小鼠IgE ELISA试剂盒，高灵敏检测小鼠生物样本中的IgE

来宝网 2025/4/7点击20次

IgE检测试剂盒是一种高度敏感的双位点酶联免疫吸附测定（ELISA），用于检测小鼠生物样本中的IgE。如果ELISA用于超出预期用途的其他用途，用户可能需要针对该用途进行优化。

艾美捷小鼠IgE ELISA试剂盒（#E-90E）双抗体夹心ELISA原理：

在此检测中，样本中存在的IgE与吸附在聚苯乙烯微量滴定板孔表面的抗IgE抗体发生反应。经过洗涤去除未结合的蛋白质后，加入与辣根过氧化物酶（HRP）结合的抗IgE抗体。这些酶标记的抗体与之前结合的IgE形成复合物。经过另一次洗涤步骤后，通过加入显色底物3,3',5,5'-四甲基联苯胺（TMB）来检测与免疫吸附剂结合的酶。结合的酶量与样本中IgE的浓度成正比；因此，450 nm处的吸光度是测试样本中IgE浓度的衡量指标。可以通过从标准曲线（由标准品构建）中插值得到测试样本中IgE的量，并根据样本稀释情况进行校正。

样本采集与处理：

所有血液成分和生物材料都应被视为潜在危险品。在处理和丢弃时应遵循普遍预防措施。

如果血液样本凝固、严重溶血、乳糜血或样本完整性受到质疑，请做好记录，并谨慎解读结果。

以下样本采集和储存条件仅供参考。样本稳定性尚未经过评估。

血清样本：通过静脉穿刺采集血液。血凝块形成后，通过离心将血清与细胞分离。立即进行检测，或分装后将样本储存于–80°C（优先）或–20°C。避免反复冻融。

血浆样本：将血液采集到含有抗凝剂的容器中，然后离心。立即进行检测，或分装后将样本储存于–80°C（优先）或–20°C。避免反复冻融。

尿液样本：使用无菌或干净的尿液收集器采集中段尿。离心去除细胞碎片。立即进行检测，或分装后将样本储存于–80°C（优先）或–20°C。避免反复冻融。

已知干扰物：浓度高于0.1%的叠氮化物和硫柳汞会抑制酶反应。

样本稀释：

检测要求每个测试样本在使用前必须进行稀释。每次进行检测时，所有样本都应进行双份检测。推荐的稀释倍数仅供参考。稀释倍数应根据未知样本的预期浓度来确定，使稀释后的样本落在标准曲线的动态范围内。如果不确定样本水平，在运行整个板之前，建议先用一两个代表性样本进行系列稀释。

血清样本：推荐起始稀释倍数为1/50。要制备1/50稀释液，将5 uL样本转移到245 uL 1X稀释液中。充分混合。

血浆样本：推荐起始稀释倍数为1/50。要制备1/50稀释液，将5 uL样本转移到245 uL 1X稀释液中。充分混合。

试剂准备：

在使用前将所有试剂恢复至室温（16°C至25°C）。

稀释液浓缩液：提供的稀释液为5X浓缩液，必须用蒸馏水或去离子水稀释1/5（1份缓冲液浓缩液，4份水）。

洗涤液浓缩液：提供的洗涤液为20X浓缩液，必须用蒸馏水或去离子水稀释1/20（1份缓冲液浓缩液，19份水）。如果储存温度较低，浓缩液中可能会形成晶体。在稀释前将浓缩液加热至30-35°C可以溶解晶体。

酶-抗体结合物：根据每个微量滴定板测试条的需要计算所需的工作结合物溶液量。对于每个用于测试的测试条，将10 uL酶-抗体结合物加入990 uL 1X稀释液中。使用前立即稀释并避光保存。均匀混合，但动作轻柔。避免起泡。

