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EvaGreen染料--低PCR抑制、高灵敏度及无致突变性和无细胞毒性

来宝网 2025/2/27点击70次

EvaGreen染料--PCR抑制、高灵敏度及无致突变性和无细胞毒性

 

EvaGreen染料是一种绿色荧光核酸染料,其特征使得该染料可用于多种应用,包括qPCRDNA熔解曲线分析、嗜热解旋酶依赖性扩增(tHDA)的实时监测和毛细管凝胶电泳。染料本身基本上是非荧光的,但在与dsDNA结合时变得高度荧光。DNA结合的染料具有与荧光素(FAM)或SYBR非常接近的激发和发射光谱绿色I,使其易于与配备有488 nm氩激光器或具有该区域波长的任何可见光激发的仪器兼容。

 

EvaGreen染料在热和水解方面都非常稳定,在常规处理过程中提供了便利。EvaGreenSYBR不同,染料不渗透细胞膜,因此无致突变性和细胞毒性绿色I,它迅速进入细胞,是一种强大的突变增强剂。EvaGreen的独特性能染料使其在定量实时PCRqPCR)应用中特别有用。

 

与广泛使用的SYBR相比绿色IEvaGreen染料通常对PCR的抑制性较小,并且不太可能引起非特异性扩增。因此,EvaGreen染料可以以比SYBR高得多的染料浓度使用绿色I,产生用于液滴数字PCR、实时PCR和熔解曲线分析的高分辨率信号。

 

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艾美捷EvaGreen染料BTM-31000特点

1、低PCR抑制--显示出比SYBR低得多的PCR抑制® 绿色I通过智能“按需释放”DNA结合技术  

2、高灵敏度--染料的低PCR抑制允许较高的染料浓度用于大得多的qPCR和熔解曲线分析信号  

3致突变性和无细胞毒性--标准艾姆斯试验无致突变性和细胞毒性; 完全不透细胞膜

4、与快速PCR方案兼容--PCR的最小干扰使得可以显著缩短链延伸时间  

5、与多重PCR兼容--当以推荐浓度使用时,扩增子之间无染料迁移  

6、卓越的热稳定性、化学稳定性和光稳定性--PCR缓冲液中在95-100°C下持续48小时没有可检测的染料分解; 在碱性或酸性条件下高度稳定; 可承受反复冻融循环  

7、光谱与SYBR相似绿色岛--兼容所有主要品牌的qPCR仪器和酶系统

 

参考:

1. Lab Chip (2010) Oct 21;10(20):2666-72 doi: 10.1039/c004521g

2. Anal Chem (2010) 82, 6, 2310-2316 doi: 10.1021/ac902510u

3. J Am Chem Soc (2011) 133, 44, 17705-17712 doi: 10.1021/ja2060116

4. Anal Chem (2013) 85, 23, 11619-11627 doi:10.1021/ac403061n

5. Anal Chem (2013) 85, 2 , 11129-11136 doi: 10.1021/ac4030413

6. Nucleic Acids Res (2013) Oct;41(18):e175 doi:10.1093/nar/gkt684

7. Analyst (2014) Jun 7;139(11):2695-701 doi : 10.1039/c3an02334f

8. 肛门化学 (2014) 86, 5, 2618-2624 doi: 10.1021/ac403843j

 

https://www.amyjet.com/products/%E3%80%90%E7%89%B9%E4%BB%B7%E5%93%81%E7%9B%AE%E3%80%91BTM-31000.shtml

 

BioAssay Systems-QuantiChrom ABTS抗氧化检测试剂盒5分钟试剂孵育时间,实现快速样本检测

 

2,2'-联氮--(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)ABTS+)是一种绿色阳离子自由基,当被还原时会恢复为无色状态。ABTS检测法广泛用于测量抗氧化能力,即食品和生物体系中氧化还原分子清除自由基的能力。BioAssay SystemsABTS抗氧化检测通过测量ABTS自由基从绿色还原为无色时吸光度的变化来实现。在650纳米处吸光度的降低与抗氧化剂浓度成正比,并与Trolox抗氧化标准曲线进行比较。

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艾美捷BioAssay Systems-QuantiChrom ABTS抗氧化检测试剂盒

