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Svar Life Science/艾美捷补体系统功能检测相关试剂盒解决方案

Svar Life Science可为药物开发和临床诊断提供有力工具。Svar Life Science的科学家们一直在开创抗环瓜氨酸肽（anti-CCP）和补体功能评估的高质量酶联免疫吸附测定试剂盒的开发。补体系统(Complement system)是免疫系统的一个关键部分，由一组共同工作以保护身体免受感染并支持免疫反应的蛋白质组成。它在识别和消除病原体、促进炎症以及促进细胞碎片清除中起着至关重要的作用。补体系统可通过三条既独立又交叉的途径被激活，即经典途径（classical pathway）、旁路途径（alternative pathwa）和凝集素/MBL途径（lectin pathway）。

经典途径：由抗体（IgG或者IgM）与抗原形成的复合物结合C1q启动激活的途径。激活物先与C1q结合，顺序活化C1r、C1s、C4、C2、C3，形成C3转化酶(C4b2a)与C5转化酶(C4b2a3b)。

激活物：抗体-抗原复合物

参与成分：C1、C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9

MBL途径：由血浆中甘露糖结合凝集素（MBL）直接识别病原微生物表面的糖结构，进而依次活化MASP1、MASP2、C4、C2、C3，形成C3转化酶与C5转化酶的级联酶促反应过程。

激活物：表面有甘露糖、葡萄糖的病原微生物。

参与成分：MBL、C反应蛋白、C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9。

旁路途径：由病原微生物等提供接触表面，直接由C3、D因子参与的激活过程。该过程既不需要抗原-抗体复合物，也不需激活C1、C2和C4。

激活物：主要是病原体胞壁成分，如脂多糖、肽聚糖、磷壁酸等，以及凝聚的IgA和IgG4等。

参与成分：除C3、C5、C6、C7、C8、C9外，还有B因子、D因子、P因子等。

三条途径形成的C5转化酶，均可将C5裂解为C5a和C5b片段，C5b在液相中与C6、C7结合形成C5b67，嵌入细胞膜疏水脂质层中,进而与C8、若干C9分子聚合，形成C5b-9复合物，即末端补体复合物（terminal complement complex，TCC）。TCC以两种形式存在于体内，一是结合在细胞膜上，称为膜攻击复合物（membrane attack complex，MAC），另一种是游离在血浆中与S-蛋白结合，形成SC5b-9。

艾美捷Svar Life Science热门产品：

产品名称 方法 货号

WIESLAB  Complement System Alternative Pathway 补体旁路途径检测试剂盒 ELISA COMPLAP330

WIESLAB  Complement System Classical Pathway 补体经典途径检测试剂盒 ELISA COMPLCP310

WIESLAB  Complement System MBL Pathway 补体凝集素/MBL途径检测试剂盒 ELISA COMPLMP320

WIESLAB  Complement System Screen 补体系统筛选试剂盒 ELISA COMPL300

Complement Factor P Functional assay 补体P因子功能检测试剂盒 ELISA COMPL FPF RUO

Complement Factor P Quantitative assay 补体P因子定量检测试剂盒 ELISA COMPL FPQ RUO

Complement C4d 补体C4d检测试剂盒 ELISA COMPLC4dRUO

Complement TCC 末端补体复合物（TCC）检测试剂盒 ELISA COMPLTCCRUO

IMMUNOSCAN CCPlus 环瓜氨酸肽(CCP) IgG抗体检测试剂盒 ELISA RA-96Plus

艾美捷科技是Svar Life Science的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。

https://www.amyjet.com/news/Svar-Life-Science-new.shtml

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艾美捷Svar Life Science补体旁路途径检测试剂盒检测原理&预期结果

