岩藻糖Fucose--从结构到功能的多面性解析

来宝网 2025/1/21点击104次

岩藻糖（fucose）是六碳糖的一种，又称6- 脱氧- L- 半乳糖，并可以看做是一种甲基戊糖。自然界存在的岩藻糖绝大多数为L- 岩藻糖，D构型的岩藻糖仅作为稀有糖，发现于一些糖苷类化合物中。

L- 岩藻糖较大量地存在于海藻及树胶中，也发现于某些细菌的多糖中。岩藻糖作为糖蛋白中糖链的组成部分，广泛存在于各类细胞表面的质膜上。岩藻糖比一般六碳糖在第六碳原子上少一个羟基，所以岩藻糖比其他单糖亲水性弱，而疏水性强一些。在某些血型物质分子中的岩藻糖是一定的血型的标记。

通常从海藻中提取岩藻糖，先用酸处理，中和后，以苯腙形式析出，除去苯肼，可得α-L- 岩藻糖结晶，熔点145℃。

艾美捷岩藻糖Fucose：

货号：AS07-268

免疫原：与N-糖链以α1,3键结合的核心岩藻糖残基

宿主：兔

克隆性：多克隆

纯度：免疫原亲和纯化的血清，溶于pH 7.4的PBS中

形式：冻干粉

数量：50 µg

复溶方法：复溶时加入50 µl无菌水

储存条件：冻干粉/复溶后于-20°C保存；复溶后请分装，避免反复冻融。打开管子前请短暂离心，以避免因材料粘附在盖子或管壁上而导致的损失。

额外信息：α(1,3)岩藻糖不仅存在于植物中，也存在于某些无脊椎动物（如线虫、蜜蜂等）中。然而，与这些生物的糖蛋白发生的交叉反应比在植物中观察到的要弱。这种糖残基在哺乳动物的内源性糖蛋白中不存在。

推荐稀释度：0.5 µg/ml（ELISA）、1:40（免疫层析）、1 µg/10 ml（Western Blot）

预期/表观分子量：对于各种糖蛋白，分子量为10 - 100 kDa

已确认的反应性：高等植物、三角褐藻（Phaeodactylum tricornutum，一种硅藻）

预测的反应性：高等植物、三角褐藻

未反应的生物：目前尚未发现与预测反应性不符的已确认例外情况

额外信息：对照品：

蜂毒磷脂酶A2（PLA2），仅含有α1.3岩藻糖，Sigma产品编号P9279

Ⅱ型辣根过氧化物酶，含有β1.2木糖和α1.3岩藻糖，Sigma产品编号P8250

该抗体不识别α1,6岩藻糖

应用实例：

左图：拟南芥野生型的总细胞提取物（1）和岩藻糖基转移酶缺陷的不同突变体的细胞提取物（2-5）（数据不是已出版）。一抗的使用浓度为10µg/10ml孵育缓冲液。使用增强化学发光（ECL）进行检测。

右图：抗岩藻糖和抗木糖抗体与各种对照的斑点印迹反应：Avidin（Fuc+/Xyl+）、胎球蛋白（Fuc-/Xyl-）、PLA2（Fuc+/Xyl-）和Mur1-2（Fuc-/Xyl+）。将2µl每种提取物点在硝化纤维膜上，放置在2个WHATMAN过滤器（一个浸在TBS-T中）的顶部在室温下干燥1.5小时。用TBS-T中的2%低脂奶粉（0.1%吐温20）封闭膜30分钟，并用抗岩藻糖（1）（AS072681:1000）或抗木糖（2）（AS07 2671:1000）30分钟，然后用二抗兔（1:1000）抗体（ALP 结合的推荐二抗AS09 607）。在反应展开之前，用TBS-T洗涤膜3 x 10分钟，使用碱性磷酸酶试剂BCIP®/NTB预混溶液（Sigma，编号B6404）。

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BiP|管腔结合蛋白(兔抗体)：在植物内质网应激与蛋白质折叠中的功能研究

BiP2（结合免疫球蛋白）定位于内质网内腔（ER），在ER内的蛋白质组装中起作用。BiP蛋白在所有生长条件下都很丰富，但在导致未折叠多肽在内质网（ER）中积累的条件下，其合成会增加。

