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Abbexa无核酸酶水在分子生物学实验中的实用分析
在分子生物学实验中,无核酸酶水(Nuclease-Free Water)是一种经过特殊处理的水,确保其中不含有任何核酸酶(如DNA酶和RNA酶),从而避免对实验样品的核酸造成降解。
Abbexa无核酸酶水是一种超纯产品。基于反渗透技术,无核酸酶水通过多次去除杂质(包括重金属盐、细菌、有机物和内毒素)来生产,使用交换柱和过滤膜进行处理。该产品适用于分子生物学实验、细胞培养、药物研究和仪器分析等领域。
艾美捷无核酸酶水:
货号:abx098144
靶标:无核酸酶水
纯化:无菌。未经过DEPC处理。
储存:在室温下可保存长达两年。
缓冲液:不适用。
注意事项:本品仅限研究使用。
核酸提取与纯化
在核酸提取与纯化过程中,无核酸酶水是必不可少的溶剂。核酸提取试剂盒通常要求使用无核酸酶水来溶解和稀释核酸样品。如果使用普通水,其中可能存在的核酸酶会降解提取出的DNA或RNA,导致样品的损失和实验结果的不准确。使用无核酸酶水可以确保核酸的完整性和稳定性,提高提取效率和纯度。
PCR反应
在聚合酶链式反应(PCR)中,无核酸酶水用于制备反应体系。PCR反应对核酸的完整性要求极高,任何核酸酶的存在都可能导致模板DNA的降解,从而影响PCR扩增的效率和特异性。使用无核酸酶水可以避免这种情况的发生,确保PCR反应的顺利进行和结果的可靠性。
核酸电泳
在进行核酸电泳时,无核酸酶水用于制备电泳缓冲液和溶解核酸样品。电泳过程中,核酸样品需要在缓冲液中展开,如果缓冲液中含有核酸酶,核酸分子在电泳过程中会被降解,导致电泳条带模糊或缺失。使用无核酸酶水可以保证核酸样品在电泳过程中的稳定性,使电泳结果清晰准确。
核酸杂交与探针制备
在核酸杂交实验和探针制备过程中,无核酸酶水用于溶解核酸探针和制备杂交缓冲液。核酸探针的稳定性对杂交实验的成功至关重要,任何核酸酶的存在都可能导致探针降解,影响杂交效率和特异性。使用无核酸酶水可以确保探针的完整性,提高杂交实验的成功率和结果的准确性。
细胞培养与转染
在细胞培养和转染实验中,无核酸酶水用于制备培养基和转染试剂。细胞培养基中需要添加核酸类物质,如核苷酸和核酸类似物,这些物质在普通水中容易被核酸酶降解。使用无核酸酶水可以保证这些核酸类物质的稳定性,促进细胞的生长和转染效率的提高。
总结
无核酸酶水在分子生物学实验中具有不可替代的重要性。它为核酸样品的提取、纯化、扩增、检测和应用提供了一个安全、稳定的环境,确保实验结果的准确性和可重复性。在进行相关实验时,选择高质量的无核酸酶水是实验成功的关键步骤之一。
无核酸酶水文献参考:
A comparison of culture-based, real-time PCR, droplet digital PCR and flow cytometric methods for the detection of Burkholderia cepacia complex in nuclease-free water and antiseptics.
Ahn Y, Gibson B, Williams A, Alusta P, Buzatu DA, Lee YJ, LiPuma JJ, Hussong D, Marasa B, Cerniglia CE.
J Ind Microbiol Biotechnol. 2020 Jul;47(6-7):475-484. doi: 10.1007/s10295-020-02287-3. Epub 2020 Jul 15.
PMID: 32671501
Infectious Keratitis: Characterization of Microbial Diversity through Species Richness and Shannon Diversity Index.
Schiano-Lomoriello D, Abicca I, Contento L, Gabrielli F, Alfonsi C, Di Pietro F, Papa FT, Ballesteros-Sánchez A, Sánchez-González JM, Rocha-De-Lossada C, Mazzotta C, Giannaccare G, Bonzano C, Borroni D.
Biomolecules. 2024 Mar 24;14(4):389. doi: 10.3390/biom14040389.
PMID: 38672407
Label-free detection of synthetic, full genomic length HIV-1 RNA at the few-copy level.