补体系统在慢性、自身免疫和传染性疾病中发挥着至关重要的作用。补体激活有三条途径（图1），即经典途径、替代途径和最近发现的MBL途径。

Svar Life Science-Wieslab 补体系统替代途径试剂盒是一种酶免疫测定，用于人血清中功能性替代补体途径的定性测定。

仅供体外诊断使用。

补体活性受损会导致人类易受反复暴发性或严重疾病的影响感染，并可能导致自身免疫性疾病的发展。激活不当补体有助于慢性炎症和组织损伤。

艾美捷Svar Life Science补体旁路途径检测试剂盒（#COMPLAP330）组分和试剂的储存：

一个带有无色可分离孔（12x8）的框架，密封在带有干燥剂包的铝箔袋中。孔涂有LPS。

35毫升替代途径稀释液（Dil AP），标为红色。

13毫升含有碱性磷酸酶标记的C5b-9抗体的结合物（蓝色）。

13毫升即用型底物溶液。

30毫升30倍浓缩洗涤液。

0.2毫升阴性对照（NC），含有人血清（需按患者血清样本进行稀释）。

0.2毫升阳性对照（PC），含有冻干人血清，见下文“阳性对照的重组”。 试剂盒中的所有试剂除洗涤液和对照外，均已准备好使用。试剂应储存在2-8°C，除阳性对照外。阳性对照必须储存在-20°C。

Svar Life Science-Wieslab®补体测定的原理：

Wieslab®补体测定结合了补体激活的溶血测定原理和使用针对补体激活产生的新抗原的标记抗体。产生的新抗原量与补体途径的功能性活性成正比。

在补体系统替代途径试剂盒中，微孔板条的孔涂有替代途径的特异性激活剂。患者血清被稀释在含有特定阻断剂的稀释液中，以确保只激活替代途径。在将稀释的患者血清孵育于孔中时，补体通过特定涂层被激活。

然后洗涤孔，并使用特定的碱性磷酸酶标记的抗体检测C5b-9，该抗体在MAC形成期间表达的新抗原。

在进一步的洗涤步骤之后，通过与碱性磷酸酶底物溶液孵育来检测特定抗体。补体激活的量与颜色强度相关，以吸光度（光密度（OD））来测量。

所需材料或设备但未提供

带有405纳米滤光片的微孔板读取器。

带有一次性吸头的精密移液器。

条带洗涤器、吸水纸、管子和计时器。

操作程序

仅取出测试所需的孔数，小心重新密封铝包装。在分析前让所有溶液平衡至室温（20-25°C）。

预期结果：

体外补体序列的激活导致补体组分的消耗，进而导致其浓度降低。因此，补体蛋白或补体活性的测定用于指示补体系统是否已被免疫和/或病理机制激活。当怀疑存在补体激活疾病或可能存在遗传性缺陷时，使用功能性和免疫化学补体测量来评估患者。功能性测定（如Wieslab®补体试剂盒）评估的补体活性水平考虑了组分的合成、降解和消耗速率，并提供了路径完整性的量度，与免疫化学方法相对，后者专门测量各种补体组分的浓度。当发现补体组分或补体功能水平降低时，临床医生会考虑存在缺陷或进行中的免疫过程，导致组分分解增加和补体水平降低。补体水平的增加通常是急性期反应的非特异性表现。

Wieslab®补体系统AP有助于检测与替代途径相关的补体缺陷，如下表所示：使用Wieslab®补体系统筛选，可以实现对所有三条补体途径更完整和深入的功能性评估。

文献参考：

1.Walport M, Complement (First of two parts) N Engl J Med 2001, 344, 1058-1066.

2.Walport M, Complement (Second of two parts) N Engl J Med 2001, 344, 1140-1144.

3.Roos A, Bouwman L, Munoz J et al., Functional characterization of the lectin pathway of

complement in human serum. Mol Immunol 2003, 39, 655-668.

4.Nordin Frediksson G, Truedsson L, Sjöholm A. New procedure for detection of complement

deficiency by ELISA. J Imm Meth 1993, 166, 263-270.

5.M.A. Seelen et al, Functional analysis of the classical, alternative and MBL pathways of the

complement system: standardization and validation of a simple ELISA. J Imm Meth 2005,

296,187-198.