艾美捷BiP|管腔结合蛋白(兔抗体)：

货号：AS09-481

免疫原：与KLH偶联的合成肽，源自拟南芥BiP蛋白：BiP1（At5g28540，Q9LKR3）、BiP2（At5g42020，F4K007）、BiP3（At1g09080，Q8H1B3）

宿主：兔

克隆性：多克隆

纯度：免疫原亲和纯化的血清，溶于pH 7.4的PBS中

形式：冻干粉

数量：50 µg

复溶方法：复溶时加入50 µl无菌水

储存条件：冻干粉/复溶后于-20°C保存；复溶后请分装，避免反复冻融。打开管子前请短暂离心，以避免因材料粘附在盖子或管壁上而导致的损失。

推荐稀释度：1:8000（ELISA）、1:600（免疫荧光）、1:2000（Western Blot）

预期/表观分子量：73.5 | 80 kDa

已确认的反应性：腰果（Anacardium occidentale）、拟南芥、甘蓝型油菜、Chara australis R.Br、莱茵衣藻、黄瓜、芒果、致病疫霉、烟草、烟草、萝卜苜蓿L.Tokinashi daikon、油橄榄、水稻、云杉、开心果属、Physcomitrium patens、Schinus茉莉、菠菜、番茄、马铃薯、小麦、玉米

预测的反应性：高山阿拉伯、风疹辣椒、一年生辣椒、柑橘、香橙、巨桉、甘氨酸max、大麦、板蓝根、桃、小麦、矮牵牛、云杉、杨毛腕菌、蓖麻、葡萄

不反应的物种：塔氏藻、裂殖酵母

额外信息：蛋白或膜样本在上样前应在70°C处理10分钟。该抗体尚未在免疫沉淀（IP）中使用。

应用实例：

图：从拟南芥（1）、大麦（2）、豌豆（3）、玉米（4）、黄瓜（5）、土豆（6）、菠菜（7）、番茄（8）、泥炭藓（9）、莱茵衣藻（10）中提取的5 µg总蛋白，使用Agrisera PEB提取缓冲液（AS08 300）分离，并在4-12%的SDS-PAGE上电泳，然后转印至PVDF膜1小时。转印后，膜立即用5%脱脂奶粉在TBS-T中封闭1小时，室温下搅拌。膜在1:10,000稀释的一抗中孵育1小时，室温下搅拌。弃去一抗溶液，膜短暂冲洗两次，然后在室温下用TBS-T搅拌洗涤15分钟，再洗涤3次，每次5分钟。膜在二抗（抗兔IgG辣根过氧化物酶偶联抗体，Agrisera AS09 602，稀释至1:50,000）中孵育1小时，室温下搅拌。膜按上述方法洗涤，并用极低飞克级ECL检测试剂显色5分钟，按照制造商说明操作。曝光时间为5秒。

BiP|管腔结合蛋白(兔抗体)文献参考：
Zhou et al. (2024). Antagonistic systemin receptors integrate the activation and attenuation of systemic wound signaling in tomato. Dev Cell. 2024 Nov 26:S1534-5807(24)00670-1. doi: 10.1016/j.devcel.2024.11.005.

Salomon et al. (2024). Betaine lipids overproduced in seed plants are excluded from plastid membranes and promote endomembrane expansion. J Exp Bot. 2024 Nov 14:erae458. doi: 10.1093/jxb/erae458.

Li et al. (2024). Membrane protein MHZ3 regulates the on-off switch of ethylene signaling in rice. Nat Commun. 2024 Jul 16;15(1):5987. doi: 10.1038/s41467-024-50290-4.

Miloro et al. (2024). Barley AGO4 proteins show overlapping functionality with distinct small RNA-binding properties in heterologous complementation. Plant Cell Rep. 2024 Mar 13;43(4):96. doi: 10.1007/s00299-024-03177-z.