Dickens OO, Bajwa I, Garcia-Ramos K, Suh Y, Wen C, Cheng A, Fethke V, Yi Y, Collman RG, Johnson ATC.
Sens Actuators B Chem. 2023 Sep 1;390:134001. doi: 10.1016/j.snb.2023.134001. Epub 2023 May 20.
PMID: 37384350
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E2 ELISA Kit雌二醇ELISA试剂盒--高效检测血清、血浆等生物样本中E2的浓度
雌二醇(Estradiol,E2)是一种重要的雌激素类固醇激素,广泛存在于雌性生物体内,对生殖、内分泌、骨骼代谢、心血管健康等多种生理过程具有重要调节作用。E2 ELISA试剂盒作为一种高效的检测工具,能够定量测定血清、血浆等生物样本中E2的浓度,为相关研究提供了重要的技术支持。
Abbexa雌二醇(E2)ELISA试剂盒是一种用于体外定量测量血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他生物液体中雌二醇浓度的ELISA试剂盒。该检测具有高灵敏度和优异的特异性,用于检测雌二醇。未观察到雌二醇与其类似物之间有显著的交叉反应或干扰。
艾美捷E2 ELISA Kit雌二醇ELISA试剂盒:
货号:abx574169
靶标:雌二醇(E2)
反应性:通用(所有物种)
检测应用:ELISA
推荐稀释度:最佳稀释度/浓度应由最终用户确定。
储存:运输时温度为4°C。收到后,请按照试剂盒说明书中的储存说明进行储存。
有效期:该试剂盒的有效期至少为6个月。根据要求可提供长达12个月的有效期。
稳定性:试剂盒的稳定性由活性损失率决定。在适当的储存条件下,有效期内的损失率小于5%。为了尽量减少性能波动,操作程序和实验室条件应严格控制。还强烈建议整个检测过程由同一位用户完成。
检测范围:7.8 pg/ml - 500 pg/ml
灵敏度:< 2.9 pg/ml
标准品形式:冻干
检测方法:比色法
检测类型:竞争法
检测数据:定量
样本类型:血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他生物液体。
靶标类型:抗原
E2 ELISA Kit雌二醇ELISA试剂盒组成:
预包被的96孔微孔板
标准品
标准品稀释缓冲液
洗涤缓冲液
检测试剂A
检测试剂B
稀释液A
稀释液B
TMB底物
终止液
板封膜
所需但未提供的材料:
37°C培养箱
多通道和单通道移液管及无菌移液枪头
喷雾瓶或自动微孔板洗涤器
1.5 ml管
蒸馏水
吸水滤纸
100 ml和1升量筒
微孔板读数仪(波长:450 nm)
ELISA振荡器
试剂准备:
标准品:用推荐体积的标准品稀释缓冲液制备标准品溶液。然后按照协议中的指示,用标准品稀释缓冲液对标准品溶液进行系列稀释。
洗涤缓冲液:按照协议中的指示,用蒸馏水稀释浓缩的洗涤缓冲液。
检测试剂准备:计算所需的工作溶液的总体积。分别用稀释液A和稀释液B将检测试剂A和检测试剂B稀释1:100。
检测程序:此程序仅供参考。产品说明书可能略有不同。产品应按照随产品一起提供的产品说明书中的说明使用。
设置标准品、测试样本和对照孔。
将50 µl稀释后的标准品加入到标准品孔中。
将50 µl标准品稀释缓冲液加入到对照(零)孔中。
将50 µl稀释后的样本加入到样本孔中。
立即向每个孔中加入50 µl检测试剂A。在37°C下孵育1小时。
洗涤3次。
向每个孔中加入100 µl检测试剂B。在37°C下孵育30分钟。
洗涤5次。
向每个孔中加入90 µl TMB底物。在37°C下孵育10-20分钟。
加入50 µl终止液。
在450 nm处测量OD。
图:显示雌二醇(E2)标准OD数据的图表
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狂犬病病毒核蛋白(RABV N)抗体(生物素)--助力狂犬病病毒核蛋白研究
Abbexa狂犬病病毒核蛋白(RABV N)抗体(生物素)是一种兔多克隆抗体,针对狂犬病病毒核蛋白,并与生物素偶联。
货号:abx106359
靶标:狂犬病病毒核蛋白(RABV N)
克隆性:多克隆
反应性:病毒
已测试应用:ELISA
宿主:兔
推荐稀释度:最终用户应确定最佳稀释度/浓度。
偶联物:生物素
免疫原:重组狂犬病病毒核蛋白(1-450氨基酸)。
同种型:IgG
形式:液体
纯度:> 95%
纯化方法:通过Protein G纯化。
储存:分装并储存于-20°C。避免光照。避免反复冻融。
UniProt主要AC:P15197(UniProt, ExPASy)
UniProt次要AC:Q4F903
UniProt条目名称:NCAP_RABVA
基因符号:N
缓冲液:0.01 M PBS, pH 7.4, 0.03% Proclin-300和50%甘油。
浓度:0.25 mg/ml
注意:仅供研究使用。
狂犬病病毒核蛋白(RABV N)抗体(生物素)相关文献:
Rabies virus transcription and replication.
