来宝网 2016/7/22点击1610次
<span style="color: rgb(0, 0, 255);"><span style="font-size: 16px;"><strong>一、支原体相关背景</strong></span></span><br />
<br />
支原体污染对细胞培养造成多方面的不良影响,已经成为在细胞培养时的一个严重问题,保守估计常规细胞培养中支原体污染率为15-35%,在某些地方甚至更高,严重干扰实验结果的可信度。因此,定期进行支原体检测,确保无支原体的细胞培养体系,才能获得准确有效的实验数据。<br />
<strong>什么是支原体(Mycoplasma)?</strong><br />
又称霉形体,直径在0.1-0.3μm,是目前发现的最小的最简单的原核生物,可以轻松地通过滤膜,混入培养系统中,呈高度多形性,有球形、杆形、丝状、分支状等多种形态。通常依附在细胞膜表面,支原体没有刚性的细胞壁,因此普通的抗生素对它根本不起作用。 <br />
<strong>支原体污染的后果?</strong><br />
细菌和真菌造成的污染相对比较容易检测、预防和去除,然而支原体造成的污染很难察觉,即使生长密度高达10<sup>7</sup>-10<sup>9</sup>CFU/ml,也没有污染迹象,如浑浊、pH变化等。<br />
支原体污染后导致细胞生长变慢,状态变差,不会马上使细胞致死,但会影响细胞内的各种参数,如改变细胞膜抗原性,改变细胞新陈代谢,干扰核酸的合成,改变DNA转染效率,导致染色体畸变等。<br />
<br />
<img alt="" src="http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2016/07/B1469148380542vzx2m56pzspng_small.jpg" style="width: 640px; height: 255px;" /><br />
<br />
<strong>典型的支原体污染来源?</strong><br />
<br />
细胞之间交叉污染;<br />
工作环境或实验器材的污染;<br />
实验者无菌操作不佳;<br />
培养基或其他试剂污染;<br />
制备细胞的原始组织或器官的污染;<br />
因此,常规的支原体污染检测以及环境支原体污染的预防已经是每个细胞培养实验室所必备的。<br />
<br />
<strong>细胞培养遇到支原体污染,怎么办?</strong><br />
<br />
<img alt="" src="http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2016/07/A1469148529144m9zcm6g2fzpng_small.jpg" style="width: 495px; height: 342px;" /><br />
<span style="color: rgb(0, 0, 255);"><span style="font-size: 16px;"><strong>二、翊圣支原体相关产品-------检测、预防、去除一步到位</strong></span></span><br />
<br />
<span style="font-size: 14px;"><span style="color: rgb(255, 0, 0);"><strong>1</strong><strong> 支原体检测相关产品<br />
<img alt="" src="http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2016/07/B1469159545118fb68vcw4x5_small.jpg" style="width: 640px; height: 159px;" /></strong></span></span>
<table border="1" cellpadding="1" cellspacing="1" style="width: 640px;">
<tbody>
<tr>
<td style="width: 320px;"><strong>【原理】</strong>:通过PCR法检测培养细胞等生物材料中的支原体,所用引物为根据支原体16SrRNA序列保守区域设计,特异性扩增支原体DNA。<br />
<strong>【流程】:</strong><br />
样品制备<img alt="" src="http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2016/07/B146914873761954w4nu9tqtpng_small.jpg" style="width: 28px; height: 11px;" />巢式PCR<img alt="" src="http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2016/07/A14691487543686uimyw5ycupng_small.jpg" style="width: 28px; height: 11px;" />DNA电泳检测<br />
<strong>【特点】</strong>:简单快速高效,只需两步PCR即可,灵敏度高。包含实验所需的成套组分(如高效PCR Mix和阳性对照模板),PCR扩增及电泳分析只需数个小时。<br />
<strong>【结果判定】</strong>:是否含有相应阳性条带(详见说明书)。<br />
<img alt="" src="http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2016/07/B14691488375518gdexxjxhbpng_small.jpg" style="width: 303px; height: 177px;" /><br />
<strong>【相关产品】</strong>:GMyc-PCR支原体检测试剂盒<br />
40601ES10 10 assays 327.00</td>
<td><strong>【原理】:</strong>利用Yeasen独特的等温扩增技术,只需吸取1μl疑似支原体污染的细胞培养上清加入反应体系中,61℃孵育1小时即可,若细胞培养物被支原体污染,支原体DNA的保守序列会被大量、快速地扩增。<br />
<strong>【流程】:</strong><br />
样品制备<img alt="" src="http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2016/07/B1469148912201bbrzzj4g2apng_small.jpg" style="width: 28px; height: 11px;" />61℃温浴<img alt="" src="http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2016/07/A1469148926127qxtu3qpw4kpng_small.jpg" style="width: 28px; height: 11px;" />肉眼观察<br />
<strong>【特点】</strong>:无需PCR;无需电泳;结果肉眼可见,灵敏度高、准确性高。<br />
<strong>【结果判定】</strong>:<br />
若反应液为蓝紫色,则判定为阴性;<br />
若反应液为天蓝色,则判定为阳性。<br />
<img alt="" src="http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2016/07/A1469148982361usynez2anbpng_small.jpg" style="width: 163px; height: 123px;" /><br />
<strong>【相关产品】</strong>:<br />
MycAway<sup>TM</sup> 一步法快速支原体检测试剂盒<br />
40611ES25 25T 467.00<br />
40611ES60 100T 1537.00</td>
</tr>
</tbody>
</table>
<br />