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H3|组蛋白H3(兔抗体)(核标记)在细胞核功能与染色质动态中的应用

组蛋白3（H3）位于细胞核中，并入染色质。与H2A、H2B和H4一起存在于核小体中。

艾美捷H3|组蛋白H3(兔抗体)(核标记)：

货号：AS10-710

免疫原：与KLH偶联的合成肽，源自已知的H3序列，包括拟南芥H3.3（P59169，基因编号At4g40030、At4g40040、At5g10980）、H3.2（P59226，基因编号At1g09200、At3g27360、At5g10390、At5g10400、At5g65360）和H3-like 2（Q9FXI7，基因编号At1g19890）

宿主：兔

克隆性：多克隆

纯度：血清

形式：冻干粉

数量：50 µl

复溶方法：复溶时加入50 µl无菌水

储存条件：冻干粉/复溶后于-20°C保存；复溶后请分装，避免反复冻融。打开管子前请短暂离心，以避免因材料粘附在盖子或管壁上而导致的损失。

额外信息：细胞核（核质）标记物，适用于莱茵衣藻（Chlamydomonas reinhardtii）的染色质免疫沉淀-定量PCR（ChIP-qPCR）的加载对照抗体。

推荐稀释度：1:100-1:500（免疫细胞化学），ChIP-qPCR每500 µl溶液中使用2 µl抗体，1:500（免疫荧光），1:5000（Western Blot）

预期/表观分子量：15 | 17 kDa

已确认的反应性：拟南芥、灰霉病菌、甘蓝、辣椒、茜草素、衣藻嗜酸菌、莱茵衣藻、苏育黄瓜、柱状西葫芦、大麦

庸俗、人类、烟草属、蝴蝶兰、三角褐指藻、斑毛藻，盐角草属植物、番茄、茄、马铃薯、蚕豆、玉米

预测的反应性：双茎苞叶螟、甘蓝型油菜、胡枝子、苦荞麦。，甘氨酸max，微绿球藻、烟草、苹果、苜蓿、水稻、Ostreococcus sp。松、豌豆、紫球藻、甘蔗、高粱、小麦、葡萄葡萄，Volvox sp。

未反应的生物：目前尚未发现与预测反应性不符的已确认例外情况

额外信息：在免疫细胞化学（ICC）中，已观察到中期核以及有丝分裂染色体的着丝粒区域（组蛋白H3的Ser10位点发生磷酸化）有特异性荧光。

应用实例：

图：从拟南芥中提取的1.2 µg染色质富集组分（1）和4周龄拟南芥叶片中的3.75 µg总蛋白（2），在12%的SDS-PAGE上分离后，转印至Immobilon-P（Millipore，半干法）PVDF膜，转印时间为50分钟。转印后，膜立即用MTBS-T（5%脱脂奶粉）在室温下封闭30分钟，期间不断搅拌。膜在1:5000稀释的一抗中孵育1小时，室温下搅拌。弃去一抗溶液后，膜短暂冲洗两次，然后在室温下用TBS-T洗涤3次，每次3分钟，期间不断搅拌。膜在二抗（抗IgG辣根过氧化物酶偶联抗体，Agrisera，AS09 602，稀释至1:20,000）中孵育30分钟，室温下搅拌。膜按上述方法洗涤后，用ECL检测试剂显色5分钟，按照制造商的说明进行操作。曝光时间为30秒。染色质富集组分（1）中出现的双条带在肽中和实验中被用于诱导H3抗体的肽所竞争。染色质分离按照Zilberman等（2008）的描述进行，略有修改。

感谢Weronika Sura和Adam Mickiewicz大学生物技术系的Piotr A. Ziolkowski博士，波兰波兹南。

H3|组蛋白H3(兔抗体)(核标记)文献参考：
Martín-Merchán et al. (2024). Arabidopsis AGO1 N-terminal extension acts as an essential hub for PRMT5 interaction and post-translational modifications. Nucleic Acids Res . 2024 May 20:gkae387.doi: 10.1093/nar/gkae387.

Mosesso et al. (2024). Arabidopsis CaLB1 undergoes phase separation with the ESCRT protein ALIX and modulates autophagosome maturation. Nat Commun. 2024 Jun 19;15(1):5188. doi: 10.1038/s41467-024-49485-6.

Nguyen et al.(2024). The processed C-terminus of AvrRps4 effector suppresses plant immunity via targeting multiple WRKYs.J Integr Plant Biol. 2024 Jun 13.doi: 10.1111/jipb.13710.

