来宝网 2024/9/9点击165次
AAV2滴度检测试剂盒--简单且定量，广泛使用
AAV2滴度检测试剂盒/AAV2 Titration ELISA PRATV原理：
该测定基于夹心ELISA技术，其中针对组装好的AAV衣壳上的构象表位的单克隆抗体（mab）被包被在板上，并用于从样本中捕获AAV颗粒。
捕获的AAV颗粒的检测是一个两步过程。
生物素偶联的mab与捕获的AAV颗粒结合。
链霉亲和素过氧化物酶结合物与生物素分子反应。加入底物后会产生颜色反应，其与特定结合的病毒颗粒的数量成正比。
AAV定量方法比较：
每种常用的定量方法都有其优缺点：
qPCR广泛使用，但存在样本制备、引物设计或PCR效率等问题，可能导致实验室间结果变异性高。
数字滴液PCR方法克服了qPCR的一些限制。然而，由于不同的样本处理协议，实验室间仍然可能发生变异。
点印迹是一种简单且定量的方法，如果使用了可靠的参考材料。然而，它受到一般西方印迹线性和动态范围有限的影响。
鉴于上述技术的实用缺陷，传统的夹心ELISA在实验室间和实验室内变异性以及易用性方面目前似乎更优。因此，它代表了可靠和可重复定量总rAAV衣壳滴度的最佳格式。
使用混合/突变型AAV：
对混合/突变型AAV载体的识别取决于受混合/突变影响的特定衣壳区域。PROGEN的AAV ELISA中使用的捕获抗体结合特定的，某些情况下是明确定义的构象表位。这些表位是由相应AAV血清型的衣壳组装产生的。ELISA可能识别您的混合/突变型AAV载体的第一个迹象是抗体结合表位的存在。然而，衣壳蛋白的蛋白质序列变化也可能影响蛋白质的构象，因此也影响AAV衣壳上呈现的表位的构象。这可能会影响抗体的结合亲和力，并影响基于AAV ELISA试剂盒提供的（非混合）试剂盒对照的滴度测定。由于这些特性在很大程度上取决于所执行的特定混合/突变，PROGEN无法保证成功且精确地定量您的混合/突变型AAV载体。即使抗体结合表位仍然存在于您的混合/突变型AAV衣壳上，您的测定也需要针对您的特定AAV载体进行测试和优化。
PROGEN强烈建议生产和校准一个合适的（混合/突变型）试剂盒对照，以确保使用PROGEN ELISA试剂盒可靠地测定您个别混合/突变型AAV载体的滴度。
艾美捷AAV2滴度检测试剂盒：
AAV2 Titration ELISA PRATV
货号 PRO-PRATV
数量 96次测试
反应性 AAV2
储存 2-8°C
用途 仅供研究使用
应用 ELISA
产品描述 独特的微孔板酶联免疫测定，用于定量AAV2的病毒颗粒和组装的空衣壳。捕获抗体检测的构象表位不存在于未组装的衣壳蛋白上。
试剂盒对照/标准 AAV2的空衣壳制剂
形式提供 试剂盒，12 x 8孔条状包装
AAV2滴度检测试剂盒/AAV2 Titration ELISA PRATV特点：
AAV2衣壳定量ELISA
完整和空AAV2衣壳的检测
A20抗体用作捕获和检测抗体
AAV2滴度检测试剂盒/AAV2 Titration ELISA PRATV文献参考：
Hamann, M. V. et al. Improved targeting of human CD4+ T cells by nanobody-modified AAV2 gene therapy vectors. PLoS One 16, (2021).
Satkunanathan, S., Thorpe, R. & Zhao, Y. The function of DNA binding protein nucleophosmin in AAV replication. Virology 510, 46–54 (2017).
Lock M, McGorray S, et al. Characterization of a recombinant Adeno-Associated Virus Type 2 reference standard material; Hum Gene Therapy 21:1273-1285 (2010).