预包被的ELISA微量滴定板：按供应状态即可使用。打开铝箔袋，取出板。将不会用于检测的测试条和孔取下，放回袋中，并与干燥剂一起重新密封。

小鼠IgE校准品：根据批次特定的分析证书进行准备。

结果计算：

1. 从每个样本的测试值中减去平均背景值（标准零的平均吸光度读数）。

2. 对每个标准品的双份读数取平均值，并用结果构建标准曲线。通过使用能够生成四参数逻辑曲线拟合的计算机软件来处理数据，构建标准曲线。也可以使用二阶多项式（二次）或其他曲线拟合，但它们对数据的拟合精度较低。

3. 从标准曲线上插值得到测试样本值。根据血清稀释因子进行校正，以得到原始样本中的IgE浓度。

https://www.amyjet.com/products/E-90E.shtml

小鼠IgM ELISA试剂盒检测原理，样本采集等使用说明

IgM检测试剂盒是一种高灵敏度的双位点酶联免疫测定法（ELISA），用于测量小鼠体内的IgM生物样本。如果ELISA要在预期用途之外使用，用户可能需要优化所述使用。

双抗体夹心ELISA原理：

在此检测中，样本中存在的IgM与吸附在聚苯乙烯微量滴定板孔表面的抗IgM抗体发生反应。经过洗涤去除未结合的蛋白质后，加入与辣根过氧化物酶（HRP）结合的抗IgM抗体。这些酶标记的抗体与之前结合的IgM形成复合物。经过另一次洗涤步骤后，通过加入显色底物3,3',5,5'-四甲基联苯胺（TMB）来检测与免疫吸附剂结合的酶。结合的酶量与样本中IgM的浓度成正比；因此，450 nm处的吸光度是测试样本中IgM浓度的衡量指标。可以通过从标准曲线（由标准品构建）中插值得到测试样本中IgM的量，并根据样本稀释情况进行校正。

仅限研究使用。不得用于诊断目的。仅限体外使用。

当完全理解包装插页说明中的信息，并遵循良好的实验室操作规范时，可以获得可靠且可重复的结果。可能影响检测性能的因素包括仪器功能、玻璃器皿的清洁度、蒸馏水或去离子水的质量，以及试剂和样本移液、洗涤技术、孵育时间或温度的准确性。不要将不同批次或来源的试剂混合或替换。

艾美捷小鼠IgM ELISA试剂盒（#E-90M）组成

试剂盒及其组分的有效期在包装标签上标明。如果按照本试剂盒协议插页的要求储存和使用，所有组分在有效期内均应稳定。

所需材料（但未提供）：

精密移液管（2 uL至100 uL），用于制备和分装稀释液

试管

喷雾瓶或微量滴定板洗涤/抽吸装置

蒸馏水或去离子水

微量滴定板读取器

用于制备试剂和缓冲液溶液的各种玻璃器皿

用于样本收集的离心机

用于血浆收集的抗凝剂

计时器

样本采集与处理：

所有血液成分和生物材料都应被视为潜在危险品。在处理和丢弃时应遵循普遍预防措施。

如果血液样本凝固、严重溶血、乳糜血或样本完整性受到质疑，请做好记录，并谨慎解读结果。

以下样本采集和储存条件仅供参考。样本稳定性尚未经过评估。

血浆样本：将血液采集到含有抗凝剂的容器中，然后离心。立即进行检测，或分装后将样本储存于–80°C（优先）或–20°C。避免反复冻融。

已知干扰物：浓度高于0.1%的叠氮化物和硫柳汞会抑制酶反应。

样本稀释：

血清样本：推荐起始稀释倍数为1/10,000。要制备1/10,000稀释液，将5 uL样本转移到495 uL 1X稀释液中。得到1/100稀释液。接下来，将5 uL 1/100稀释液转移到495 uL 1X稀释液中。得到1/10,000稀释液。每个阶段充分混合。

血浆样本：推荐起始稀释倍数为1/10,000。要制备1/10,000稀释液，将5 uL样本转移到495 uL 1X稀释液中。得到1/100稀释液。接下来，将5 uL 1/100稀释液转移到495 uL 1X稀释液中。得到1/10,000稀释液。每个阶段充分混合。