艾美捷科技是Svar Life Science的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。

https://www.amyjet.com/news/Svar-Life-Science-new.shtml

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艾美捷Svar Life Science补体经典途径检测试剂盒测定原理

Wieslab 补体系统经典途径是一种酶免疫测定，用于人血清中功能性经典补体途径的定性或半定量测定。分析应由训练有素的实验室专业人员执行。仅供体外诊断使用。

艾美捷Svar Life Science补体经典途径检测试剂盒（#COMPLCP310）测定原理：

Wieslab®补体经典途径测定结合了补体激活的溶血测定原理和使用针对补体激活产生的新抗原的标记抗体。产生的新抗原量与补体途径的功能性活性成正比。

在补体CP试剂盒中，微孔板条的孔涂有经典途径的特异性激活剂。这与样品稀释液的组成和患者血清的稀释水平相结合，确保只激活经典途径。

在将稀释的患者血清孵育于孔中时，补体通过特定涂层被激活。然后洗涤孔，并使用特定的碱性磷酸酶标记的抗体检测在MAC（膜攻击复合体）形成过程中形成的C5b-9复合物的新抗原。

经过进一步的洗涤步骤，通过与碱性磷酸酶底物溶液孵育获得特定抗体的检测。补体激活的量与颜色强度相关，以吸光度（光密度（OD））来测量。

Svar Life Science补体经典途径检测试剂盒样品收集：

应使用无菌静脉穿刺技术收集血样，并使用标准程序获取血清。建议最少收集5毫升全血。让血液在血清管中凝固，室温（20-25°C）下60-65分钟。离心血样并将无细胞血清转移到干净的管中。必须正确处理血清以防止体外补体激活。

血清应冷冻在-70°C或更低温度的密封管中，以延长储存时间或在干冰上运输。样品不应反复冻融。

不得使用出现黄疸、脂血和溶血的血清。不能使用热灭活血清。不能用血浆。CLSI为储存血液标本提供了建议（血液标本处理及处理程序标准，H18A，1990）。

预期结果：

当发现补体组分或补体功能水平降低时，临床医生会考虑存在缺陷或进行中的免疫过程，导致组分分解增加和补体水平降低。

定性测定的正常分布在2SD内，已确定为阳性对照的69-129%，见表1。此范围内的结果表明经典途径的功能正常。建议每个实验室确认或建立自己的参考范围，以服务他们所服务的人群。

低于69-129%范围的值表明增加的激活，导致消耗经典补体途径的能力，或遗传决定的低活性。

低于5%的值强烈表明完全缺乏，无论是由过度激活还是经典途径的遗传缺陷引起。需要进一步分析补体蛋白以确定哪个补体因子导致活性降低。

阴性结果，即怀疑的缺陷，应始终通过测试一个新的、仔细处理的样品来验证，以确保没有发生体外补体激活。

补体水平的增加通常是急性期反应的非特异性表现。

Wieslab®补体系统经典途径有助于检测与经典途径相关的补体缺陷，如下表所示：使用Wieslab®补体系统筛选，可以实现对所有三条补体途径更完整和深入的功能性评估。

Svar Life Science补体经典途径检测试剂盒性能特征：

对120名献血者的血清进行了测试，并计算了正常参考范围。值以阳性对照的百分比表示。见图1和表1。没有献血者低于40%。

这是一个统计计算，不能保证真正的截止日期。建议每个实验室为疑似病例建立自己的参考水平和临界值缺乏。

文献参考：

1.Walport M, Complement (First of two parts) N Engl J Med 2001, 344, 1058-1066.

2.Walport M, Complement (Second of two parts) N Engl J Med 2001, 344, 1140-1144.

3.Roos A, Bouwman L, Munoz J et al., Functional characterization of the lectin pathway of

complement in human serum. Mol Immunol 2003, 39, 655-668.

4.Nordin Frediksson G, Truedsson L, Sjöholm A. New procedure for detection of complement

deficiency by ELISA. J Imm Meth 1993, 166, 263-270.

5.M.A. Seelen et al, Functional analysis of the classical, alternative and MBL pathways of the

complement system: standardization and validation of a simple ELISA. J Imm Meth 2005,

296,187-198.

