 |
EXOFLOW650A-1 | Alpha-2-Macroglobulin (A2M) Exo-Flow capture kit (Magnetic streptavidin beads, A2M-biotin capture antibody, Wash and Elution Buffers, Exo-FITC stain) | 10 reactions | 5736.8 |
CSFLOWBASICA-1 | Basic Exo-Flow kit without any coupled antibodies (Uncoupled magnetic streptavidin beads, Wash and Elution Buffers, Exo-FITC stain) | 100 reactions | 9869 |
关联产品
货号 | 名称 | 规格 | 价格 |
EXOFLOW700A-1 | Exo-Flow Multifunctional Magnetic Stand | 1 Kit | 3947.6 |
EXOFLOW800A-1 | Exo-FITC Exosome FACS stain | 20 reactions | 2158.4 |
EXOFLOW810A-1 | Exo-APC Exosome FACS stain | 20 reactions | 2158.4 |
（三）IP高通量免疫沉淀Exosomes
Exo-Flow 96/32 IP试剂盒可从血浆样本、使用ExoQuick-TC或超速离心富集的细胞培养上清（尿液、脑脊髓液等）Exosomes产物样本中高通量、直接免疫沉淀Exosomes。试剂盒中的磁珠已经预结合了CD9、CD63或者CD81用于选择性捕获特定的Exosomes亚型，直接将上述样本添加入磁珠中即可免疫沉淀Exosomes。96孔板或32孔板形式产品可用于同时处理多个样本。得到Exosomes具有完整形态，可用于下游Exosomes RNA和蛋白分析。
产品信息
货号 | 名称 | 规格 | 价格 |
EXOFLOW32A-CD9 | Exo-Flow 32 CD9 IP kit | 32 rxns |
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EXOFLOW32A-CD63 | Exo-Flow 32 CD63 IP kit | 32 rxns |
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EXOFLOW32A-CD81 | Exo-Flow 32 CD81 IP kit | 32 rxns |
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EXOFLOW96A-CD9 | Exo-Flow 96 CD9 IP kit | 96 rxns |
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EXOFLOW96A-CD63 | Exo-Flow 96 CD63 IP kit | 96 rxns |
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EXOFLOW96A-CD81 | Exo-Flow 96 CD81 IP kit | 96 rxns |
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关联产品
货号 | 名称 | 规格 | 价格 |
EXOFLOWMAG-1 | ExoFlowMag96 96-well plate magnet | 1 Kit |
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二Exosome验证分析
（一）ELISA定量分析
SBI公司研发的ExoELISA试剂盒适用于所有类型细胞分泌的任何方法分离得到的Exosome，并且有三种Exosome表面特殊蛋白CD63，CD9，CD81供选择。
产品信息
货号 | 产品名称 | 规格 | 价格（元） |
EXOEL-CD63A-1 | Exosome ELISA Complete Kit (CD63 detection) | 96 reactions | 8378 |
EXOEL-CD81A-1 | Exosome ELISA Complete Kit (CD81 detection) | 96 reactions | 8378 |
EXOEL-CD9A-1 | Exosome ELISA Complete Kit (CD9 detection) | 96 reactions | 8378 |
关联产品
货号 | 产品名称 | 规格 | |
EXOEL96P-1 | 96 Well ExoELISA Plate (12×8well strips，pack of plates) | 10 Plates | 5609 |
EXOEL-SD-1 | Exosome calibration Elisa standards for CD63，CD9 and CD81 ExoELISAs (15 standard curves) | 1ml |
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EXOEL-BB-20 | Exosome binding buffer for ELISAs | 20 ml | 1902.8 |
（二）CETP活性定量分析
SBI公司已通过研究证明，对于血清、干细胞、肿瘤细胞系、Msc来源的Exosome中富含AchE（乙酰辅酶A乙酰胆碱酯）通过检测AchE的活性可直接对Exosome进行定量。
产品信息
货号 | 名称 | 规格 | 价格（元） |
EXOCET96A-1 | EXOCET Exosome Quantitation Kit | 96 rxns |
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三Exosome RNA全面研究
（一）RNA的提取