Lochrie, M. A. et al. Mutations on the External Surfaces of Adeno-AssociatedVirus Type 2 Capsids That Affect Transduction andNeutralization. J. Virol. 80, 821–834 (2006).
https://www.amyjet.com/products/PRO-PRATV.shtml
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AAV2滴定ELISA试剂盒2.0R/RAAV2 Titration ELISA 2.0R检测方案
AAV2滴定ELISA试剂盒2.0/RAAV2 Titration ELISA 2.0R：
该测定基于夹心ELISA技术，其中将对组装的AAV衣壳上的构象表位特异性的重组抗体涂覆在板上，并用于从样本中捕获AAV颗粒。
艾美捷AAV2滴定ELISA试剂盒2.0/RAAV2 Titration ELISA 2.0R：
货号 PRO-PRAAV2R
数量 96次测试
反应性 AAV2
储存 2-8°C
用途 仅供研究使用
应用 ELISA
产品描述 独特的微孔板酶联免疫测定，用于定量AAV2的病毒颗粒和组装的空衣壳。重组捕获抗体检测的构象表位不存在于未组装的衣壳蛋白上。
试剂盒对照/标准 AAV2的空衣壳制剂
形式提供 试剂盒，12 x 8孔条状包装
AAV2滴定ELISA试剂盒2.0/RAAV2 Titration ELISA 2.0R特点：
AAV2衣壳定量ELISA
完整和空AAV2衣壳的检测
A20R抗体用作捕获和检测抗体
AAV2滴定ELISA试剂盒2.0/RAAV2 Titration ELISA 2.0R相关产品：
AAV2 ELISA Control
Cat. No. PRAAV2-C
AAV2 empty capsids
Cat. No. 66V020
AAV2 standard material (eGFP)
Cat. No. 66V021
AAV2 Titration ELISA
Cat. No. PRATV
AAV2 VP1 + VP2 + VP3, recombinant proteins, set
Cat. No. 72001
https://www.amyjet.com/products/PRO-PRAAV2R.shtml
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AAV5滴定ELISA试剂盒/AAV5 Titration ELISA三大特点
AAV定量方法比较：
每种常用的定量方法都有其优缺点：
qPCR广泛使用，但存在样本制备、引物设计或PCR效率等问题，可能导致实验室间结果的高变异性。
数字滴液PCR方法克服了qPCR的一些限制。然而，由于不同的样本处理协议，实验室间仍然可能发生变异。
点印迹是一种简单且定量的方法，如果使用了可靠的参考材料。然而，它受到一般西方印迹线性和动态范围有限的影响。
鉴于上述技术的实用缺陷，传统的夹心ELISA在实验室间和实验室内变异性以及易用性方面目前似乎更优。因此，它代表了可靠和可重复定量总rAAV衣壳滴度的最佳格式。
艾美捷AAV5滴定ELISA试剂盒/AAV5 Titration ELISA：
货号 PRO-PRAAV5
数量 96次检测
反应性 AAV5
储存 2-8°C
预期用途 仅供研究使用
应用 酶联免疫吸附测定（ELISA）
产品描述 独特的微孔板酶联免疫吸附测定，用于定量检测AAV5的病毒颗粒和组装后的空衣壳。捕获抗体能够检测到未组装衣壳蛋白上不存在的构象表位。
试剂盒对照/标准 AAV5空衣壳制剂
提供形式 试剂盒，12条x每条8孔的微孔板条状包装
AAV5滴定ELISA试剂盒/AAV5 Titration ELISA特点：
AAV5衣壳定量ELISA
完整和空AAV5衣壳的检测
ADK5a抗体用作捕获和检测抗体
AAV5滴定ELISA试剂盒/AAV5 Titration ELISA文献参考：
Kuck, D., Kern, A. & Kleinschmidt, J. A. Development of AAV serotype-specific ELISAs using novel monoclonal antibodies. J. Virol. Methods 140, 17-24 (2007).