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HY5|蛋白质长下胚轴5，调控植物光形态建成的关键因子

HY5（蛋白质长下胚轴5）是一种光调节转录因子，在光照下促进光形态形成。参与蓝光特异性途径。异二聚体。在根、下胚轴、子叶、叶、茎和花器官中表达。位于细胞核内。替代名称：蛋白质长亚丙基5，bZIP转录因子56，AtbZIP56。

艾美捷HY5|蛋白质长下胚轴5：

货号：AS12-1867

免疫原：与KLH偶联的肽段，源自拟南芥HY5蛋白序列，UniProt编号：O24646，TAIR编号：AT5G11260。所选肽段在HY5蛋白序列中不保守。

宿主：兔

克隆性：多克隆

纯度：免疫原亲和纯化的血清，溶于pH 7.4的PBS中

形式：冻干粉

数量：50 µg

复溶方法：复溶时加入50 µl无菌水

储存条件：冻干粉/复溶后于-20°C保存；复溶后请分装，避免反复冻融。打开管子前请短暂离心，以避免因材料粘附在盖子或管壁上而导致的损失。

推荐稀释度：1:500至1:1000（Western Blot）

预期/表观分子量：18.5 kDa

已确认的反应性：拟南芥

预测的反应性：北京白菜

不反应的物种：柑橘、大麦、水稻、豌豆、杨树、番茄、小麦、玉米

额外信息：

该抗体可在本氏烟（Nicotiana benthamiana）中检测重组HY5蛋白。

在使用内源性提取物时，需要使用含有6-8 M尿素的提取和加载缓冲液，以便通过该抗体进行检测，或使用TCA/乙酸乙酯蛋白提取法，如Mechin等（2007）所述。

样品需在微弱绿光下采集，以避免在采集和提取过程中发生降解。

应用实例：

图：从7日龄拟南芥幼苗中新鲜提取的10 µg总蛋白，使用三氯乙酸和乙酸乙酯（Mechin等，2007）进行提取，并用LDS（十二烷基硫酸锂）样品缓冲液在70°C下变性10分钟。蛋白在12%的SDS-PAGE上分离后，通过半干法转印至PVDF膜（孔径0.2 µm），转印时间为7分钟。膜用5%脱脂奶粉在4°C下封闭过夜（ON），期间不断搅拌。膜在1:1000稀释的一抗中孵育2小时（室温，RT），期间不断搅拌，TBS-T缓冲液中进行。弃去一抗溶液后，膜短暂冲洗，然后在室温下用TBS-T洗涤三次，每次15分钟，期间不断搅拌。膜在Agrisera匹配的二抗（抗兔IgG辣根过氧化物酶偶联抗体，AS09 602，稀释至1:10,000）中孵育1小时（室温，RT），期间不断搅拌。膜按上述方法洗涤后，用化学发光检测试剂显色2分钟。曝光时间为100秒。

幼苗在黑暗中生长4天，随后在连续光照下（~120 µE）生长3天。幼苗整体研磨以提取蛋白。

感谢澳大利亚国立大学（ANU）科学学院生物研究学院Pogson实验室的侯鑫提供。

HY5|蛋白质长下胚轴5文献参考：
Yao et. al. 2024).Cooperative transcriptional regulation by ATAF1 and HY5 promotes light-induced cotyledon opening in Arabidopsis thaliana. Sci Signal. 2024 Jan 2;17(817):eadf7318.

Liu et al. (2024). Phosphorylation of Arabidopsis UVR8 photoreceptor modulates protein interactions and responses to UV-B radiation. Nat Commun. 2024 Feb 9;15(1):1221.doi: 10.1038/s41467-024-45575-7.

Cazzonelli et al. (2019). A cis-carotene derived apocarotenoid regulates etioplast and chloroplast development. https://doi.org/10.1101/528331

Lee et al. (2017). The F-box protein FKF1 inhibits dimerization of COP1 in the control of photoperiodic flowering. Nat Commun. 2017 Dec 22;8(1):2259. doi: 10.1038/s41467-017-02476-2.

Sinclair et al. (2017) Etiolated Seedling Development Requires Repression of Photomorphogenesis by a Small Cell-Wall-Derived Dark Signal. Curr Biol. 2017 Nov 20;27(22):3403-3418.e7. doi: 10.1016/j.cub.2017.09.063.

