来宝网 2025/2/17点击87次
Mercodia/艾美捷糖尿病检测、肥胖症、心血管疾病等检测方案
Mercodia 专注于代谢综合征领域的ELISA检测试剂研发,由瑞典北部的化学家、企业家Erling Holmlund于1991年在乌普萨拉成立,Erling渊博的专业知识源于他在Pharmacia Diagnostics糖尿病和心血管疾病领域约20年的免疫产品研发的工作经历。
Mercodia 最初致力于开发ELISA检测试剂。但越来越多药学和大学研究人员要求用可靠的试剂来确保实验结果的准确可靠,为此,Mercodia研制出研究人员需要的高品质的酶联免疫试剂。
现今Mercodia专注于ELISA检测试剂在临床和科研上的应用,尤其在糖尿病,肥胖症和心血管疾病等领域。
Mercodia特点:
1. 所有抗体均使用双单克隆抗体,质量稳定可靠
2. 有效期3年
3. 提供各种物种的糖尿病相关的检测试剂
艾美捷Mercodia产品线:糖尿病、肥胖症、心血管疾病等领域的ELISA检测试剂。
糖尿病(人)
10-1113-01 Insulin ELISA (胰岛素检测试剂盒)
10-1113-10 Insulin ELISA 10-pack (胰岛素检测试剂盒-10盒)
10-1118-01 Proinsulin ELISA (胰岛素原检测试剂盒)
10-1128-01 Iso-Insulin (同工胰岛素检测试剂盒)
10-1132-01 Ultrasensitive Insulin ELISA (超敏胰岛素检测试剂盒)
10-1136-01 C-peptide Specific ELISA (C肽检测试剂盒)
10-1141-01 Ultrasensitive C-peptide ELISA (超敏C肽检测试剂盒)
糖尿病(大小鼠)
10-1145-01 High Range Rat Insulin ELISA (大鼠宽线性胰岛素检测试剂盒)
10-1172-01 Rat C-peptide ELISA (大鼠C肽检测试剂盒)
10-1232-01 Rat/Mouse Proinsulin ELISA (大鼠/小鼠胰岛素原检测试剂盒)
10-1247-01 Mouse Insulin ELISA (小鼠胰岛素检测试剂盒)
10-1247-10 Mouse Insulin ELISA 10-pack (小鼠胰岛素检测试剂盒10盒)
糖尿病(其它动物)
10-1200-01 Porcine Insulin ELISA (猪胰岛素检测试剂盒)
10-1201-01 Bovine Insulin ELISA (牛胰岛素检测试剂盒)
10-1202-01 Ovine Insulin ELISA (羊胰岛素检测试剂盒)
10-1203-01 Canine Insulin ELISA (狗胰岛素检测试剂盒)
心血管&肥胖 (人)
10-1106-01 Lp(a)ELISA (脂蛋白a检测试剂盒)
10-1143-01 Oxidized LDL ELISA (氧化型低密度脂蛋白检测试剂盒)
10-1176-01 MPO ELISA (髓过氧化物酶检测试剂盒)
稀释液及质控品
10-1195-01 Diabetes Sample Buffer (样本稀释液)
10-1164-01 Diabetes Antigen Control-Human L and H
10-1220-01 Diabetes-antigen Control Rat/Mouse L, M ,H
10-1221-01 Animal Insulin Control L, M, H
10-1286-01 Glucagon Control
10-1287-01 Total GLP-1 Contorl
艾美捷科技是Mercodia的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
https://www.amyjet.com/news/Mercodia-new.shtml
Mercodia胰岛素ELISA:特异性测量血清、血浆或细胞培养基中的胰岛素水平
胰岛素ELISA检测:
胰岛素ELISA是一种高质量的酶联免疫吸附测定,用于特异性测量血清、血浆或细胞培养基中的胰岛素水平。
Mercodia胰岛素ELISA:
Mercodia胰岛素ELISA对胰岛素类似物、大鼠或小鼠胰岛素的交叉反应性极低或无交叉反应。这使得该检测能够区分内源性人胰岛素,无论是在接受胰岛素类似物治疗的患者中,还是在大鼠或小鼠模型中。
Mercodia糖尿病抗原对照品:
Mercodia糖尿病抗原对照品(10-1134-01,仅限美国;或10-1164-01)专为胰岛素ELISA设计,用作两级对照品。
艾美捷Mercodia胰岛素ELISA检测特性:
货号:10-1113-01
物种:人
样本类型:血清、血浆、细胞培养基
样本体积:25 µL
检测范围:3 - 200 mU/L(0.13 - 8.70 µg/L)
检测下限:≤ 1 mU/L(0.043 µg/L)
孵育时间:1小时 + 15分钟
检测方法:吸光度
特异性
以下交叉反应已进行测试:
C肽:<0.01%
前胰岛素:<0.01%
去(31-32)位前胰岛素:<0.5%
裂解(32-33)位前胰岛素:<0.5%
去(64-65)位前胰岛素:98%
裂解(65-66)位前胰岛素:56%
门冬胰岛素:4%
地特胰岛素:未检出
甘精胰岛素:24%
谷赖胰岛素:未检出
赖脯胰岛素:未检出
胰岛素样生长因子I(IGF-I):<0.02%
胰岛素样生长因子II(IGF-II):<0.02%
大鼠胰岛素:0.7%
小鼠胰岛素:0.3%
猪胰岛素:93%
羊胰岛素:48%
牛胰岛素:31%
Mercodia胰岛素ELISA文献参考:
Miller, W. G., Thienpont, L. M., Van Uytfanghe, K., Clark, P. M., Lindstedt, P., Nilsson, G., & Steffes, M. W. (2009). Toward standardization of insulin immunoassays. Clinical Chemistry, 55(5), 1011–1018.