<span style="font-size: 14px;"><strong><span style="color: rgb(255, 0, 0);">2 MycAway</span></strong><span style="color: rgb(255, 0, 0);"><strong><sup>TM</sup></strong><strong>支原体去除试剂</strong></span></span><br />
<table border="0" cellpadding="1" cellspacing="1" style="width: 640px;">
<tbody>
<tr>
<td style="width: 155px;"><img alt="" src="http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2016/07/B1469159505555f69ahb7wfhpng_small.jpg" style="width: 178px; height: 116px;" /></td>
<td style="border-color: rgb(0, 0, 0);"><strong>【作用原理】:</strong>MycAway<sup>TM</sup> 支原体去除试剂是一种混合抗生素制剂,含有三种对支原体具有抑菌作用的组分,分别是喹诺酮类、四环素衍生物类和大环内酯类抗生素,可通过抑制支原体核糖体蛋白/或DNA的合成,取得良好的支原体清除效果。<br />
<strong>【操作方法】</strong>:同常规抗体加入方法(仅仅稀释倍数不同而已),本品工作液为1×。<br />
<img alt="" src="http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2016/07/A1469149675021t93paua3cwpng_small.jpg" style="width: 191px; height: 176px;" /> <img alt="" src="http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2016/07/B1469149693691hp78j439bwpng_small.jpg" style="width: 189px; height: 176px;" /><br />
图A 支原体污染细胞图片 图B 支原体清除试剂处理后细胞图<br />
<strong>【相关产品】:</strong>MycAway<sup>TM</sup> 支原体去除试剂(1000×)<br />
40607ES03 1ml 467.00<br />
40607ES08 5×1ml 1357.00</td>
</tr>
</tbody>
</table>
<table border="0" cellpadding="1" cellspacing="1" style="width: 640px;">
<tbody>
<tr>
<td style="width: 155px;"><img alt="" src="http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2016/07/A1469159466596zd3pm3supa_small.jpg" style="width: 177px; height: 85px;" /></td>
<td style="border-color: rgb(0, 0, 0);"><strong>【作用原理】:</strong>MRA支原体清除试剂盒核心组分为抗生素喹啉家族的衍生物,通过抑制支原体DNA解旋酶去除支原体感染。推荐浓度0.5ug/ml,能有效去除多种支原体,细胞毒性小。<br />
<strong>【操作方法】</strong>:同常规抗体加入方法(仅仅稀释倍数不同而已),本品工作液为1×。<br />
<img alt="" src="http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2016/07/B1469149878566ypyseuycv5png_small.jpg" style="width: 194px; height: 202px;" /> <img alt="" src="http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2016/07/A1469149887355eaacak7vrppng_small.jpg" style="width: 196px; height: 202px;" /><br />
图A 支原体污染的细胞培养物 图B MRA去除支原体后的细胞培养物<br />
<strong>【相关产品】:</strong>MRA支原体清除试剂盒(100×)<br />
Cat# 093050044 5ml 2200.00<br />
</td>
</tr>
</tbody>
</table>
<br />
<span style="font-size: 14px;"><span style="color: rgb(255, 0, 0);"><strong>3 支原体预防相关</strong></span></span><br />
<br />
<img alt="" src="http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2016/07/B146915003973738u8mgbeecpng_small.jpg" style="width: 642px; height: 133px;" />
<table border="1" cellpadding="1" cellspacing="1" style="width: 642px;">
<tbody>
<tr>
<td style="width: 214px;"><strong>【作用原理】</strong>:细胞培养过程中,为防止支原体污染带来的麻烦,可在细胞培养初期就加入支原体预防试剂。MycAway<sup>TM</sup> 支原体预防试剂的主要成分与支原体去除试剂相同,但是对相应的各组分抗生素的剂量加以优化和调整。对支原体具有较好的预防作用。<br />
<strong>【使用方法】:</strong>按1:2000比例加入即可。<br />
<strong>【相关产品】:</strong><br />
MycAway<sup>TM</sup> 支原体预防试剂(2000×)<br />
40608ES03 1ml 387.00元<br />
40608ES08 5×1ml 1257.00元</td>
<td style="width: 214px;"><strong>【工作原理】:</strong>其活性成分是季铵类衍生物,不含汞,甲醛,苯酚或酒精等刺激性物质,无毒并可以生物降解。对一般的工作台和器材表面没有任何损伤。只需轻轻一喷,就可预防工作环境支原体污染,让你的实验更放心和舒心。<br />
<strong>【使用方法】:</strong>同酒精消毒方法。直接喷洒即可。<br />
<strong>【相关产品】:</strong><br />
MycAway<sup>TM</sup>支原体喷雾剂(即用型)<br />
40605ES03 2×500ml 407.00元<br />
40605ES08 10×500ml 1617.00元<br />
<br />
</td>
<td style="width: 214px;">【<strong>相关产品</strong>】:<br />
MycGuard<sup>TM</sup>-1 Solution (100×), for Disinfecting Water Bath of CO<sub>2</sub> Incubator 1号消毒卫士(支原体污染预防)<br />
--------预防细胞培养箱水盘污染<br />
40609ES60 100ml 247.00元<br />
<br />
MycGuard<sup>TM</sup>-2 Solution (500×), for Disinfecting Ordinary Water Bath 水浴锅2号消毒卫士(支原体污染预防<br />
-------预防水浴锅污染<br />
40610ES60 100ml 237.00元<br />
</td>
</tr>
</tbody>
</table>