来宝网 2010/12/23点击1580次
小鼠免疫球蛋白M（IgM）定量检测试剂盒（ELISA）
使用说明书
【小鼠免疫球蛋白M（IgM）Elisa试剂盒试剂盒名称】
【小鼠免疫球蛋白M（IgM）Elisa试剂盒试剂盒用途】
定量检测小鼠血清、血浆及相关液体样本中免疫球蛋白M（IgM）的含量。
【小鼠免疫球蛋白M（IgM）Elisa试剂盒检测原理】
本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。将标准品、待测样本加入到预先包被小鼠免疫球蛋白M（IgM）单克隆抗体透明酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分，再加入酶标工作液，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B，底物（TMB）在辣根过氧化物酶（HRP）催化下转化为蓝色产物，在酸的作用下变成黄色，颜色的深浅与样品中小鼠免疫球蛋白M（IgM）浓度呈正相关，450nm波长下测定OD值，根据标准品和样品的OD值，计算样本中小鼠免疫球蛋白M（IgM）含量。
【小鼠免疫球蛋白M（IgM）Elisa试剂盒试剂盒组成】
1
酶标包被板
12孔×8条
7
显色剂A液
6mL
2
标准品
0.3mL×6管
8
显色剂B液
3
20倍浓缩洗涤液
25mL
9
终止液
4
样本稀释液
10
说明书
1份
5
特殊稀释液
11
封板膜
2张
6
酶标试剂
12
密封袋
1个
备注：标准品（1号→6号）浓度依次为：3200、1600、800、400、200、100 μg/mL
【小鼠免疫球蛋白M（IgM）Elisa试剂盒需要而未提供的试剂和器材】
1、37℃恒温箱
2、标准规格酶标仪
3、精密移液器及一次性吸头
4、蒸馏水
5、一次性试管
6、吸水纸
【小鼠免疫球蛋白M（IgM）Elisa试剂盒操作步骤】
1、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡30分钟。
2、配液：用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。
3、加标准品和待测样本：取足够数量的酶标包被板，固定于框架上，分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔，记录各孔位置，在标准品孔中加入标准品50μL；待测样本孔中先加入待测样本10μL，再加样本稀释液40μL（即样本稀释5倍）；空白对照孔不加。
4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。
5、洗板：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板4次（也可用洗板机按说明书操作洗板）。
6、加酶标工作液：每孔加入酶标工作液50μL，空白对照孔不加。
7、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。
8、洗板：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板4次（也可用洗板机按说明书操作洗板）。
9、显色：每孔先加入显色剂A 液50μL，再加入显色剂B液 50&