Bauer, S. et al. (2017) Functional coupling of human pancreatic islets and liver spheroids on-a-chip: Towards a novel human ex vivo type 2 diabetes model. Sci. Rep. 7, 14620.
Rayner, C. K. et al. (2018) Comparative effects of proximal and distal small intestinal administration of metformin on plasma glucose and glucagon-like peptide-1, and gastric emptying after oral glucose, in type 2 diabetes. Diabetes, Obes. Metab. 21, 640–647.
艾美捷科技是Mercodia的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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Mercodia前胰岛素ELISA:高度特异性的体外诊断(IVD)工具
前胰岛素ELISA检测
前胰岛素ELISA是一种用于定量检测血清或血浆中人前胰岛素的方法。
Mercodia前胰岛素ELISA
Mercodia前胰岛素ELISA是一种高度特异性的体外诊断(IVD)工具,已注册用于体外诊断用途。该检测与人前胰岛素国际参考试剂IRR 84/611进行校准。所使用的抗体的特异性能够实现对人前胰岛素的测量,而不受胰岛素或C肽的干扰。
Mercodia前胰岛素ELISA组成:
每套Mercodia前胰岛素ELISA试剂盒包含96孔的试剂,足以进行42个样本和一条校准曲线的双份检测。微孔板条格式(12条×8孔)非常适合在需要分析的样本数量有限时使用。
Mercodia糖尿病抗原对照品
Mercodia糖尿病抗原对照品(10-1134-01,仅限美国;或10-1164-01)专为前胰岛素ELISA设计,用作两级对照品,用于检测人前胰岛素。
艾美捷Mercodia前胰岛素ELISA检测:
货号:10-1118-01
物种:人
样本类型:血清和血浆
样本体积:50 µL
检测范围:3.3 - 130 pmol/L(0.03 - 1.18 µg/L)
检测下限:≤1.7 pmol/L
孵育时间:1小时 + 1小时 + 15分钟
检测方法:吸光度
以下交叉反应已进行测试:
胰岛素:<0.03%
C肽:<0.006%
去(31-32)位前胰岛素:95%
裂解(32-33)位前胰岛素:95%
去(64-65)位前胰岛素:84%
裂解(65-66)位前胰岛素:90%
猪前胰岛素:4%
小鼠前胰岛素I:3%
小鼠前胰岛素II:16%
大鼠前胰岛素I:13%
大鼠前胰岛素II:10%
Mercodia前胰岛素ELISA检测文献参考:
Fraser, A. et al. (2012) Associations of pregnancy complications with calculated cardiovascular disease risk and cardiovascular risk factors in middle age: the Avon Longitudinal Study of Parents and Children. Circulation 125, 1367–1380.
Velazco-Cruz, L. et al. (2019) Acquisition of Dynamic Function in Human Stem Cell Derived β Cells. Stem Cell Reports 12, 351–365.
AlEssa, H. B. et al. (2017) Dietary patterns and cardiometabolic and endocrine plasma biomarkers in US women. Am. J. Clin. Nutr. 105, 432–441.