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PSII的PsbA|D1蛋白,C端(兔抗体)(类囊体膜标记物)在光合作用研究中的应用

psbA基因已从许多植物、绿藻和蓝藻中克隆出来。psbA基因组位于叶绿体基因组中，编码D1蛋白，D1蛋白是光系统II的核心成分。在所有含氧光生物中，PsbA/D1在光照下快速循环。使用Global PsbA抗体跟踪PsbA池可以显示光系统II在各种样本中的功能含量。别名：32kDa类囊体膜蛋白，光系统II蛋白D1

艾美捷PSII的PsbA|D1蛋白,C端(兔抗体)(类囊体膜标记物)：

货号：AS05-084

免疫原：与KLH偶联的合成肽，源自已知的植物、藻类和蓝藻的PsbA序列，包括拟南芥（UniProt：A4QJR4，TAIR：AtCg00020）、水稻（P0C434）、白杨（Q14FH6）、泥炭藓（Q6YXN7）、莱茵衣藻（P07753）、蓝藻（Synechocystis sp.，P14660）以及其他许多物种。

宿主：兔

克隆性：多克隆

纯度：血清

形式：冻干粉

数量：50 µl

复溶方法：复溶时加入50 µl无菌水

储存条件：冻干粉/复溶后于-20°C保存；复溶后请分装，避免反复冻融。打开管子前请短暂离心，以避免因材料粘附在盖子或管壁上而导致的损失。

额外信息：

由于PsbA（D1）蛋白的生物学特性，样本中可能会出现多种降解产物，并在使用抗PsbA抗体时观察到这些产物，包括表观分子量为24 kDa和16 kDa的产物。D1的降解是一个复杂的事件集合，观察到的产物可能受到提取程序和采样前细胞生理状态的影响。此外，D1与细胞色素b559之间可能发生交联，导致蛋白在凝胶中位置上移。在蓝藻（PCC7942）中，通过用PsbA自由肽预孵育抗体，竞争出三条不同的条带，表明所有条带均为PsbA及其前体或降解产物。类似的竞争实验也在菠菜和莱茵衣藻中进行，确认了PsbA条带的身份。

抗PsbA抗体不会检测到D2蛋白，因为用于生成PsbA抗体的肽与D2序列没有同源性。

如需含有ProClin的产品，可按要求提供。

推荐稀释度：1:500（免疫荧光），1:200（免疫组化），1:10,000（Western Blot）

预期/表观分子量：38 | 28-30 kDa

额外信息：

该抗体适用于检测24 kDa或10 kDa C末端片段，具体取决于给定处理条件下的生成产物。在我们的分析中，根据处理和分离程序的不同，我们观察到了来自不同样本的大约24 kDa和大约10 kDa的片段。

与鸡抗PsbA抗体（AS01 016）相比，兔抗PsbA抗体可以检测到PsbA蛋白的多个条带，例如前体蛋白和成熟蛋白。

该抗体可以在高分辨率凝胶上检测到D1的磷酸化形式作为主条带的替代条带。

该抗体可以结合交联蛋白：D1/D2、D1/细胞色素b559、D1/CP43。

该肽在蓝藻D1:1和D1:2中是保守的。

应用实例：

图：从以下来源提取的总蛋白2 µg：（1）拟南芥叶片，使用蛋白提取缓冲液PEB（AS08 300）提取；（2）大麦叶片，使用PEB提取；（3）莱茵衣藻全细胞，使用PEB提取；（4）蓝藻Synechococcus sp. 7942全细胞，使用PEB提取；（5）念珠藻全细胞，使用PEB提取。这些蛋白在4-12% NuPage（Invitrogen）LDS-PAGE上分离后，转印至PVDF膜，转印时间为1小时。转印后，膜立即用2% ECL Advance封闭液（GE Healthcare）在20 mM Tris、137 mM氯化钠（pH 7.6）和0.1%（体积比）Tween-20（TBS-T）中封闭1小时，室温下搅拌。膜在1:50,000稀释的一抗中孵育1小时，室温下搅拌。弃去一抗溶液后，膜短暂冲洗两次，然后在室温下用TBS-T洗涤一次15分钟，再洗涤三次，每次5分钟，期间不断搅拌。膜在二抗（抗兔IgG辣根过氧化物酶偶联抗体，推荐的二抗为AS09 602，稀释至1:50,000）中孵育1小时，室温下搅拌，二抗溶液中含有2%的封闭液。膜按上述方法洗涤后，用化学发光检测试剂显色5分钟，按照制造商的说明进行操作。膜的图像使用CCD成像仪（FluorSMax，Bio-Rad）和Quantity One软件（Bio-Rad）获取。