试剂准备：

在使用前将所有试剂恢复至室温（16°C至25°C）。

稀释液浓缩液：提供的稀释液为5X浓缩液，必须用蒸馏水或去离子水稀释1/5（1份缓冲液浓缩液，4份水）。

预包被的ELISA微量滴定板：按供应状态即可使用。打开铝箔袋，取出板。将不会用于检测的测试条和孔取下，放回袋中，并与干燥剂一起重新密封。

小鼠IgM校准品：根据批次特定的分析证书进行准备。

结果计算：

1. 从每个样本的测试值中减去平均背景值（标准零的平均吸光度读数）。

3. 从标准曲线上插值得到测试样本值。根据血清稀释因子进行校正，以得到原始样本中的IgM浓度。

https://www.amyjet.com/products/E-90M.shtml

小鼠IgG ELISA试剂盒--准确快速定量生物样本中的总IgG

IgG是一种在免疫系统中发挥关键作用的抗体。IgG抗体由浆细胞产生，是血液和组织中含量最丰富的抗体类型。它们参与识别和中和细菌、病毒等病原体，同时还激活免疫系统的其他成分。

ICL的小鼠IgG ELISA试剂盒能够准确地快速定量您生物样本中的总IgG。

艾美捷小鼠IgG ELISA试剂盒（#E-90G）：

抗体类型：ELISA

宿主：山羊

目标物种：小鼠

特异性/目标：IgG重链+轻链（h+l）

规格：1.0

检测范围：9.375 ng/ml 600 ng/ml

灵敏度：2.084 ng/ml

检测时间：100分钟

样本类型：血浆、血清

储存条件：2-8°C

所需材料（但未提供）：

精密移液管（2 uL至100 uL），用于制备和分装稀释液

试管

喷雾瓶或微量滴定板洗涤/抽吸装置

蒸馏水或去离子水

微量滴定板读取器

用于制备试剂和缓冲液溶液的各种玻璃器皿

用于样本收集的离心机

用于血浆收集的抗凝剂

计时器

样本采集与处理：

所有血液成分和生物材料都应被视为潜在危险品。在处理和丢弃时应遵循普遍预防措施。

如果血液样本凝固、严重溶血、乳糜血或样本完整性受到质疑，请做好记录，并谨慎解读结果。

以下样本采集和储存条件仅供参考。样本稳定性尚未经过评估。

血浆样本：将血液采集到含有抗凝剂的容器中，然后离心。立即进行检测，或分装后将样本储存于–80°C（优先）或–20°C。避免反复冻融。

已知干扰物：浓度高于0.1%的叠氮化物和硫柳汞会抑制酶反应。

样本稀释：

血清样本：推荐起始稀释倍数为1/50,000。要制备1/50,000稀释液，将5 uL样本转移到995 uL 1X稀释液中。得到1/200稀释液。接下来，将4 uL 1/200稀释液转移到996 uL 1X稀释液中。得到1/50,000稀释液。每个阶段充分混合。

血浆样本：推荐起始稀释倍数为1/50,000。要制备1/50,000稀释液，将5 uL样本转移到995 uL 1X稀释液中。得到1/200稀释液。接下来，将4 uL 1/200稀释液转移到996 uL 1X稀释液中。得到1/50,000稀释液。每个阶段充分混合。

检测原理：

在此检测中，样本中存在的IgG与吸附在聚苯乙烯微量滴定板孔表面的抗IgG抗体发生反应。经过洗涤去除未结合的蛋白质后，加入与辣根过氧化物酶（HRP）结合的抗IgG抗体。这些酶标记的抗体与之前结合的IgG形成复合物。经过另一次洗涤步骤后，通过加入显色底物3,3',5,5'-四甲基联苯胺（TMB）来检测与免疫吸附剂结合的酶。结合的酶量与样本中IgG的浓度成正比；因此，450 nm处的吸光度是测试样本中IgG浓度的衡量指标。可以通过从标准曲线（由标准品构建）中插值得到测试样本中IgG的量，并根据样本稀释情况进行校正。