Ghiasi, S. M. et al. (2019) Endoplasmic reticulum chaperone glucose-regulated protein 94 is essential for proinsulin handling. Diabetes 68, 747–760
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Mercodia大鼠宽线性胰岛素检测试剂盒:高灵敏度、宽检测范围
Mercodia高效大鼠胰岛素ELISA
一种定量测定大鼠样本中高水平胰岛素的方法。高范围大鼠胰岛素ELISA基于高度特异性的单克隆抗体,对C肽或胰岛素原没有交叉反应。
Mercodia糖尿病抗原控制-大鼠和小鼠(10-1220-01)旨在用作Mercodia高量程大鼠胰岛素ELISA的三级对照。
艾美捷Mercodia大鼠宽线性胰岛素检测试剂盒:
货号:10-1145-01
物种:大鼠
样本类型:血清、EDTA血浆和细胞培养基。
样本体积:10 µL
检测范围:3 - 150 µg/L
检测下限:≤1.5 µg/L
孵育时间:2小时 + 15分钟
交叉反应性测试结果:
小鼠胰岛素:75%
大鼠C肽I:未检出
大鼠C肽II:未检出
小鼠C肽I:未检出
小鼠C肽II:未检出
大鼠前胰岛素I:8%
大鼠前胰岛素II:51%
小鼠前胰岛素I:33%
小鼠前胰岛素II:51%
人C肽:未检出
人胰岛素:167%
人前胰岛素:75%
赖脯胰岛素(HUMALOG®礼来公司):167%
Mercodia大鼠宽线性胰岛素检测试剂盒文献参考:
Ferri, G. et al. (2019). Insulin secretory granules labelled with phogrin-fluorescent proteins show alterations in size, mobility and responsiveness to glucose stimulation in living β-cells. Scientific Reports, 9(1), 2890.
Duin, S., Schütz, K., Ahlfeld, T., Lehmann, S., Lode, A., Ludwig, B., & Gelinsky, M. (2019). 3D Bioprinting of Functional Islets of Langerhans in an Alginate/Methylcellulose Hydrogel Blend. Advanced Healthcare Materials, 8(7), e1801631.
Al-Amily, I. M., Dunér, P., Groop, L., & Salehi, A. (2019). The functional impact of G protein-coupled receptor 142 (Gpr142) on pancreatic β-cell in rodent. Pflugers Archiv European Journal of Physiology, 471(4), 633–645.
Zhang, E. et al. (2019). Preserving Insulin Secretion in Diabetes by Inhibiting VDAC1 Overexpression and Surface Translocation in β Cells. Cell Metabolism, 29(1), 64-77.e6.
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BioAuxilium/艾美捷TR-FRET检测解决方案
BioAuxilium专注于开发TR-FRET技术,研发出了数百个用于细胞蛋白和生物标志物定量分析的Thunder系列TR-FRET检测试剂盒。拥有高质量、经过充分验证的TR-FRET检测试剂盒,简化实验室工作流程,加速生物医学研究。
BioAuxilium核心技术与产品:
BioAuxilium的核心技术是其专有的THUNDER TR-FRET平台,该技术以其简单、快速、灵敏和可靠的特点,为细胞蛋白和生物标志物的定量分析提供了全新的解决方案。与传统的ELISA方法相比,THUNDER TR-FRET技术具有均相、低样本量、一步法、更宽动态范围等显著优势,非常适合高通量药物筛选和生命科学研究。
BioAuxilium目前拥有数百种经过充分验证的TR-FRET检测试剂盒,涵盖细胞信号通路、细胞因子、磷酸化蛋白、总蛋白以及GPCR相关第二信使cAMP检测等多个领域。这些试剂盒不仅简化了实验室工作流程,还显著提高了研究效率,加速了生物医学研究的进程。
艾美捷BioAuxilium热门研究产品:
THUNDER Phospho-STAT3(Y705)TR-FRETCellSianalingAssayKit KIT-HP-STAT3P