Albertini AA, Ruigrok RW, Blondel D.
Adv Virus Res. 2011;79:1-22. doi: 10.1016/B978-0-12-387040-7.00001-9.
PMID: 21601039
Properties of rabies virus phosphoprotein and nucleoprotein biocondensates formed in vitro and in cellulo.
Nevers Q, Scrima N, Glon D, Le Bars R, Decombe A, Garnier N, Ouldali M, Lagaudrière-Gesbert C, Blondel D, Albertini A, Gaudin Y.
PLoS Pathog. 2022 Dec 8;18(12):e1011022. doi: 10.1371/journal.ppat.1011022. eCollection 2022 Dec.
PMID: 36480574
Dimerization of Rabies Virus Phosphoprotein and Phosphorylation of Its Nucleoprotein Enhance Their Binding Affinity.
Ribeiro EA Jr, Leyrat C, Gérard FCA, Jamin M.
Viruses. 2024 Nov 4;16(11):1735. doi: 10.3390/v16111735.
PMID: 39599850
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大鼠补体C3(C3)ELISA试剂盒--检测程序和测试原理方案
Abbexa大鼠补体C3(C3)ELISA试剂盒是一种用于体外定量测量血清、血浆和其他生物液体中大鼠补体C3(C3)浓度的ELISA试剂盒。
货号:abx256750
靶标:补体C3(C3)
反应性:大鼠
已测试应用:ELISA
推荐稀释度:最终用户应确定最佳稀释度/浓度。
储存:以4°C运输。收到后,根据试剂盒说明书中的储存说明储存试剂盒。
有效期:该试剂盒的有效期至少为6个月。根据要求可提供长达12个月的有效期。
稳定性:试剂盒的稳定性由活性损失率决定。在适当的储存条件下,到期日内的损失率小于5%。为尽量减少性能波动,应严格控制操作程序和实验室条件。还强烈建议整个检测过程由同一用户完成。
检测范围:7.81 ng/ml - 500 ng/ml
灵敏度:4.69 ng/ml
标准形式:冻干
检测方法:比色法
检测类型:夹心法
检测数据:定量
样本类型:血清、血浆和其他生物液体。
大鼠补体C3(C3)ELISA试剂盒检测原理:
该试剂盒基于夹心酶联免疫吸附测定技术。96孔板上预先包被有抗体。将标准品、测试样品和生物素偶联试剂加入孔中并孵育。然后加入HRP偶联试剂,并将整个板孵育。在每个阶段使用洗涤缓冲液去除未结合的偶联物。使用TMB底物定量HRP酶促反应。加入TMB底物后,只有含有足够C3的孔才会产生蓝色产物,加入酸性终止液后变为黄色。黄色的强度与板上结合的C3量成正比。在450 nm波长下用微孔板读数器比色法测量光密度(OD),从而计算出C3的浓度。
大鼠补体C3(C3)ELISA试剂盒组分:
- 预包被的96孔微孔板
- 标准品
- 标准品稀释缓冲液
- 洗涤缓冲液
- 检测试剂A
- 检测试剂B
- 稀释液A
- 稀释液B
- TMB底物
- 终止液
- 板封
所需但未提供的材料:
- 37°C培养箱
- 多通道和单通道移液器及无菌移液器头
- 喷雾瓶或自动微孔板洗涤器
- 1.5 ml试管
- 蒸馏水
- 吸水滤纸
- 100 ml和1升量筒
- 微孔板读数器(波长:450 nm)
- ELISA振荡器
试剂准备:
1)标准品:用推荐体积的标准品稀释缓冲液制备标准品溶液。然后按照协议中的指示,用标准品稀释缓冲液进行标准品溶液的系列稀释。
2)洗涤缓冲液:按照协议中的指示,用蒸馏水稀释浓缩洗涤缓冲液。
3)检测试剂准备:计算所需的工作溶液总量。分别用稀释液A和稀释液B将检测试剂A和检测试剂B按1:100稀释。
检测程序:
1)设置标准品、测试样品和对照孔。
2)将100 µl稀释后的标准品加入标准品孔中。
3)将100 µl标准品稀释缓冲液加入对照(零)孔中。
4)将100 µl稀释后的样品加入样品孔中。在37°C下孵育90分钟。
5)将100 µl检测试剂A加入每个孔中。在37°C下孵育1小时。
6)洗涤3次。
7)将100 µl检测试剂B加入每个孔中。在37°C下孵育30分钟。
8)洗涤5次。
9)将90 µl TMB底物加入每个孔中。在37°C下孵育10-20分钟。
10)加入50 µl终止液。
11)在450 nm处测量OD值。
结果计算:
对于计算,将每个参考标准品和每个样品的O.D.450重复读数平均,并减去平均对照(零)O.D.450读数。可以将标准曲线绘制为每个参考标准品溶液的相对O.D.450(Y)与每个标准品溶液的相应浓度(X)之间的关系。样品的C3浓度可以从标准曲线中插值计算得出。
检测精密度:
批内精密度(同一检测内的精密度):分别在一块板上测试3个低、中、高浓度水平的补体C3(C3)样品,各测试20次。
批间精密度(不同检测之间的精密度):在3块不同的板上测试3个低、中、高浓度水平的补体C3(C3)样品,每块板8个重复。
CV(%)=(标准差/平均值)× 100
批内精密度:CV<10%
批间精密度:CV<10%
显示大鼠补体C3(C3)标准OD数据的图表
https://www.amyjet.com/products/abx256750.shtml
大鼠补体C4(C4)ELISA试剂盒:精准定量大鼠血清、血浆中补体C4浓度
Abbexa大鼠补体C4(C4)ELISA试剂盒是一种用于体外定量测量血清、血浆和其他生物液体中大鼠补体C4(C4)浓度的ELISA试剂盒。该检测具有高灵敏度和出色的特异性,用于检测补体C4。未观察到补体C4与其类似物之间存在显著的交叉反应或干扰。
货号:abx155280
靶标:补体C4(C4)
反应性:大鼠
已测试应用:ELISA
推荐稀释度:最终用户应确定最佳稀释度/浓度。
储存:以4°C运输。收到后,根据试剂盒说明书中的储存说明储存试剂盒。
有效期:该试剂盒的有效期至少为6个月。根据要求可提供长达12个月的有效期。
稳定性:试剂盒的稳定性由活性损失率决定。在适当的储存条件下,到期日内的损失率小于5%。为尽量减少性能波动,应严格控制操作程序和实验室条件。还强烈建议整个检测过程由同一用户完成。
检测范围:6.25 ng/ml - 400 ng/ml
灵敏度:< 2.70 ng/ml
标准形式:冻干
检测方法:比色法
检测类型:夹心法
检测数据:定量
样本类型:血清、血浆和其他生物液体。
靶标类型:抗原
大鼠补体C4(C4)ELISA试剂盒检测原理:
该试剂盒基于夹心酶联免疫吸附测定技术。96孔板上预先包被有抗体。将标准品、测试样品和生物素偶联试剂加入孔中并孵育。然后加入HRP偶联试剂,并将整个板孵育。在每个阶段使用洗涤缓冲液去除未结合的偶联物。使用TMB底物定量HRP酶促反应。加入TMB底物后,只有含有足够C4的孔才会产生蓝色产物,加入酸性终止液后变为黄色。黄色的强度与板上结合的C4量成正比。在450 nm波长下用微孔板读数器比色法测量光密度(OD),从而计算出C4的浓度。
大鼠补体C4(C4)ELISA试剂盒试剂盒组分:
- 预包被的96孔微孔板
- 标准品
- 标准品稀释缓冲液
- 洗涤缓冲液
- 检测试剂A
- 检测试剂B
- 稀释液A
- 稀释液B
- TMB底物
- 终止液
- 板封
所需但未提供的材料:
- 37°C培养箱
- 多通道和单通道移液器及无菌移液器头