相关产品：

小鼠IgA ELISA试剂盒

https://www.amyjet.com/products/GA-90A.shtml

β-半乳糖苷酶染色试剂盒--染色步骤说明

大肠杆菌LacZ基因是一种常用于检测载体介导基因转移表达效率的报告基因。它也常用于研究基因启动子调控。LacZ编码的β-半乳糖苷酶是一种近乎理想的表达选择，因为它非常稳定，抗蛋白酶降解，能够利用多种底物，并且可以方便地在原位进行检测。AkrivisBio的β-半乳糖苷酶染色试剂盒是一种简单、灵敏的检测方法，利用无色底物X-Gal生成一种强烈的蓝色不溶性靛蓝产物，可在显微镜下轻松观察。

艾美捷β-半乳糖苷酶染色试剂盒：

货号：COS-0104

规格：包含足够染色20个12孔板的试剂，或等量体积的6孔板或24孔板。

样本类型：贴壁细胞、悬浮细胞

适用范围：所有物种

检测方法：光学显微镜

检测类型：定性

应用：用于在光学显微镜下观察细胞中的β-半乳糖苷酶活性。

检测范围：在每孔10000 - 100000个细胞之间响应高度线性。

储存条件：-20°C

运输温度：凝胶冰袋

有效期：自发货日期起一年

β-半乳糖苷酶染色试剂盒组成：

- 固定液：125 ml（NM COS-0104-A）

- X-Gal冻干粉：绿色（COS-0104-B）

- 染色缓冲液：125 ml（WM COS-0104-C）

- 染色补充液：1.5 ml（红色，COS-0104-D）

储存和操作：

未开封的试剂盒应储存于-20°C。开封后，除X-Gal应储存于-20°C外，其他组分均可在4°C下保存。

用户自备材料：

- PBS 约1 L

- DMSO或DMF

- 聚丙烯管（如Eppendorf等带盖的尖底离心管）。不要使用聚苯乙烯容器。

- 70%甘油

染色步骤：

A. 一般注意事项：

本协议适用于12孔培养板的孔。如果使用其他规格的培养板，请按比例增加或减少体积。

B. 试剂准备：

将20 mg X-Gal溶解于1 ml DMSO或DMF中，制备20X储存液。未使用的X-Gal溶液可在-20°C下保存长达一个月。

注意：始终使用聚丙烯容器或玻璃容器来制备和储存X-Gal溶液。不要使用聚苯乙烯容器。如果出现沉淀，只需将溶液加热即可重新溶解沉淀物。

C. 染色：

1. 移去培养基，用1 ml PBS洗涤细胞一次。

2. 用0.5 ml固定液在室温下固定细胞10 - 15分钟。

3. 在细胞固定过程中，仅使用聚丙烯管制备以下染色液。每个孔需要0.5 ml染色液。

- 按以下比例制备足够数量的染色液：

- 染色缓冲液：470 µl

- 染色补充液：5 µl

- 20 mg/ml X-Gal（溶于DMF）：25 µl

4. 用1 ml PBS洗涤细胞两次。

5. 向每个孔中加入0.5 ml染色液，盖上培养板，于37°C孵育过夜。

6. 次日，在约200X放大倍数下用显微镜观察细胞，观察蓝色的出现。

7. 对于长期保存染色后的培养板，移去染色液，并在细胞上覆盖70%甘油。于4°C保存。

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油红O脂质染色试剂盒--脂质染色步骤及检测原理说明

细胞脂质通常存在于细胞及其细胞器的膜中。在那些储存脂质用于能量产生或作为更复杂结构的来源的细胞中，脂质通常以滴状形式出现，主要由甘油三酯组成，尽管其他中性脂质也可能存在。脂肪细胞分化为成熟细胞涉及脂滴的显著积累。有一些脂质储存疾病（如高雪氏病、尼曼-皮克病、法布里病等），其中过量脂质的积累可能导致严重的病理变化。油红O是一种脂溶性偶氮染料，它优先将中性脂质染成红色，因此非常适合用于观察中性脂质的积累。AkrivisBio油红O脂质染色试剂盒还包括苏木精用于将细胞核染成蓝色，是一种简单、经济的方法，可在显微镜下定性观察细胞培养中细胞的脂质积累。该试剂盒提供了足够的材料来染色两个培养板（6孔、12孔、24孔或96孔）或五个100毫米培养皿。