Exosome RNA提取试剂盒专为Exosome RNA抽提设计，完美的富集microRNA和其他小片段RNA。分别针对血液样本和体液样本设计两款RNA提取试剂盒，特异性更高，适用所有类型细胞分泌的，以及任何分离方法得到的Exosome RNA提取。操作简单、方便，1h完成血清Exosome RNA提取，无需苯酚/氯仿抽提。纯化的Exosome RNA可以做进一步的microRNA筛选、芯片或二代测序等下游分析。但是由于Exosome RNA含量总体水平偏低，因此需在进行下游分析之前进行Exosome RNA的预扩增。
产品信息
货号 | 产品名称 | 规格 | 价格（元） |
RA808A-1 | SeraMirExosome RNA Purification Column kit (20 exoRNA columns) | 20 preps | 4189 |
RA806A-1 | SeraMirExosome RNA Purification only kit for Media and Urine (5ml ExoQuickand 20 exoRNA columns) | 20 preps |
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RA806TC-1 | SeraMirExosome RNA Purification only kit for Media and Urine (10ml ExoQuick-TC and 10 exoRNA columns) | 10 preps | 6006.6 |
关联产品
货号 | 产品名称 | 规格 | 价格（元） |
RA800A-1 | Complete SeraMirExosome RNA Amplification kit (5ml ExoQuick, 20 exoRNA columns, cDNA synthesis and amplification components) | 20 reactions | 10280.8 |
RA800TC-1 | Complete SeraMirExosome RNA Amplification kit from Media and Urine (10ml ExoQuick-TC, 10 exoRNA columns, cDNA synthesis and amplification components) | 10 preps | 7227.8 |
RA810A-1 | Human SeraMirExosome RNA 384 microRNA qPCR Profiler Assay Set | 20 profiles | 14824.8 |
RA820A-1 | Human Complete SeraMirExosome RNA Amplification and Profiling Kit (contains cat# RA800A-1, RA805A-1, RA810A-1 components) | 20 profiles | 14824.8 |
RA820TC-1 | Human Complete SeraMirExosome RNA Amplification and Profiling Kit for Media and Urine (contains cat# RA800TC-1 with 50ml ExoQuick-TC, RA805A-1 and RA810A-1 components) | 20 profiles | 18644.6 |
RA811A-1 | Mouse SeraMirExosome RNA 384 microRNA qPCR Profiler Assay Set | 20 profiles | 5708.4 |
RA821A-1 | Mouse Complete SeraMirExosome RNA Amplification and Profiling Kit (contains cat# RA800A-1, RA805A-1, RA811A-1 components) | 20 profiles | 14824.8 |
RA821TC-1 | Mouse Complete SeraMirExosome RNA Amplification and Profiling Kit for Media and Urine (contains cat# RA800TC-1 with 50ml ExoQuick-TC, RA805A-1 and RA811A-1 components) | 20 profiles | 18644.6 |
RA812A-1 | Rat SeraMirExosome RNA 384 microRNA qPCR Profiler Assay Set | 20 profiles | 5708.4 |
RA822A-1 | Rat Complete SeraMirExosome RNA Amplification and Profiling Kit (contains cat# RA800A-1, RA805A-1, RA812A-1 components) | 20 profiles | 14824.8 |
RA822TC-1 | Rat Complete SeraMirExosome RNA Amplification and Profiling Kit for Media and Urine (contains cat# RA800A-1, RA805A-1, RA812A-1 and EXOTC50A-1 components) 20 profiles | 20 profiles | 18644.6 |
RA805A-1 | SeraMir Control spike-in Small RNA and qPCR assay | 100 assays | 2215.2 |
RA800P-3 | SeraMir 3'-Universal Primer bonus pack (for an additional 10,000 qPCR reactions) | 1.2 ml | 1533.6 |
（二）RNA的二代测序建库
SBI提供高度灵敏的Exosome RNA解决方案，适用于IIlumina测序平台，试剂盒针对Exosome样本特别设计，尤其适合低浓度exoRNA的高灵敏度建库，最适于起始量在1-10ng的exoRNA建库。
产品信息：
货号 | 产品名称 | 规格 | 价格（元） |