货号:DABA-100

检测波长:650纳米吸光度(OD650nm)  

样本类型:食品、饮料和尿液样本  

适用物种:通用  

操作时间:35分钟  

检测规模:96孔板,100次检测  

检测下限:20微摩尔Trolox等效物  

有效期:6个月  

 

应用:

用于定量检测食品、饮料和尿液样本中的抗氧化能力。

 

BioAssay Systems-QuantiChrom ABTS抗氧化检测试剂盒主要特点:

快速便捷:5分钟试剂孵育时间,实现快速样本检测。  

适应性强:兼容水相和乙醇提取的样本,稳定的信号允许延长检测时间(最长可达2小时)。  

高通量检测:均质“混合-孵育-测量”型检测方法,可轻松实现自动化,每天可检测数千个样本。

 

相关产品:

QuantiChromDPPH抗氧化能力检测试剂盒  DAOC-120

QuantiChrom™抗氧化检测试剂盒  DTAC-100

QuantiChromTBARS检测试剂盒  DTBA-100

 

艾美捷科技是BioAssay Systems的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。

 

https://www.amyjet.com/brand/BioAssay-Systems.shtml

 

BioAssay Systems-QuantiChrom乙酰胆碱酯酶检测试剂盒,每天可检测数千个样本

 

乙酰胆碱酯酶(EC 3.1.1.7AChE),也称为红细胞胆碱酯酶,主要存在于血液和神经突触中。血清中胆碱酯酶活性较低可能与接触杀虫剂或某些基因变异有关。AChE催化神经递质乙酰胆碱水解为胆碱和乙酸,这一反应对于胆碱能神经元在激活后恢复静息状态是必需的。细胞和血浆中的胆碱酯酶水平可用于指导与有机磷杀虫剂接触和接触的安全预防措施,以及指导是否需要将工人从接触区域移除。简单、直接且易于自动化的AChE活性检测方法非常受欢迎。BioAssay SystemsQuantiChrom™乙酰胆碱酯酶检测基于改进的Ellman方法,其中乙酰胆碱酯酶产生的硫醇胆碱与5,5'-二硫代双(2-硝基苯甲酸)反应生成黄色物质。在412纳米处测量的产物颜色强度与样本中的酶活性成正比。

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艾美捷BioAssay Systems-QuantiChrom乙酰胆碱酯酶检测试剂盒

货号:DACE-100

检测波长:412纳米吸光度(OD412nm)  

样本类型:血液、血清、血浆等  

适用物种:通用  

操作时间:10分钟  

检测规模:100次检测  

检测下限:10 U/L  

有效期:6个月    

 

应用:

用于定量测定乙酰胆碱酯酶(AChE)活性以及评估乙酰胆碱酯酶抑制剂的效果。

 

BioAssay Systems-QuantiChrom乙酰胆碱酯酶检测试剂盒主要特点:

灵敏且准确:在96孔板检测中,检测范围为10600 U/LAChE活性。  

便捷:操作过程仅需加入一种工作试剂,并在室温下分别于2分钟和10分钟时读取吸光度。  

高通量:可轻松自动化为高通量96孔板检测方法,每天可检测数千个样本。

 

相关产品:

QuantiChrom™ α-葡萄糖苷酶检测试剂盒    DAGD-100  

QuantiChrom™ 碱性磷酸酶检测试剂盒    DALP-250  

QuantiChrom™ 酒精脱氢酶检测试剂盒    DADH-100  

QuantiChrom™ 乳酸脱氢酶检测试剂盒    D2DH-100

 

艾美捷科技是BioAssay Systems的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。

 

https://www.amyjet.com/brand/BioAssay-Systems.shtml

 

BioAssay Systems-QuantiChrom酸性磷酸酶检测试剂盒轻松高通量筛选

 

酸性磷酸酶(ACP)是一种在消化过程中催化磷酸基团从其他分子上水解的酶。ACP主要存在于溶酶体中,并在与内质网融合后激活,酸性pH环境为其提供了最佳活性条件。ACP还存在于骨骼、脾脏、肝脏、肾脏和血液中。血清中的ACP水平可以作为前列腺癌的生物标志物,尽管前列腺特异性抗原(PSA)更为常用。BioAssay Systems的非放射性、比色法ACP检测基于合成底物的磷酸基团水解,释放出对硝基苯酚。加入终止试剂后,对硝基苯酚会呈现强烈的颜色。在405纳米处的吸光度增加与酶活性成正比。

