来宝网 2010/12/1点击1329次
上海亨代劳科技有限公司是一家集研发、销售、技术服务于一体的高科技企业.销售多种试剂,长期为全国科研机构、高校和科研人员提供优质产品，主要经营ELISA试剂盒、细胞、血清、抗体、生物试剂、培养基、等产品，详细信息请电话联系.
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特异性：本试剂盒可同时检测天然或重组的猪IFN-γ，且与其他相关蛋白无交叉反应。 预期应用：ELISA法定量测定猪血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中IFN-γ含量。 l 试剂盒保存： l 刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。 1. 酶联板（Assay plate ）： 一块（96孔）。 3. 样品稀释液（Sample Diluent）： 1×20ml/瓶。 4. 生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）： 1×10ml/瓶。 5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液（HRP-avidin Diluent）： 1×10ml/瓶。 6. 生物素标记抗体（Biotin-antibody）： 1×120μl/瓶（1：100）。 7. 辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）： 1×120μl/瓶（1：100）。 8. 底物溶液（TMB Substrate）： 1×10ml/瓶。 9. 浓洗涤液（Wash Buffer）： 1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 10. 终止液（Stop Solution）： 1×10ml/瓶（2N H2SO4）。 5. 系列可调节移液器及吸头，一次检测样品较多时，最好用多通道移液器 6. 蒸馏水，容量瓶等 标本的采集及保存 1. 血清：全血标本请于室温放置2小时或 2. 血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。 3. 细胞培养物上清或其它生物标本：1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于 注：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。 标本的稀释原则： 首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量，确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内，检测的结果才是准确的。稀释的过程中，应做好详细的记录。最后计算浓度时，稀释了“N”倍，标本的浓度应再乘以“N”。 标准品的稀释原则：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为50 ng/ml,，做系列倍比稀释后，分别稀释50 ng/ml, 25 ng/ml, 125 ng/ml, 6.2 ng/ml, 如配制25 ng/ml,标准品：取0.5ml（不要少于0.5ml）50 ng/ml,的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。 生物素标记抗体的稀释原则： 临用前以生物素标记抗体稀释液稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（每孔100μl），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素标记抗体加990μl生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。 辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则： 临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（每孔100μl），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。 操作步骤 实验开始前，请提前配置好所有试剂，试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时，用样品稀释液进行稀释，以使样品符合试剂盒的检测范围。 1. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。 为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。 2. 弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl（取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制），37℃,60分钟。
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