XRNA101A-1 | XRNA Exosome RNA-Seq NGS library prep kit (index set 1-8) | 8rxns |
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XRNA101A-1 | XRNA Exosome RNA-Seq NGS library prep kit (index set 9-16) | 8rxns |
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四、Exosome功能研究
（一）荧光标记Exosome
AExo-GlowFlurescent Label
SBI新产品Exo-Glow试剂盒，能够荧光标记内源的ExosomeRNAs为红色，标记内部Exosome蛋白为绿色，从而达到使用荧光显微镜实时追踪Exosome细胞内相互作用和物质运输。
产品信息：
货号 | 产品名称 | 规格 | 价格（元） |
EXOR100A-1 | Exo-Red Exosome RNA fluorescent label | 20 rxns | 4047 |
EXOG200A-1 | Exo-Green Exosome protein fluorescent label | 20 rxns | 4047 |
EXOC300A-1 | Exo-Red + Exo-Green Exosome cargo fluorescent label Combo Pack (10 rxns of each label) | 20 rxns | 4615 |
B 利用Cyto-Trace让细胞分泌带有荧光的Exosome
跨膜蛋白CD9、CD63和CD81蛋白为Exosomes常见的生物标记蛋白。通过CD63和CD9 Cyto-Trace质粒，可以让您研究的靶细胞分泌带有绿色或者红色荧光的Exosomes，以便下游功能性运输研究。该产品可实时追踪蛋白的运输，用于蛋白的共定位研究。
产品信息
货号 | 产品名称 | 规格 | 价格（元） |
CYTO120-PA-1 | pCT-CD63-GFP (pCMV, Exosome/Secretory, CD63 Tetraspanin Tag) | 10ug | 7540.2 |
CYTO120R-PA-1 | pCT-CD63-RFP (pCMV, Exosome/Secretory, CD63 Tetraspanin Tag) | 10 ug | 7540.2 |
CYTO122-PA-1 | pCT-CD9-GFP (pCMV, Exosome/Secretory, CD9 Tetraspanin Tag) | 10 ug | 7540.2 |
CYTO123-PA-1 | pCT-CD9-RFP (pCMV, Exosome/Secretory, CD9 Tetraspanin Tag) | 10 ug | 7540.2 |
CYTO124-PA-1 | pCT-CD81-GFP (pCMV, Exosome/Secretory, CD81 Tetraspanin Tag) | 10 ug | 7540.2 |
CYTO125-PA-1 | pCT-CD81-RFP (pCMV, Exosome/Secretory, CD81 Tetraspanin Tag) | 10 ug | 7540.2 |
（二）Exosome转染试剂
Exo-Fect是一种可以将核酸直接转移至分离的到的外泌体中的核酸转染试剂，可将si/miRNA，mRNA，甚至质粒DNA转染Exosome后进入靶细胞。操作过程中，只需将核酸与Exo-Fect试剂和分离得到的Exosome混合，形成运载体。整个过程不超过1小时即可将核酸高效转至Exosome中。
产品信息
货号 | 产品名称 | 规格 | 价格（元） |
EXFT10A-1 | Exo-FectExosome Transfection Kit | 10rxns | 2769 |
EXFT20A-1 | Exo-FectExosome Transfection Kit | 20rxns | 4970 |
（三）EV-Entry System
胞外囊泡（EVs）和Exosome是细胞间通讯的重要方式，用于运输RNA和蛋白质的纳米级载体。EVs可为靶细胞运输外源性物质，EV-Entrysystem不仅能够增强细胞摄取EVs的效率，同时还可提高提高EVs释放物质至靶细胞细胞质的效率。EV-Entry system由A，B两种试剂组成，使用时只需将A，B两种试剂和Exosome或者EVs混合即可。整个过程的操作不超过一小时即可完成使EVs或Exosome高效地将物质运输至靶细胞。
产品信息
货号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
EVEN105A-1 | EV-Entry Reagent System Kit | 5 rxns |
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EVEN110A-1 | 10rxns |
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（四）XPackExosome Protein Engineering
XPack技术可将任一蛋白包装至Exosome中，并高效地运输至靶细胞中发挥其生物学作用。SBI公司优化了一特殊的多肽序列可将蛋白靶向介导至Exosome膜上，并将该蛋白包装至Exosome分泌至细胞外。XPack多肽序列已经整合在了XPack克隆和慢病毒表达载体中，可以使报告蛋白或任一兴趣蛋白包装至Exosome。这一“XPack”多肽序列已经包含在XPack慢病毒表达载体系列中选择合适的XPack reporter Ientivectors或者pre-loaded reporter Exosomes，可实现通过荧光或者发光反应来动态观察Exosomes。此外，研究者可改造含有兴趣的Exosome，并研究Exosome的靶细胞运输。
产品信息
产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格（元） |
XPAK510PA-1 | XPack CMV-XP-MCS-EF1-Puro Cloning Lentivector | 10ug |