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艾美捷BioAssay Systems-QuantiChrom酸性磷酸酶检测试剂盒

货号:DACP-100

检测波长:405纳米吸光度(OD405nm)  

样本类型:生物样本(例如血清)  

适用物种:通用  

操作时间:30分钟  

检测规模:100次检测  

检测下限:0.05 U/L  

有效期:6个月      

 

应用:

用于定量检测生物样本中的酸性磷酸酶(ACP)活性。

 

BioAssay Systems-QuantiChrom酸性磷酸酶检测试剂盒主要特点:

快速且灵敏:线性检测范围(20微升样本):30分钟反应的检测范围为0.0560 U/L。  

高通量:均质“混合-孵育-测量”型检测方法,可轻松在高通量筛选(HTS)液体处理系统上自动化,每天可处理数千个样本。

 

常见问题解答:

我没有正确的波长滤光片,检测还能正常进行吗?  

通常情况下,如果波长在±20纳米范围内,检测仍然可以进行,但灵敏度会略有降低。某些检测的峰宽较窄,建议联系技术支持获取光谱图以确认。

 

我没有96孔板,试剂盒是否可以在384孔板或比色皿中使用?  

是的,检测可以在任何标准孔板或比色皿中进行。只需根据容器调整反应总体积。对于384孔板,使用50微升;对于比色皿,使用500微升或1毫升。

 

试剂盒是否适用于特定物种?  

是的,该试剂盒适用于所有物种。

 

如何准备细胞或组织样本用于检测?  

请参考以下样本制备协议:  

血液样本:血清和血浆应稀释2-5倍。  

组织样本:在解剖前,用Tris缓冲盐水(pH 7.4)冲洗组织以去除血液。将组织(50毫克)在200微升50 mM Tris缓冲液(pH 7.5)中匀浆化。在4℃下以14,000 x g离心10分钟,取上清液用于检测。  

细胞裂解液:通过离心收集细胞(2,000 x g5分钟,4℃)。对于贴壁细胞,不要使用蛋白酶酶收获细胞,而是使用橡胶刮刀。将细胞在适量的冷50 mM Tris缓冲液(pH 7.5)中匀浆化或超声处理,大约每毫升100万细胞。在4℃下以14,000 x g离心10分钟,取上清液用于检测。所有样本可以在-80-20℃下保存至少一个月。

 

未使用的试剂是否可以保存以供后续使用?  

是的,未使用的试剂可以根据试剂盒协议进行保存。应避免试剂的反复冻融。由于检测缓冲液对光非常敏感,建议尽可能将其保存在暗处(如琥珀色瓶或管)以便长期使用。

 

艾美捷科技是BioAssay Systems的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。

 

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BioAssay Systems-QuantiFluo腺苷脱氨酶检测试剂盒检测可在50分钟内完成

 

腺苷脱氨酶(EC 3.5.4.4ADA)是嘌呤代谢中的关键酶,在人体正常免疫功能中发挥重要作用。ADA缺乏是重症联合免疫缺陷(SCID)的原因之一,而在结核病和免疫相关疾病患者中观察到ADA水平升高。BioAssay SystemsDADA-100试剂盒提供了一种便捷的荧光法检测生物样本中的腺苷脱氨酶活性。在此检测中,释放的氨与试剂反应,荧光强度的增加(λex/em = 415/475 nm)与酶活性成正比。

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艾美捷BioAssay Systems-QuantiFluo腺苷脱氨酶检测试剂盒

货号:DADA-100

检测波长:激发波长415纳米,发射波长475纳米(FL415/475 nm)  

样本类型:血清、唾液及其他生物样本  

适用物种:通用  

操作时间:50分钟  

检测规模:96孔板,100次检测  

检测下限:0.3 U/L  

有效期:6个月       

 

应用:

用于定量检测生物样本中的腺苷脱氨酶(ADA)活性。

 