https://www.amyjet.com/products/PRO-PRAAV5.shtml
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抗AAV2,A20R,小鼠重组抗体/anti-AAV2, A20R, mouse recombinant ab方案
用于表征感染的不同阶段，对AAV2组装过程的分析非常有用。A20R与完整的AAV2、AAV3和Anc80颗粒、空和满衣壳特异性反应。识别组装衣壳的构象表位，不存在于变性衣壳蛋白和天然但未组装的衣壳蛋白中。该抗体不能用于免疫印迹。
该抗体也可用于中和实验。
艾美捷抗AAV2,A20R,小鼠重组抗体/anti-AAV2, A20R, mouse recombinant ab：
货号 PRO-610298
数量 1毫升
抗体类型 重组
宿主 小鼠
亚型 IgG1
偶联物 未偶联
应用 点印迹、酶联免疫吸附测定（ELISA）、免疫细胞化学/免疫荧光（ICC/IF）、免疫沉淀（IP）、中和试验
纯化 亲和色谱
反应性 AAV2, AAV2 7m8, AAV3, Anc80
无反应性 AAV1, AAV4, AAV5, AAV6, AAV7, AAV8, AAV9, AAV11, AAV12, AAVDJ, AAVrh10, AAVrh74
储存 可在2-8°C下保存最多3个月；长期储存需分装后在-20°C下保存；避免反复冻融
预期用途 仅供研究使用
克隆 A20R
免疫原 AAV2衣壳
浓度
50 微克/毫升
配方 PBS，pH 7.4，含0.09%的叠氮钠和0.5%的牛血清白蛋白
结合亲和力
KD值（AAV2）= <1.0E-12 M
KD值（AAV3）= <1.0E-12 M
同义词 腺相关病毒2型；
AAV-2用A20R抗体中和AAV2-GFP载体。HeLa细胞中显示AAV感染，感染后约48小时拍摄照片（GFP、CPE、合并）。随着A20R浓度的增加，中和作用增强。
抗AAV2,A20R,小鼠重组抗体/anti-AAV2, A20R, mouse recombinant ab特点：
重组抗体
适用于斑点印迹、ELISA、ICC、IP和中和测定
与AAV2、AAV2 7m8、AAV3和Anc80完整颗粒反应
同种型：小鼠IgG1
A20R抗体识别与A20抗体相同的表位（目录号61055）。
https://www.amyjet.com/products/PRO-610298.shtml
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抗AAV8、ADK8、小鼠单克隆抗体/anti-AAV8, ADK8, mouse mab：高特异性生物研究工具
用于表征感染的不同阶段，对AAV组装过程的分析非常有用。ADK8与AAV1、AAV3、AAV7、AAV8、AAVrh10、AAVrh74和Anc80、空衣壳和全衣壳特异性反应。识别组装衣壳的构象表位。预测的结合位点：残基586-LQQQNT-591（Gurda等人，2012）。该抗体不能用于使用变性条件的免疫印迹。
该抗体也可用于中和实验。
艾美捷抗AAV8、ADK8、小鼠单克隆抗体/anti-AAV8, ADK8, mouse mab：
货号 PRO-610160
数量 10 微克
抗体类型 单克隆
宿主 小鼠
亚型 IgG2a kappa
偶联物 未偶联
应用 点印迹、酶联免疫吸附测定（ELISA）、免疫细胞化学/免疫荧光（ICC/IF）、免疫沉淀（IP）、中和试验
纯化 亲和色谱
反应性 AAV3, AAV7, AAV8, AAVrh10, AAVrh74, Anc80
无反应性 AAV1, AAV2, AAV4, AAV5, AAV6, AAV9, AAV11, AAV12, AAVDJ
重组前的储存 在标示的有效期前储存于2-8°C
重组后的储存 重组后可在2-8°C下保存最多3个月；长期储存需分装后在-20°C下保存；避免反复冻融
预期用途 仅供研究使用
克隆 ADK8
免疫原 AAV8衣壳
浓度 用200微升PBS重组后浓度为50 微克/毫升
配方 冻干；用200 微升无菌PBS重组
结合亲和力
KD值（AAV8）= <1.0E-12 M
KD值（AAVrh10）= <1.0E-12 M
KD值（AAVrh74）= <1.0E-12 M
同义词 腺相关病毒8型，AAV-8
天然AAV1-AAV9、AAVrh10、AAVDJ衣壳（1E+09-1E+10衣壳）和变性AAV8衣壳的斑点印迹分析（1E+09-1E+10衣壳，在样品缓冲液中于95℃变性10分钟）。
用PBST（PBS+0.1%吐温20）中的5%干乳封闭硝化纤维膜1帽RT。将第一抗体抗AAV8（完整颗粒）小鼠单克隆抗体ADK8在封闭缓冲液（抗体浓度100ng/ml）中稀释，并在RT下孵育1小时。第二抗体山羊抗小鼠IgG-HRP也在封闭缓冲区（抗体浓度200ng/ml）中稀释并孵育1帽RT，使用PierceT#ECL Plus Western Blotting Substrate通过化学发光检测可见条带。
抗AAV8、ADK8、小鼠单克隆抗体/anti-AAV8, ADK8, mouse mab特点：
纯化、冻干
小鼠单克隆抗体
适用于斑点印迹、ELISA和中和
与AAV3、AAV7、AAV8、AAVrh10、AAVrh74和Anc80完整颗粒反应
同种型：IgG2aκ
抗AAV8、ADK8、小鼠单克隆抗体/anti-AAV8, ADK8, mouse mab文献参考：
Ohba K. et al. Adeno-associated virus vector system controlling capsid expression improves viral quantity and quality., iScience, 26, 106487, (2023).