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艾美捷Svar Life Science补体凝集素/MBL途径检测试剂盒，助力检测与MBL途径相关的补体缺陷

Wieslab 补体系统MBL途径试剂盒是一种酶免疫测定法，用于定性测定人血清中的MBL补体途径。用于体外诊断。

艾美捷Svar Life Science补体凝集素/MBL途径检测试剂盒（#COMPLMP320）组分和试剂的储存：

一个带有无色可分离孔（12x8）的框架，密封在带有干燥剂包的铝箔袋中。孔已涂有甘露聚糖。

35毫升MBL途径稀释液（Dil MP），标为绿色。

13毫升含有碱性磷酸酶标记的C5b-9抗体的结合物（蓝色）。

13毫升即用型底物溶液。

30毫升30倍浓缩洗涤液。

0.2毫升阴性对照（NC），含有人血清（需按患者血清样本进行稀释）。

0.2毫升阳性对照（PC），含有冻干人血清，见下文“阳性对照的重组”。 试剂盒中的所有试剂除洗涤液和对照外，均已准备好使用。试剂应储存在2-8°C，除阳性对照外。阳性对照必须储存在-20°C。

Svar Life Science补体凝集素/MBL途径检测试剂盒测定原理：

Wieslab®补体测定结合了补体激活的溶血测定原理和使用针对补体激活产生的新抗原的标记抗体。产生的新抗原量与补体途径的功能性活性成正比。

在补体MP试剂盒中，微孔板条的孔涂有MBL途径的特异性激活剂。患者血清被稀释在含有特定阻断剂的稀释液中，以确保只激活MBL途径。在将稀释的患者血清孵育于孔中时，补体通过特定涂层被激活。

然后洗涤孔，并使用特定的碱性磷酸酶标记的抗体检测C5b-9，该抗体在MAC形成过程中表达的新抗原。

在进一步的洗涤步骤之后，通过与碱性磷酸酶底物溶液孵育来检测特定抗体。补体激活的量与颜色强度相关，以吸光度（光密度（OD））来测量。

体外补体序列的激活导致补体组分的消耗，进而导致其浓度降低。因此，补体蛋白或补体活性的测定用于指示补体系统是否已被免疫和/或病理机制激活。当怀疑存在补体激活疾病或可能存在遗传性缺陷时，使用功能性和免疫化学补体测量来评估患者。功能性测定（如Wieslab®补体试剂盒）评估的补体活性水平考虑了组分的合成、降解和消耗速率，并提供了路径完整性的量度，与免疫化学方法相对，后者专门测量各种补体组分的浓度。当发现补体组分或补体功能水平降低时，临床医生会考虑存在缺陷或进行中的免疫过程，导致组分分解增加和补体水平降低。补体水平的增加通常是急性期反应的非特异性表现。

Wieslab®补体系统MBL途径有助于检测与MBL途径相关的补体缺陷，如下表所示：使用Wieslab®补体系统筛选，可以实现对所有三条补体途径更完整和深入的功能性评估。

Svar Life Science补体凝集素/MBL途径检测试剂盒文献参考：

1.Walport M, Complement (First of two parts) N Engl J Med 2001, 344, 1058-1066.

2.Walport M, Complement (Second of two parts) N Engl J Med 2001, 344, 1140-1144.

3.Roos A, Bouwman L, Munoz J et al. , Functional characterization of the lectin pathway of complement in human serum.Mol Immunol 2003, 39, 655-668.

4.Nordin Frediksson G, Truedsson L, Sjöholm A. New procedure for detection of complement deficiency by ELISA. J Imm Meth 1993, 166, 263-270.

5.M.A. Seelen et al, Functional analysis of the classical, alternative and MBL pathways of the complement system:standardization and validation of a simple ELISA. J Imm Meth 2005, 296, 187-198.

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艾美捷FabGennix-一抗、二抗、试剂盒、封闭肽和阳性对照方案

FabGennix 致力于一抗、二抗、试剂盒、封闭肽和阳性对照的开发，所有产品均为内部研发和质控，没有OEM，基于坚实的科研背景，Fabgennix公司已成为免疫诊断市场高质量抗体的优质供应商。