- 喷雾瓶或自动微孔板洗涤器
- 1.5 ml试管
- 蒸馏水
- 吸水滤纸
- 100 ml和1升量筒
- 微孔板读数器(波长:450 nm)
- ELISA振荡器
试剂准备:
1)标准品:用推荐体积的标准品稀释缓冲液制备标准品溶液。然后按照协议中的指示,用标准品稀释缓冲液进行标准品溶液的系列稀释。
2)洗涤缓冲液:按照协议中的指示,用蒸馏水稀释浓缩洗涤缓冲液。
3)检测试剂准备:计算所需的工作溶液总量。分别用稀释液A和稀释液B将检测试剂A和检测试剂B按1:100稀释。
检测程序:
1)设置标准品、测试样品和对照孔。
2)将100 µl稀释后的标准品加入标准品孔中。
3)将100 µl标准品稀释缓冲液加入对照(零)孔中。
4)将100 µl稀释后的样品加入样品孔中。在37°C下孵育1小时。
5)将100 µl检测试剂A加入每个孔中。在37°C下孵育1小时。
6)洗涤3次。
7)将100 µl检测试剂B加入每个孔中。在37°C下孵育30分钟。
8)洗涤5次。
9)将90 µl TMB底物加入每个孔中。在37°C下孵育10-20分钟。
10)加入50 µl终止液。
11)在450 nm处测量OD值。
结果计算:
对于计算,将每个参考标准品和每个样品的O.D.450重复读数平均,并减去平均对照(零)O.D.450读数。可以将标准曲线绘制为每个参考标准品溶液的相对O.D.450(Y)与每个标准品溶液的相应浓度(X)之间的关系。样品的C4浓度可以从标准曲线中插值计算得出。
检测精密度:
批内精密度(同一检测内的精密度):分别在一块板上测试3个低、中、高浓度水平的补体C4(C4)样品,各测试20次。
批间精密度(不同检测之间的精密度):在3块不同的板上测试3个低、中、高浓度水平的补体C4(C4)样品,每块板8个重复。
CV(%)=(标准差/平均值)× 100
批内精密度:CV<10%
批间精密度:CV<12%
显示大鼠补体C4(C4)标准OD数据的图表
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Shikari利妥昔单抗ELISA试剂盒:如何检测血清中利妥昔单抗的水平?
Shikari利妥昔单抗ELISA试剂盒的使用:
Matriks Biotek-Shikari (Q-RITUX) Rituximab ELISA试剂盒(#RIT-FD-RM)是一种用于定量检测人血清中利妥昔单抗浓度的ELISA试剂盒。该试剂盒基于夹心法原理,利用固定在微孔板上的抗利妥昔单抗抗体捕获血清中的利妥昔单抗,然后通过酶标二抗和底物反应产生颜色变化,最后通过测量吸光度来计算利妥昔单抗的浓度。
解析文章:
《Enhancing bevacizumab efficacy in a colorectal tumor mice model using dextran-coated albumin nanoparticles》
作者:
Cristina Pangua1· Socorro Espuelas 1,6· Jon Ander Simón 2· Samuel ?lvarez 1· Cristina Martínez-Ohárriz 3· María Collantes 4,6· Iván Pe?uelas 4,5,6· Alfonso Calvo 2,6· Juan M. Irache 1,6
样本收集:
研究者从伊拉克的CLL患者中收集了血清样本。这些样本用于评估利妥昔单抗在患者体内的浓度水平,并探讨其与疾病状态和治疗反应之间的关系。
艾美捷Shikari利妥昔单抗ELISA试剂盒操作步骤:
包被: 将抗利妥昔单抗抗体包被在微孔板底部,形成固相抗体。
封闭: 使用封闭液封闭微孔板上的非特异性结合位点,减少假阳性结果。
加样: 将待测血清样本加入微孔板中,与固相抗体结合。
孵育: 在一定温度下孵育一定时间,使抗原-抗体充分结合。
洗涤: 洗涤去除未结合的样本成分。