THUNDER Phospho-SLP-76(S376)TR-FRETCellSignalingAssaykit KIT-SLP76P
THUNDER Phospho-SLP-76(S376)+TotalSLP-76TR-FRETCellSignalingAssayKit KIT-SLP76PT
THUNDER TotalSLP-76TR-FRETCellSignalingAssayKit KIT-SLP76T
THUNDER TotaSLP-76TR-FRETCelsignalingAssykit KIT-SLP76T
THUNDER HumanlFNyTR-FRETBiomarkerAssaykit KIT-IFNG
THUNDER HumanlFNyTR-FRETBiomarkerAssayKit KIT-IFNG
THUNDER TotalGAPDHTR-FRETCelsignalingAssaykit KIT-GAPDH
THUNDERTotalGAPDHTR-FRETCelsgnalingAsykit KIT-GAPDH
THUNDER Phospho-c-Met(Y1234/Y1235)TR-FRETCellSignalingAssayKit KIT-METP
THUNDER Phospho c-MetY1234N1235)TR-FRETCelsignalingAssykit KIT-METP
THUNDER Totalc-MetTR-FRETCellSignalingAssaykit KIT-METT
THUNDER Totalc-MetTR-FRETCellignalingAssaykit KIT-METT
THUNDER Phospho-c-Met(Y1234/Y1235)+Totalc-MetTR-FRETCellSignalingAssayKit KIT-METPT
THUNDER Phospho-NF-kB(S536)TR-FRETCellSignalingAssayKit KIT-NFKBP
THUNDER TotalNF-KBTR-FREICellSlghallngASsa KIT-NFKBT
THUNDER Phospho-NF-kB(S536)+TotalNF-kBTR-FRETCellSignalingAssayKit KIT-NFKBPT
THUNDER Phospho-p53(S15)TR-FRETCellSignalingAssaykit KIT-P53P
THUNDER Totalp53TR-FRETCellignalingAssaykit KIT-P53T
THUNDER Phospho-p53(S15)+Totalp53TR-FRETCellSignalingAssayKit KIT-P53PT
THUNDER cAMPTR-FRETAssayKit KIT-CAMP
艾美捷科技是BioAuxilium的中国区域合作伙伴,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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BioAuxilium/THUNDER磷酸-4EBP1(T37/T46)TR-FRET细胞信号检测试剂盒方案
夹心法TR-FRET免疫检测法,用于细胞裂解液中磷酸化4EBP1(T37/T46)的半定量检测。完整的检测验证信息可在技术资料表中查阅。详细的检测操作步骤描述于通用用户手册中。检测性能的对比分析展示在更新后的应用说明书中。
艾美捷BioAuxilium-THUNDER磷酸-4EBP1(T37/T46)TR-FRET细胞信号检测试剂盒组分:
Eu-磷酸化4EBP1抗体(25 µL)
Acc-磷酸化4EBP1抗体(100 µL)
4EBP1对照裂解液(200 µL)
5倍浓缩裂解缓冲液2(5 mL)
10倍浓缩TR-FRET检测缓冲液(250 µL)
100倍浓缩磷酸酶抑制剂混合液(250 µL)
BioAuxilium-THUNDER磷酸-4EBP1(T37/T46)TR-FRET细胞信号检测试剂盒(#KIT-4EBP1P-500)配套试剂:
THUNDER™ 4EBP1对照裂解液
THUNDER™裂解缓冲液2(5倍浓缩)
THUNDER™ TR-FRET检测缓冲液(10倍浓缩)
THUNDER™磷酸酶抑制剂混合液(100倍浓缩)
THUNDER磷酸-4EBP1(T37/T46)TR-FRET细胞信号检测试剂盒检测原理:
磷酸化4EBP1(T37/T46)检测试剂盒是一种均相时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)夹心免疫检测法(见图1)。THUNDER™细胞信号传导检测工作流程包含3个步骤(见图2)。在细胞处理后,首先使用试剂盒中提供的特定裂解缓冲液将细胞裂解。然后,通过一对荧光标记的抗体以简单的“加入-孵育-测量”格式(单步试剂添加;无需洗涤步骤)检测细胞裂解液中的磷酸化4EBP1(T37/T46)。其中一个抗体标记有供体荧光团(铕螯合物;Eu-Ab1),另一个抗体标记有远红接受体荧光团(FRAb2)。两种标记抗体结合到目标蛋白上不同的表位,使两种染料靠近。使用闪光灯(320或340 nm)或激光(337 nm)激发供体铕螯合物分子时,会触发从供体到接受体分子的FRET,接受体分子随后在665 nm处发射TR-FRET信号。铕螯合物的剩余能量在615 nm处产生光。665 nm处的信号与细胞裂解液中磷酸化4EBP1(T37/T46)的浓度成正比。数据可以表示为665 nm处的信号,或665 nm/615 nm的比值。
图1:TR-FRET细胞信号测定原理的示意图。
图2:使用2板(转移)协议的检测工作流程。
试剂盒性能对比——与其他TR-FRET技术的比较
作为检测验证的一部分,THUNDER™磷酸化4EBP1(T37/T46)检测试剂盒与一种竞争性TR-FRET检测技术(公司A)进行了性能对比。具体而言,两种不同的检测方法在检测A431细胞经PP242处理后基础磷酸化4EBP1(T37/T46)抑制的能力上进行了并排比较,实验采用双板检测协议。所有试剂均按照各自制造商的推荐进行准备。细胞处理后,使用相应试剂盒的1X补充裂解缓冲液将细胞裂解。随后,裂解液在同一块384孔检测板上按照相应试剂盒的标准协议进行测试。在孵育4小时后,使用EnVision®(闪光灯激发)读取结果。数据显示,两种TR-FRET检测方法表现出相当的灵敏度(IC50值)和信背比(S/B)。
艾美捷科技是BioAuxilium的中国区域合作伙伴,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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BioAuxilium/THUNDER磷酸化AKT泛抗体(T308)TR-FRET细胞信号检测试剂盒验证数据
夹心TR-FRET免疫测定法用于半定量检测细胞裂解物中的磷酸化AKT 1/2/3(T308)。完整的分析验证可以在技术数据表中找到。详细的检测方案在通用用户手册中进行了描述。
艾美捷BioAuxilium-THUNDER磷酸化AKT泛抗体(T308)TR-FRET细胞信号检测试剂盒组分:
Eu-磷酸化AKT T308抗体(5 µL)
Acc-磷酸化AKT T308抗体(20 µL)
AKT对照裂解液(100 µL)
5倍浓缩裂解缓冲液1(1 mL)
10倍浓缩TR-FRET检测缓冲液(50 µL)
100倍浓缩磷酸酶抑制剂混合液(50 µL)
THUNDER磷酸化AKT泛抗体(T308)TR-FRET细胞信号检测试剂盒(#KIT-AKTT308P-100)配套试剂:
THUNDER™ AKT泛抗体对照裂解液
THUNDER™裂解缓冲液1(5倍浓缩)
THUNDER™ TR-FRET检测缓冲液(10倍浓缩)
THUNDER磷酸化AKT泛抗体(T308)TR-FRET细胞信号检测试剂盒检测原理:
磷酸化AKT泛抗体(T308)检测试剂盒是一种均相时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)夹心免疫检测法。THUNDER™细胞信号检测试验流程包括3个步骤。在细胞处理后,首先使用试剂盒中提供的特定裂解缓冲液将细胞裂解。然后,通过一对荧光标记的抗体以简单的“加入-孵育-测量”格式(单步试剂添加;无需洗涤步骤)检测细胞裂解液中的磷酸化AKT泛抗体(T308)。其中一个抗体标记有供体荧光团(铕螯合物;Eu-Ab1),另一个抗体标记有远红接受体荧光团(FRAb2)。两种标记抗体结合到目标蛋白上不同的表位,使两种染料靠近。使用闪光灯(320或340 nm)或激光(337 nm)激发供体铕螯合物分子时,会触发从供体到接受体分子的FRET,接受体分子随后在665 nm处发射TR-FRET信号。铕螯合物的剩余能量在615 nm处产生光。665 nm处的信号与细胞裂解液中磷酸化AKT泛抗体(T308)的浓度成正比。数据可以表示为665 nm处的信号,或665 nm/615 nm的比值。
验证数据:
该检测试剂盒已通过双板检测协议,验证用于NIH3T3细胞裂解液中磷酸化AKT泛抗体(T308)的相对定量检测。
采用贴壁培养方式,细胞在96孔细胞培养板中培养48小时(培养基为DMEM + 10% CBS)。
细胞处理后,移除培养基,使用1X裂解缓冲液1(50 µL)裂解细胞,该缓冲液中添加了磷酸酶抑制剂(1 mM氟化钠和2 mM焦磷酸钠)。
在室温下于振荡器(400 rpm)上孵育30分钟后,将裂解液(15 µL)转移至384孔检测板中,并加入标记抗体Eu-Ab1和FR-Ab2(5 µL),用于检测磷酸化AKT泛抗体(T308)。