下图为FabGennix公司授权艾美捷科技有限公司（AmyJet Scientific Inc.）作为FabGennix在中国区域的代理授权书。

艾美捷FabGennix热门产品：

产品名称 货号 应用类型

PDE1A Antibody PD1A-101AP CM,ELISA,ICC,IF,IHC,IP,WB

PDE1B Antibody PD1B-201AP CM,ELISA,ICC,IF,IHC,IP,WB

PDE4A Antibody PD4A-112AP CM,ELISA,ICC,IF,IHC,IP,WB

PDE4C Antibody PD4C-301AP CM,ELISA,ICC,IF,IHC,IP,WB

PDE4D3 Antibody PD4D3-431AP CM,ELISA,ICC,IF,IHC,IP,WB

PDE4D5 Antibody PD4D5-451AP CM,ELISA,ICC,IF,IHC,IP,WB

PDE4D7 Antibody PD4D7-471AP ELISA,IP,WB

PDE4D8 Antibody PD4D8-481AP ELISA,IP,WB

Phospho-PDE3A Antibody PPD3A-140AP ELISA,IP,WB

Phospho-PDE5A Antibody PPD5A-140AP ELISA,ICC,IHC,IP,WB

Phospho-PDE11A Antibody (S117) PPD11A-140AP CM,ELISA,ICC,IF,IHC,IP,WB

Phospho-PDE11A Antibody (S117&S124 PPD11A-150AP ELISA,IP,WB

Phospho-FGFR4 Antibody PFGFR4-440AP ELISA,IP,WB

FGFR4 Antibody FGFR4-401AP ELISA,IHC,IP,WB

FGFR1 Antibody FGFR1-101AP ELISA,IP,WB

Phospho-MERTK Antibody PMKT-140AP CM,ELISA,FC,ICC,IF,IHC,WB

MYLK Antibody MYLK-101Y ELISA,IHC,IP,WB

Olig2 Antibody OUG2-212AP ELISA,IHC,IP,WB

hCG beta Antibody BIOTIN CGB-101-BIOTIN ELISA,IP,WB

ACTH Antibody ACTH-101AP CM,DB,ELISA,IF,IHC,IP,WB

Human Lactoferrin Antibody HLAC-101AP CM,ELISA,ICC,IF,IHC,IP,WB

GPR56 Extracellular domain Antibody GPCR56-101AP ELISA,IHC,IP,WB

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艾美捷FabGennix-StripOBuffer蛋白质印迹剥离缓冲液：节省时间，保留蛋白质和抗原样本

FabGennix-StripOBuffer是一种特别配制的水基缓冲液，能在室温下5-10分钟内将抗体从抗原上剥离。

艾美捷FabGennix-StripOBuffer蛋白质印迹剥离缓冲液：

货号：FGI-1989

体积：100毫升

浓度：10倍溶液

储存：短期储存请放置在室温下。

应用：25毫升的StripOBuffer可用于处理25-50个小斑点杂交。

FabGennix-StripOBuffer蛋白质印迹剥离缓冲液优势：

通过重复使用印迹节省时间

保留蛋白质和抗原样本

消除正确等量蛋白质装载的问题

在同一印迹上比较同一蛋白质的磷酸化和非磷酸化状态

通过使用不同供应商或相同/不同表位针对抗体的不同抗体集重新探针同一印迹，重新确认蛋白质表达

在保持抗原性的同时进行多次剥离

不需要加热

不需要β-巯基乙醇 - 无异味

与硝酸纤维素和PVDF膜兼容

协议：

使用前先将提供的缓冲液用蒸馏水稀释（1:10）。

首先用蒸馏水，然后用剥离缓冲液至少冲洗膜一次。

多次用缓冲液冲洗可以得到更清晰的自动放射照相带。

将每个小凝胶膜完全浸入10毫升剥离缓冲液中。

在室温下轻轻摇晃膜5-10分钟。

用蒸馏水冲洗膜。

用TBST或稀释主要抗体的缓冲液冲洗膜。

进行封闭阶段。

FabGennix-StripOBuffer蛋白质印迹剥离缓冲液文献参考：

Gebska, Milena A. et al. “Phosphodiesterase-5A (PDE5A) Is Localized to the Endothelial Caveolae and Modulates NOS3 Activity.” Cardiovascular Research 90.2 (2011): 353–363.  PMC3078797

Pawar, Vaibhav et al. “Checkpoint Kinase Phosphorylation in Response to Endogenous Oxidative DNA Damage in Repair-Deficient Stationary-Phase Saccharomyces Cerevisiae.” Mechanisms of ageing and development 130.8 (2009): 501–508.  PMC2716406

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艾美捷FabGennix-SolObuffer细胞裂解试剂盒，离心后即可使用