加酶标二抗: 加入酶标二抗,与已结合的利妥昔单抗结合。
再次孵育和洗涤: 再次孵育和洗涤,去除未结合的酶标二抗。
显色: 加入底物溶液,酶催化底物产生颜色变化。
终止反应和测定: 加入终止液终止反应,并在酶标仪上测定吸光度。
数据处理:
通过标准曲线将吸光度值转换为利妥昔单抗的浓度值,并进行统计分析以评估其在CLL患者中的诊断价值。
实验结果:
利妥昔单抗水平的检测
通过使用Shikari? (Q-RITUX) Rituximab ELISA试剂盒,研究者成功检测了CLL患者血清中利妥昔单抗的浓度。结果显示,在接受利妥昔单抗治疗的患者中,血清利妥昔单抗水平显著升高,而未接受治疗的患者中利妥昔单抗水平较低或无法检测到。
诊断价值评估:
通过比较不同疾病阶段和治疗反应的患者血清中利妥昔单抗的水平,研究者发现利妥昔单抗水平与疾病状态和治疗反应密切相关。高水平的利妥昔单抗往往与较好的治疗反应和疾病控制相关,而低水平则可能与治疗失败或疾病进展有关。
ELISA试剂盒的作用和价值:
Shikari (Q-RITUX) Rituximab ELISA试剂盒在CLL患者的诊断和治疗监测中具有重要作用和价值。通过准确检测血清中利妥昔单抗的水平,该试剂盒可以帮助医生评估治疗效果、监测疾病进展并调整治疗方案。
此外,该试剂盒还具有以下优点:
高灵敏度: 能够准确检测低浓度的利妥昔单抗,提高诊断的准确性和可靠性。
高特异性: 只与利妥昔单抗结合,减少假阳性结果的发生。
易于操作: 操作步骤简单明了,适合在临床实验室中广泛使用。
快速出结果: 能够在较短时间内完成检测并得出结果,满足临床快速诊断的需求。
https://www.amyjet.com/products/RIT-FD-RM.shtml
Abbexa高灵敏度小鼠D-二聚体ELISA试剂盒使用说明
D-二聚体是由两个D片段通过交联连接而成的纤维蛋白蛋白。它是血栓溶解过程中血栓降解形成的几种纤维蛋白降解产物(FDP)之一。D-二聚体用于诊断弥散性血管内凝血等血液疾病以及血栓的诊断。本试剂盒旨在定量检测小鼠血浆中的纤维蛋白原D-二聚体蛋白。请注意,该试剂盒也作为CLIA试剂盒abx490569提供。
艾美捷小鼠D-二聚体ELISA试剂盒:
货号:abx258705
靶标:D-二聚体
反应性:小鼠
已测试应用:ELISA
推荐稀释度:最终用户应确定最佳稀释度/浓度。
储存:以4°C运输。收到后,根据试剂盒说明书中的储存说明储存试剂盒。
有效期:该试剂盒的有效期至少为6个月。根据要求可提供长达12个月的有效期。
稳定性:试剂盒的稳定性由活性损失率决定。在适当的储存条件下,到期日内的损失率小于5%。为尽量减少性能波动,应严格控制操作程序和实验室条件。还强烈建议整个检测过程由同一用户完成。
检测范围:61.7 ng/ml - 5000 ng/ml
小鼠D-二聚体ELISA试剂盒检测原理:
该试剂盒基于竞争酶联免疫吸附测定技术。96孔板上预先包被有抗体。将标准品、测试样品和生物素偶联试剂加入孔中并孵育。生物素标记的D-二聚体与未标记的D-二聚体在预包被抗体上发生竞争抑制反应。然后加入HRP偶联试剂,并将整个板孵育。在每个阶段使用洗涤缓冲液去除未结合的偶联物。使用TMB底物定量HRP酶促反应。加入TMB底物后,只有含有足够D-二聚体的孔才会产生蓝色产物,加入酸性终止液后变为黄色。黄色的强度与板上结合的D-二聚体量成反比。在450 nm波长下用微孔板读数器比色法测量光密度(OD),从而计算出D-二聚体的浓度。
小鼠D-二聚体ELISA试剂盒组分:
- 预包被的96孔微孔板
- 标准品
- 标准品稀释缓冲液
- 洗涤缓冲液
- 检测试剂A
- 检测试剂B
- 稀释液A
- 稀释液B
- TMB底物
- 终止液
- 板封
所需但未提供的材料:
- 37°C培养箱
- 多通道和单通道移液器及无菌移液器头
- 喷雾瓶或自动微孔板洗涤器
- 1.5 ml试管
- 蒸馏水
- 吸水滤纸