在室温下孵育4小时后,使用EnVision®仪器(闪光灯激发)记录665 nm和615 nm处的TR-FRET信号。
艾美捷科技是BioAuxilium的中国区域合作伙伴,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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BioAuxilium/THUNDER磷酸化BAD(S112)TR-FRET细胞信号检测试剂盒,高通量筛选稳健检测
三明治TR-FRET免疫测定法用于半定量检测细胞裂解物中的磷酸BAD(S112)。完整的分析验证可以在技术数据表中找到。详细的检测方案在通用用户手册中进行了描述。
艾美捷BioAuxilium-THUNDER磷酸化BAD(S112)TR-FRET细胞信号检测试剂盒组分:
Eu-磷酸化BAD(5 µL)
Acc-磷酸化BAD(20 µL)
BAD对照裂解液(100 µL)
5倍浓缩裂解缓冲液1(1 mL)
10倍浓缩TR-FRET检测缓冲液(50 µL)
100倍浓缩磷酸酶抑制剂混合液(50 µL)
THUNDER磷酸化BAD(S112)TR-FRET细胞信号检测试剂盒(#KIT-BADP-100)配套试剂:
THUNDER™ BAD对照裂解液
THUNDER™裂解缓冲液1(5倍浓缩)
THUNDER™ TR-FRET检测缓冲液(10倍浓缩)
THUNDER™磷酸酶抑制剂混合液(100倍浓缩)
THUNDER磷酸化BAD(S112)TR-FRET细胞信号检测试剂盒检测原理:
磷酸化BAD(S112)检测试剂盒是一种均相时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)夹心免疫检测法。THUNDER™细胞信号检测试验流程包含3个步骤。在细胞处理后,首先使用试剂盒中提供的特定裂解缓冲液将细胞裂解。然后,通过一对荧光标记的抗体以简单的“加入-孵育-测量”格式(单步试剂添加;无需洗涤步骤)检测细胞裂解液中的磷酸化BAD(S112)。其中一个抗体标记有供体荧光团(铕螯合物;Eu-Ab1),另一个抗体标记有远红接受体荧光团(FRAb2)。两种标记抗体结合到目标蛋白上不同的表位,使两种染料靠近。使用闪光灯(320或340 nm)或激光(337 nm)激发供体铕螯合物分子时,会触发从供体到接受体分子的FRET,接受体分子随后在665 nm处发射TR-FRET信号。铕螯合物的剩余能量在615 nm处产生光。665 nm处的信号与细胞裂解液中磷酸化BAD(S112)的浓度成正比。数据可以表示为665 nm处的信号,或665 nm/615 nm的比值。
验证数据:
该检测试剂盒已通过双板检测协议,验证用于MCF7和HEK293细胞裂解液中磷酸化BAD(S112)的相对定量检测。
采用贴壁培养方式,细胞在96孔细胞培养板中过夜培养(培养基为EMEM + 10% FBS)。
细胞处理后,移除培养基,使用1X裂解缓冲液1(50 µL)裂解细胞,该缓冲液中添加了磷酸酶抑制剂(1 mM氟化钠和2 mM焦磷酸钠)。
在室温下于振荡器(400 rpm)上孵育30分钟后,将裂解液(15 µL)转移至384孔检测板中,并加入标记抗体Eu-Ab1和FR-Ab2(5 µL),用于检测磷酸化BAD(S112)。
在室温下孵育4小时后,使用EnVision®仪器(闪光灯激发)记录665 nm和615 nm处的TR-FRET信号。
上左:MCF7细胞(每孔50,000个细胞;设三份重复)与PMA的系列稀释液在37°C下孵育30分钟。数据显示,PMA处理MCF7细胞可刺激BAD在S112位点的磷酸化。
上右:MCF7细胞(每孔50,000个细胞;设三份重复)与抑制剂UCN-01的系列稀释液在37°C下孵育30分钟,随后再用5 µM PMA在37°C下刺激30分钟。数据显示,UCN-01处理MCF7细胞可抑制PMA诱导的BAD在S112位点的磷酸化。
下左:MCF7细胞(每孔50,000个细胞)在37°C下分别用不含或含有5 µM UCN-01的溶液孵育30分钟,随后再用5 µM PMA在37°C下处理30分钟。通过总共48个孔的每个处理组来确定Z'因子值。Z'因子值为0.76,表明该检测方法稳健且适用于高通量筛选(HTS)。
下右:质量控制:磷酸化BAD(S112)检测试剂盒常规测试PMA处理的HEK293细胞裂解液。HEK293细胞在T175培养瓶中培养至90%汇合,随后用1 µM PMA在37°C下刺激30分钟。细胞裂解后,使用4 mL 1X裂解缓冲液1进行裂解,裂解液用1X裂解缓冲液1进行系列稀释,并进行三份重复测试。数据显示,裂解液稀释度与TR-FRET比值呈线性关系。
艾美捷科技是BioAuxilium的中国区域合作伙伴,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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