艾美捷油红O脂质染色试剂盒：

货号：COS-0101

规格：用于染色两个培养板（6孔、12孔、24孔或96孔）或五个100毫米培养皿

样本类型：培养细胞

适用范围：所有物种

检测方法：光学显微镜

检测类型：定性

应用：在显微镜下观察培养细胞中的脂质积累

储存条件：室温

运输温度：室温

有效期：自发货日期起一年

原理：

1. 非常疏水的染料优先在细胞培养中与中性脂质一起积累。

2. 经过足够时间后，脂质积累会呈现为深红色物体。

油红O脂质染色试剂盒试剂盒组成：

PBS：50 ml（NM COS-0101A）

10%甲醛：24 ml（NM Blue Dot COS-0101B）

油红O：60 mg（NM COS-0101C）

苏木精：24 ml（琥珀色，COS-0101D）

0.22 um注射器过滤器：1个（COS-0101E）

10 ml注射器：1个（COS-0101F）

用户自备材料：

光学显微镜

100%异丙醇

储存条件和操作：

将试剂盒储存于室温。

PBS、10%甲醛和苏木精：按供应状态即可使用。

油红O：向装有油红O粉末的瓶中加入20 ml 100%异丙醇，盖紧瓶盖并充分混合。让溶液静置20分钟以完成溶解。如果盖紧瓶盖，溶液可保存一年以上。

制备油红O染色液：将6.7 ml油红O溶液转移到一个15 ml的试管中，加入4.4 ml去离子水，充分混合，静置10分钟。使用前15 30分钟用注射器和过滤器过滤溶液。该溶液足够用于一个培养板，稳定时间约为2小时。

脂质染色步骤：

对于所有添加物，每个孔的使用量如下：

培养板：96孔 48孔 24孔 12孔 6孔 100 mm培养皿

100 ul 200 ul 400 ul 800 ul 1.6 ml 5.5 ml

A. 洗涤：移去细胞培养基，用PBS轻轻洗涤2次。

B. 固定：轻轻向每个孔的侧面加入甲醛。处理完所有孔后，轻轻旋转培养板。孵育30 60分钟。

C. 染色：

1. 移去甲醛，用去离子水轻轻洗涤细胞2次。

2. 向每个孔中加入60%异丙醇，孵育5分钟。

3. 移去异丙醇，加入油红O工作液（完全覆盖细胞）。轻轻旋转培养板，孵育10 20分钟。

4. 移去油红O溶液，根据需要用去离子水洗涤2 5次，直至多余染料不再明显。丢弃未使用的染料。

5. 加入苏木精，孵育1分钟。移去苏木精，根据需要用去离子水洗涤2 5次。

D. 观察：在显微镜下观察时，始终用去离子水覆盖细胞。脂滴呈红色，细胞核呈蓝色。

注意：虽然油红O染色并非定量检测，但可以获得脂质含量的半定量测量：

在苏木精染色并用去离子水洗涤后（如上一步），用60%异丙醇洗涤3次，每次5分钟，轻轻摇动。

用100%异丙醇（表中所示量的一半）提取油红O，轻轻摇动5分钟。此程序对于小于24孔板的孔不太有用，因为较小的孔会给出较低的信号，并且处理起来效率不高。可以在492 nm处读取吸光度。

图：油红O染色细胞

来源：Nguyen等人，2021年，《发育细胞》56卷，1437 1451页， May 17, 2021

https://www.amyjet.com/products/COS-0101.shtml

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