- 100 ml和1升量筒
- 微孔板读数器(波长:450 nm)
- ELISA振荡器
试剂准备:
1)标准品:用推荐体积的标准品稀释缓冲液制备标准品溶液。然后按照协议中的指示,用标准品稀释缓冲液进行标准品溶液的系列稀释。
2)洗涤缓冲液:按照协议中的指示,用蒸馏水稀释浓缩洗涤缓冲液。
3)检测试剂准备:计算所需的工作溶液总量。分别用稀释液A和稀释液B将检测试剂A和检测试剂B按1:100稀释。
检测程序:
1)设置标准品、测试样品和对照孔。
2)将50 µl稀释后的标准品加入标准品孔中。
3)将50 µl标准品稀释缓冲液加入对照(零)孔中。
4)将50 µl稀释后的样品加入样品孔中。
5)立即向每个孔中加入50 µl检测试剂A。在37°C下孵育1小时。
6)洗涤3次。
7)向每个孔中加入100 µl检测试剂B。在37°C下孵育30分钟。
8)洗涤5次。
9)向每个孔中加入90 µl TMB底物。在37°C下孵育10-20分钟。
10)加入50 µl终止液。
11)在450 nm处测量OD值。
结果计算:
该检测为竞争性检测,因此样品中D-二聚体浓度与测量的吸光度之间存在反相关关系。创建一个以标准浓度的对数为纵轴、平均吸光度为横轴的图表。通过标准点应用最佳拟合趋势线。样品的D-二聚体浓度可以从标准曲线上插值计算得出。
检测精密度:
- 批内精密度(同一检测内的精密度):分别在一块板上测试3个低、中、高浓度水平的D-二聚体样品,各测试20次。
- 批间精密度(不同检测之间的精密度):在3块不同的板上测试3个低、中、高浓度水平的D-二聚体样品,每块板8个重复。
- CV(%)=(标准差/平均值)× 100
- 批内精密度:CV<10%
- 批间精密度:CV<12%
标准品:50 ng/ml
显示鼠标D-二聚体标准OD数据的图表
https://www.amyjet.com/products/abx258705.shtml
CRF/CRH多克隆一抗:分析CRF在神经内分泌系统中的作用机制
促肾上腺皮质激素释放因子(CRF,也称为皮质释放素)是一种由196个氨基酸的前激素衍生的41个氨基酸的肽激素。它在应激时在下丘脑分泌,并刺激促肾上腺皮质激素(ACTH)的合成和分泌。CRF还在外周组织和胎盘中合成,已知它能抑制食欲并增加焦虑的主观感受。
CRF/CRH多克隆一抗是通过将CRF与载体蛋白偶联后免疫兔子产生的。
艾美捷CRF/CRH多克隆一抗技术和分析特性:
货号:BMA-T-4037
宿主物种:兔IgG
数量:50µl
形式:未稀释的抗血清,冻干,氮气包装。
复溶:加入50µl蒸馏水复溶。这将得到相当于未稀释的抗血清。
稳定性:原瓶:自交货之日起在4º - 8ºC下至少保存一年。通过在-20ºC或以下冷冻分装抗血清,以减少反复解冻和冷冻。
应用:该抗体已在ELISA中针对CRF进行测试和验证,并在免疫组化(IHC)中使用。其他应用如FACS或Western Blot也可能有效。最佳稀释度应由最终用户确定。
免疫原:CRF, CRH
反应性:(hu, ms, rt)
保存建议:+5 ± 3℃
交叉反应:
PEPTIDE %
CRF (human, mouse, rat) 100
CRF (bovine) 0
CRF (ovine) 0
Sauvagine (frog) 0
Prepro CRF (125-151) (human) 0
PACAP-38 (human, mouse, ovine, porcine, rat) 0
LH-RH 0
ACTH (1-39) (human) 0
(Arg8)-Vasopressin 0
BNP-45 (rat) 0
CRF/CRH多克隆一抗相关产品:
S-1169:ELISA,提取样本的高灵敏度
S-1181:ELISA,血清和血浆样本免提取
T-4035:RIA纯抗血清
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