PSII的PsbA|D1蛋白,C端(兔抗体)(类囊体膜标记物)文献参考：
Pica et al. (2024). Functional ecological traits in young and adult thalli of canopy-forming brown macroalga Gongolaria barbata (Phaeophyta) from a transitional water system. PeerJ. 2024 Sep 12:12:e17959. doi: 10.7717/peerj.17959.

Salazar et al. (2024). SOS1 tonoplast neo-localization and the RGG protein SALTY are important in the extreme salinity tolerance of Salicornia bigelovii. Nat Commun. 2024 May 20;15(1):4279.doi: 10.1038/s41467-024-48595-5.

Phukan et al. (2024). Externally supplied ascorbic acid moderates detrimental effects of UV-C exposure in cyanobacteria. Photochem Photobiol Sci. 2024 Jul 12. doi: 10.1007/s43630-024-00612-8.

Zhao et al. (2024). Psb28 protein is indispensable for stable accumulation of PSII core complexes in Arabidopsis.Plant J. 2024 May 26. doi: 10.1111/tpj.16844.

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RbcL|Rubisco大亚基,I型(兔)：助力植物与藻类光合作用定量分析

这种抗体特别适用于植物和藻类样本中Rubisco的定量分析。

Rubisco（核糖酸-1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶）催化光合生物中二氧化碳固定的限速步骤。从紫色细菌到开花植物，Rubisco的同源性已被证实，并且它由两种蛋白亚基组成，每种亚基各有8个拷贝。在植物和绿藻中，大亚基（约55 kDa）由叶绿体的rbcL基因编码，小亚基（15 kDa）则由核基因家族rbcS编码。

艾美捷RbcL|Rubisco大亚基,I型(兔)：

货号：AS03-037

免疫原：与KLH偶联的合成肽，该肽在所有已知植物、藻类和蓝藻的RbcL蛋白序列（I型L8S8和II型L2）中高度保守，包括拟南芥（O03042）、大麦（P05698）、水稻（P0C510）、莱茵衣藻（P00877）和蓝藻Synechococcus PCC 7920（A5CKC5）。

宿主：兔

克隆性：多克隆

纯度：血清

形式：冻干粉

数量：50 µl

复溶方法：复溶时加入50 µl无菌水

储存条件：冻干粉/复溶后于-20°C保存；复溶后请分装，避免反复冻融。打开管子前请短暂离心，以避免因材料粘附在盖子或管壁上而导致的损失。

额外信息：

抗RbcL抗体可用作细胞器[类囊体基质标记物]（蓝藻中的细胞质）标记，并可检测到31.25飞摩尔的RbcL蛋白。由于该抗体能够检测I型和II型RbcL蛋白，因此适用于研究来自甲藻、囊藻和黄藻门（硅藻、丝藻、褐藻）以及高等植物的样本。该抗体与Agrisera的Rubisco蛋白标准品配合使用，非常适合用于植物和藻类样本中Rubisco的定量分析。

例如，RbcL、PsbA和PsaC抗体的Western Blot同时检测。

该抗体不适用于免疫沉淀。

如需含有ProClin的产品，可按要求提供。

推荐稀释度：

免疫荧光/共聚焦显微镜（IF）：1:1000

免疫组化（IG）：1:250（详见Prins等，2008）

详细协议可应要求提供

组织印迹（TP）：1:800

Western Blot（WB）：1:5000 - 10,000

预期/表观分子量：

拟南芥（Arabidopsis thaliana）：52.7 kDa

蓝藻：52.5 kDa

莱茵衣藻（Chlamydomonas reinhardtii）：52.3 kDa

额外信息：

该抗体曾用于以下研究：

按照Schmid（2003）和Wordemann等（1986）的方法对硅藻进行免疫细胞化学染色（J Phycol 39: 139-153；J Cell Biol 102: 1688-1698）。