FabGennix-SolOBuffer 细胞裂解试剂盒利用一种特殊配制的细胞裂解缓冲液，该缓冲液使用非变性洗涤剂制备用于生物测定的细胞裂解物。

艾美捷FabGennix-SolObuffer细胞裂解试剂盒：

货号：FGI-1943

体积：200毫升SolOBufferTM；各100微升的蛋白酶抑制剂混合物A和B。

储存：在4°C下储存。蛋白酶抑制剂混合物A和B应储存在-20°C。大约保质期为六个月。

应用：蛋白质特征分析和酶活性测定。

FabGennix-SolObuffer细胞裂解试剂盒特点：

非常适合包括蛋白质特性分析和酶活性测定在内的多种技术。

离心后即可使用 - 无需去除洗涤剂。

保留蛋白质样本。

非变性。

消除在故障排除测定中的问题。

试剂盒包括蛋白酶抑制剂以保留生物样本。

操作协议：

建议用于组织蛋白提取的体积为每克组织4-6毫升或每10^6个细胞1-2毫升。

取所需体积的SolOBufferTM。

使用前立即向2毫升SolOBufferTM中加入1微升蛋白酶抑制剂A和1微升蛋白酶抑制剂B。

蛋白酶抑制剂在SolOBufferTM中不稳定，因此请确保只配制所需量。

将所需体积的SolOBufferTM加入样本中，并通过机械破碎或5秒超声处理破坏组织/细胞。

将样本置于冰上15分钟。

在12000 XG（微量离心机）下离心3分钟。

在某些情况下，可能会留下含有细胞碎片和其他不溶物的小沉淀物。

溶解的样本可以直接用于Western Blot和免疫沉淀，无需去除任何洗涤剂。

FabGennix-SolObuffer细胞裂解试剂盒文献参考：

Sharma, Gitanjali, et al. "Cell penetrating peptide tethered bi-ligand liposomes for delivery to brain in vivo: Biodistribution and transfection." Journal of Controlled Release 167.1 (2013): 1-10. PMID23352910

Gobejishvili, Leila et al. “Rolipram Attenuates Bile Duct Ligation–Induced Liver Injury in Rats: A Potential Pathogenic Role of PDE4.” The Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics 347.1 (2013): 80–90.  PMC3781411

Gobejishvili, Leila et al. “S-Adenosylmethionine Decreases Lipopolysaccharide-Induced Phosphodiesterase 4B2 and Attenuates Tumor Necrosis Factor Expression via cAMP/Protein Kinase A Pathway.” The Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics 337.2 (2011): 433–443.  PMC3083110

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艾美捷FabGennix-兔抗鸡IgG-HRP物理特性&应用协议

FabGennix-兔抗鸡IgY（重链和轻链）-辣根过氧化物酶

TIE2-201Y的WB与小鼠脑和PC-TIE2在7%SDS-PAGE上。表观分子量为130 kDa。初级：稀释1:500于DiluO缓冲液中。次级：FabGennix鸡IgG-HRP（HRP-1060）在DiluOBuffer中1:4000稀释。

艾美捷FabGennix-兔抗鸡IgG-HRP：

货号：HRP-1060

验证的应用：细胞培养（CM）、酶联免疫吸附测定（ELISA）、免疫荧光（IF）、免疫组化（IHC）、免疫沉淀（IP）、Western Blot（WB）

宿主：兔

物种交叉反应性：鸡

免疫原：鸡IgY全分子

FabGennix-兔抗鸡IgG-HRP物理特性：

体积：500微升

浓度：抗体稳定液中0.5微克/微升

形态：液体

免疫球蛋白：IgY 重链 & 轻链

克隆性：多克隆

储存：储存在-20°C。从-20°C取出后，无需解冻即可用于移液。

储存液：抗血清提供在含0.02%的硫柳汞或汞氯酚作为防腐剂的抗体稳定液中。

FabGennix-兔抗鸡IgG-HRP应用协议：

共聚焦显微镜：1:250-1:5,000

直接染色（DB）：1:30,000-1:75,000

酶联免疫吸附测定（ELISA）：1:30,000-1:75,000

免疫细胞化学：1:250-1:5,000

免疫荧光：1:250-1:5,000

免疫组化：1:250-1:5,000

免疫沉淀：1:250-1:5,000

Western Blot：1:4,500-1:20,000

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