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XPAK530PA-1 | XPack CMV-XP-GFP-EF1-Puro Expression Lentivector | 10ug |
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XPAK531PA-1 | XPack CMV-XP-RFP-EF1-Puro Expression Lentivector | 10ug |
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XPAK532PA-1 | XPack CMV-XP-Luciferase-EF1-Puro Expression Lentivector | 10ug |
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XPAK710PA-1 | XPack MSCV-XP-MCS-EF1-Puro Cloning Lentivector | 10ug |
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XPAK730PA-1 | XPack MSCV-XP-GFP-EF1-Puro Expression Lentivector | 10ug |
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XPAK731PA-1 | XPack MSCV-XP-RFP-EF1-Puro Expression Lentivector | 10ug |
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XPAK732PA-1 | XPack MSCV-XP-Luciferase-EF1-Puro Expression Lentivector | 10ug |
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（五）制备包含目的miRNA的Exosome
不同细胞类型分泌的Exosome含有不同的RNA和蛋白，对于其生物功能的研究很有意义。将特异性的RNA序列选择性包装至Exosome是研究的热点。SBI已经研究了一特殊RNA序列标签能将小RNA包装至Exosome中并分泌至细胞外。XMotif RNA序列标签已经整合到了miRNA和anti-miRNA寡核苷酸中，并且已经构建至载体，将介导miRNA包装至Exosome，这一技术为研究Exosome介导的潜在治疗作用的miRNAs或anti-miRNAs运输至疾病细胞的功效，提供了有力工具。
（六）靶向运输至特定细胞
SBI开发了“XStamp”技术即Exosome表面呈现系统可将兴趣蛋白高效地定位于改造过的Exosome表面。该技术基于MFG-E8的C1C2结构域的C末端融合。与XStamp标签融合的蛋白质序列会在分泌的Exosome表面有效展现能够与之融合的蛋白配体。该技术能够将Exosome表面带上靶细胞的位置标签，并引导Exosome将物质运输至正确靶细胞。
产品信息
产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格（元） |
XSTP710PA-1 | XStamp cloning and expression lentivector MSCV-Leader-MCS-C1C2-EF1-Puro | 10 ug |
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XSTP720PA-1 | XStamp MLN ExosomeMotilin receptor GI tract targeting lentivector | 10 ug |
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XSTP721PA-1 | XStamp NCAM Exosome brain targeting lentivector | 10 ug |
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XSTP722PA-1 | XStamp BHP1 Exosome brain homing peptide targeting lentivector | 10 ug |
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XSTP723PA-1 | XStamp GE11 Exosome EGFR targeting lentivector | 10 ug |
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XSTP724PA-1 | XStamp Her2 ligand Exosome Her2 receptor targeting lentivector | 10 ug |
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XSTP725PA-1 | XStamp CD40L Exosome CD40 receptor targeting lentivector | 10 ug |
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XSTP726PA-1 | XStamp IL2 Exosome IL-2 receptor targeting lentivector | 10 ug |
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文献引用：
[1]Raposo G, Stoorvogel W. Extracellular vesicles: exosomes, microvesicles, and friends.[J]. Journal of Cell Biology, 2013, 200(4):373-383.