Dreier等（2012）的免疫荧光研究（FEMS Microbial Ecol., 2012年3月）。

Ma等（2009）的学生课程中的Western Blot和组织印迹实验。

作为加载对照用于Sun等（2020）的研究。

应用实例：

图：从菠菜（Spinacia oleracea，1）、蓝藻Synechococcus PCC 7942（2）、蓝藻Cyanophora paradoxa（3）、异弯藻Heterosigma akashiwo（4）、硅藻Thalassiosira pseudonana（5）、眼虫Euglena gracilis（6）、微型绿藻Micromonas pusilla（7）、莱茵衣藻Chlamydomonas reinhardtii（8）、紫菜Porphyra sp.（9）、夜光藻Gonyaulax polyedra（10）和颗石藻Emiliania huxleyi（11）中提取的每泳道0.25 µg叶绿素a，使用PEB提取缓冲液（AS08 300）提取后，在4-12% NuPage（Invitrogen）LDS-PAGE上分离，并转印至硝酸纤维素膜，转印时间为1小时。膜用2%脱脂奶粉在TBS-T（含0.1% Tween 20）中封闭1小时，随后用抗RbcL抗体（AS03 037，稀释度1:50,000，孵育1小时）和二抗（抗兔IgG辣根过氧化物酶偶联抗体，稀释度1:20,000，孵育1小时，推荐二抗AS09 602）进行孵育，抗体孵育后用TBS-T洗涤。所有步骤均在室温下进行，期间不断搅拌。膜用ECL Advance检测试剂显色5分钟，按照制造商（GE Healthcare）的说明进行操作。膜的图像使用CCD成像仪（FluorSMax，Bio-Rad）和Quantity One软件（Bio-Rad）获取。

RbcL|Rubisco大亚基,I型(兔)文献参考：
Zhou et al. (2024). Antagonistic systemin receptors integrate the activation and attenuation of systemic wound signaling in tomato. Dev Cell. 2024 Nov 26:S1534-5807(24)00670-1. doi: 10.1016/j.devcel.2024.11.005.

Pica et al. (2024). Functional ecological traits in young and adult thalli of canopy-forming brown macroalga Gongolaria barbata (Phaeophyta) from a transitional water system. PeerJ. 2024 Sep 12:12:e17959. doi: 10.7717/peerj.17959.

Phukan et al. (2024). Externally supplied ascorbic acid moderates detrimental effects of UV-C exposure in cyanobacteria. Photochem Photobiol Sci. 2024 Jul 12. doi: 10.1007/s43630-024-00612-8.

Zhao et al. (2024). Psb28 protein is indispensable for stable accumulation of PSII core complexes in Arabidopsis.Plant J. 2024 May 26. doi: 10.1111/tpj.16844.

https://www.amyjet.com/products/AS03-037.shtml

Quantabio-提取用于PCR的DNA制剂，快速简便地提取PCR基因组DNA

Quantabio-Extracta DNA Prep for PCR是一种双组分试剂盒，用于从各种组织中快速提取PCR就绪的基因组DNA。样品处理时间不到30分钟，动手时间和技术技能最少。提取的基因组DNA适用于敏感的下游PCR应用，包括终点PCR、高分辨率熔融分析（HRM）和定量实时PCR（qPCR），无需任何额外的清理。此外，提取的DNA可以是用于多重PCR应用，如转基因或敲除分析。组织提取可以在试管、平板或深井块中进行，以适应液体处理工作站的工作流程和自动化。

艾美捷Quantabio-提取用于PCR的DNA制剂（#95091-025）组成：

提取试剂（1 x 25 mL或2 x 125 mL）

稳定缓冲液（1 x 25 mL或2 x 125 mL）

储存与操作：在室温下储存组件。

Quantabio-提取用于PCR的DNA制剂的功能和优点：

1、简单的基于试剂的系统需要最少的技术技能

2、孵育步骤可以在96孔PCR板或试管中使用标准DNA热循环仪进行

3、与各种临床标本、植物和动物组织以及环境样本兼容

4、可选的稳定缓冲液允许延长提取的DNA模板的存储时间

Extracta DNA Prep for PCR适用于分子生物学应用。本品不用于诊断、预防或治疗疾病。

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