BioAssay Systems-QuantiFluo腺苷脱氨酶检测试剂盒主要特点:

快速且安全:检测可在50分钟内完成——非放射性检测方法。  

灵敏且准确:在96孔板检测中,线性检测范围为0.330 U/L的腺苷脱氨酶活性。  

便捷且高通量:均质“混合-孵育-测量”型检测方法,可轻松实现自动化,每天可检测数千个样本。

 

相关产品:

QuantiFluo™ 谷氨酰胺酶检测试剂盒   DGLN-100  

QuantiFluo™ 氨检测试剂盒 II   D2NH3-100  

QuantiFluo™ 门冬酰胺酶检测试剂盒   DASN-100

 

艾美捷科技是BioAssay Systems的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。

 

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BioAssay Systems-QuantiChrom醇脱氢酶检测试剂盒快速高通量定量

 

乙醇脱氢酶(ADH)是一种氧化还原酶,催化醇与醛或酮之间的相互转化。在人类和其他生物中,ADH对分解可能具有毒性的醇类物质至关重要。在酵母和某些细菌中,ADH催化相反的反应,作为发酵过程的一部分产生醇。BioAssay Systems的非放射性、比色法ADH检测基于NADH偶联的酶促反应中四氮唑盐MTT的还原。还原后的MTT565纳米处具有最大吸收峰。在565纳米处吸光度的增加与酶活性成正比。

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艾美捷BioAssay Systems-QuantiChrom醇脱氢酶检测试剂盒

货号:DADH-100

检测波长:565纳米吸光度(OD565nm)  

样本类型:生物样本(例如血浆、血清、尿液、组织和培养基)  

适用物种:通用  

操作时间:30分钟  

检测规模:100次检测  

检测下限:0.4 U/L  

有效期:6个月         

 

应用:

用于定量检测生物样本中的乙醇脱氢酶(ADH)活性,以及评估药物对其代谢的影响。

 

BioAssay Systems-QuantiChrom醇脱氢酶检测试剂盒主要特点:

快速且灵敏:线性检测范围(20微升样本):30分钟反应的检测范围为0.480 U/L120分钟反应的检测下限为0.1 U/L。  

便捷且高通量:均质“混合-孵育-测量”型检测方法,可轻松在高通量筛选(HTS)液体处理系统上自动化,每天可处理数千个样本。

 

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QuantiChrom™ α-葡萄糖苷酶检测试剂盒   DAGD-100  

QuantiChrom™ 碱性磷酸酶检测试剂盒   DALP-250  

QuantiChrom™ 乙酰胆碱酯酶检测试剂盒   DACE-100  

QuantiChrom™ 乳酸脱氢酶检测试剂盒   D2DH-100

 

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BioAssay Systems-QuantiChrom-α-葡萄糖苷酶检测试剂盒,20分钟快速检测

 

α-葡萄糖苷酶水解末端的非还原性1,4-α-D-葡萄糖残基,释放α-D-葡萄糖。所有动物都需要α-葡萄糖苷酶将麦芽糖水解为葡萄糖以供利用。异常的酶活性与糖尿病和庞贝病等疾病有关。简单、直接且易于自动化的α-葡萄糖苷酶活性检测方法在研究和药物发现领域越来越受欢迎。BioAssay SystemsQuantiChrom™ α-葡萄糖苷酶检测试剂盒专为直接在生物样本中检测α-葡萄糖苷酶活性而设计,无需预处理。改进的方法使用对硝基苯基-α-D-葡萄糖苷作为底物,该底物被α-葡萄糖苷酶特异性水解为黄色产物(最大吸收峰在405纳米)。反应速率与酶活性成正比。

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艾美捷BioAssay Systems-QuantiChrom-α-葡萄糖苷酶检测试剂盒

货号:DAGD-100

检测波长:405纳米吸光度(OD405nm)  

样本类型:生物样本  

适用物种:通用  

操作时间:20分钟  

检测规模:100次检测  

检测下限:2 U/L  

有效期:6个月          

 

应用:

用于定量检测α-葡萄糖苷酶活性以及评估药物对其代谢的影响。

 

BioAssay Systems-QuantiChrom-α-葡萄糖苷酶检测试剂盒主要特点:

高灵敏度和宽线性范围:使用20微升样本,检测下限为2 U/L,线性范围可达250 U/L。  

均质且简单的操作流程:简单的“混合-测量”操作流程可在20分钟内可靠地定量检测α-葡萄糖苷酶活性。  

稳定且适用于高通量筛选(HTS):所有试剂均兼容高通量液体处理仪器。

 

相关产品:

QuantiChrom™ 碱性磷酸酶检测试剂盒DALP-250  

QuantiChrom™ 乙酰胆碱酯酶检测试剂盒DACE-100  

QuantiChrom™ 乙醇脱氢酶检测试剂盒DADH-100  

QuantiChrom™ 乳酸脱氢酶检测试剂盒D2DH-100

 

如何制备用于α-葡萄糖苷酶测定的精子样本?

应使用无细胞精浆,可以通过离心整个精液获得。如果需要,可以抑制酸性同工酶,从而只测量中性异构体。

 

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BioAssay Systems-QuantiChrom-DPPH抗氧化能力检测试剂盒--简单且高通量

 

抗氧化剂是一种能够减缓或防止其他分子氧化的分子。抗氧化剂包括小分子(如谷胱甘肽和维生素)和大分子(如过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶),它们可以保护细胞免受活性氧的损伤。抗氧化剂广泛用于膳食补充剂以及食品、化妆品、橡胶和汽油中的防腐剂。简单、直接且高通量的抗氧化能力检测方法在研究、食品工业和药物发现中具有广泛应用。BioAssay Systems改进的抗氧化能力检测基于样本中抗氧化分子对DPPH的还原作用,导致517纳米处吸光度的降低。抗氧化能力可以通过Trolox标准进行定量表示。

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艾美捷BioAssay Systems-QuantiChrom-DPPH抗氧化能力检测试剂盒

货号:DAOC-120

检测波长:517纳米吸光度(OD517nm)  

样本类型:食品、饮料和生物样本  

适用物种:通用  

操作时间:10分钟  

检测规模:96孔板,120次检测  

检测下限:11微摩尔  

有效期:6个月           

 

应用:

用于定量检测食品、饮料和生物样本中的抗氧化能力。

 

BioAssay Systems-QuantiChrom-DPPH抗氧化能力检测试剂盒主要特点:

灵敏且准确:在96孔板中可检测11微摩尔至300微摩尔的Trolox等效物。  

稳定的试剂:试剂盒中的DPPH以粉末形式提供,可分装后根据需要检测任意数量的孔,或在不同天数甚至数周内重复检测。  

简单且高通量:该检测在室温下进行,是一种均质的“混合-孵育-测量”型检测,可在短短10分钟内完成。可轻松实现自动化,每天可检测数千个样本。

 

相关产品:

EnzyChrom™ 过氧化氢酶检测试剂盒   ECAT-100  

EnzyChrom™ 谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒   EGPX-100  

EnzyChromGSH/GSSG检测试剂盒   EGTT-100  

QuantiChrom™ 抗氧化能力检测试剂盒   DTAC-100  

QuantiChromTBARS检测试剂盒   DTBA-100

 

DAOC-120中表示抗氧化能力的默认单位是Trolox等效抗氧化能力(TEAC),以微摩尔Trolox等效物(μM Trolox equivalents)表示。这是通过将样本的吸光度变化(ΔOD)绘制在Trolox标准曲线上,并确定样本的TEAC值来计算的。抗氧化能力也可以用DPPH517纳米处吸光度的抑制百分比(% inhibition)来表示,计算公式为:  

%抑制 = 100 × ((ODSTD0 ODsample ODsample blank) / ODSTD0)。  

此外,抗氧化能力还可以用EC50来表示,即测试样本的几种不同稀释度并创建样本稀释曲线。然后,通过稀释曲线计算出导致50% DPPH抑制的样本浓度。

 

关于检测波长的选择  

BioAssay Systems建议在517纳米处读取吸光度,因为这是该检测方法最灵敏的波长。然而,您也可以在500580纳米范围内进行读取,但可能会灵敏度降低。

 

艾美捷科技是BioAssay Systems的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。

 

https://www.amyjet.com/brand/BioAssay-Systems.shtml

 

 

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