Haar, J., Blazevic, D., Strobel, B., Kreuz, S. & Michelfelder, S. MSD-based assays facilitate a rapid and quantitative serostatus profiling for the presence of anti-AAV antibodies. Mol. Ther. - Methods Clin. Dev. 25, 360–369 (2022).
https://www.amyjet.com/products/PRO-610160.shtml
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抗AAV-5、ADK 5a、小鼠单克隆抗体/anti-AAV-5, ADK5a, mouse mab，适用于多种应用
用于表征感染的不同阶段，对AAV5组装过程的分析非常有用。ADK5a与完整的腺相关病毒5颗粒、空衣壳和完整衣壳特异性反应。识别组装衣壳的构象表位，不存在于变性衣壳蛋白和天然但未组装的衣壳蛋白中。该抗体不能用于免疫印迹。
该抗体可用于中和实验。
艾美捷抗AAV-5、ADK 5a、小鼠单克隆抗体/anti-AAV-5, ADK5a, mouse mab：
货号 PRO-610148
数量 10 微克
抗体类型 单克隆
宿主 小鼠
亚型 IgG2a kappa
偶联物 未偶联
应用 亲和色谱、点印迹、酶联免疫吸附测定（ELISA）、免疫细胞化学/免疫荧光（ICC/IF）、免疫沉淀（IP）、中和试验
纯化 亲和色谱
反应性 AAV5
无反应性 AAV1, AAV2, AAV3, AAV4, AAV6, AAV7, AAV8, AAV9, AAV11, AAV12, AAVDJ, AAVrh10, AAVrh74
重组前的储存 在标示的有效期前储存于2-8°C
重组后的储存 重组后可在2-8°C下保存最多3个月；长期储存需分装后在-20°C下保存；避免反复冻融
预期用途 仅供研究使用
克隆 ADK5a
免疫原 AAV5衣壳
浓度 用200微升PBS重组后浓度为50 微克/毫升
配方 冻干；用200 微升无菌PBS重组
结合亲和力
KD值（AAV5）= 4.9E-11 M
同义词 腺相关病毒5型，AAV-5
用ADK5a抗体中和AAV5-GFP载体。HeLa细胞中显示AAV感染，感染后约48小时拍摄照片（GFP、CPE、合并）。随着ADK5a浓度的增加，中和作用增强。
抗AAV-5、ADK 5a、小鼠单克隆抗体/anti-AAV-5, ADK5a, mouse mab特点：
纯化、冻干
小鼠单克隆抗体
适用于斑点印迹、ELISA和中和测定
与AAV5完整衣壳反应
同种型：IgG2aκ
抗AAV-5、ADK 5a、小鼠单克隆抗体/anti-AAV-5, ADK5a, mouse mab文献参考：
Ohba K. et al. Adeno-associated virus vector system controlling capsid expression improves viral quantity and quality., iScience, 26, 106487, (2023).
Emmanuel, S. N., Mietzsch, M., Tseng, Y. S., Smith, J. K. & Agbandje-Mckenna, M. Parvovirus Capsid-Antibody Complex Structures Reveal Conservation of Antigenic Epitopes across the Family. Viral Immunol. 34, 3–17 (2021).
Baatartsogt, N. et al. A sensitive and reproducible cell-based assay via secNanoLuc to detect neutralizing antibody against adeno-associated virus vector capsid. Mol. Ther. - Methods Clin. Dev. 22, 162–171 (2021).
https://www.amyjet.com/products/PRO-610148.shtml
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抗AAV9生物素,ADK9,小鼠单抗/anti-AAV9 Biotin, ADK9, mouse mab在免疫检测技术中的应用与优势
用于表征感染的不同阶段，对AAV组装过程的分析非常有用。ADK9与完整的腺相关病毒颗粒、空衣壳和完整衣壳特异性反应。识别组装衣壳的构象表位。该抗体不能用于免疫印迹。
艾美捷抗AAV9生物素,ADK9,小鼠单抗/anti-AAV9 Biotin, ADK9, mouse mab：
货号 PRO-615162
数量 750 微升
抗体类型 单克隆
宿主 小鼠
亚型 IgA kappa
偶联物 生物素
应用 酶联免疫吸附测定（ELISA）
纯化 亲和色谱
反应性 AAV9
无反应性 AAV1, AAV2, AAV3, AAV4, AAV5, AAV6, AAV7, AAV8, AAV11, AAV12, AAVDJ, AAVrh10, AAVrh74
重组前的储存 在标示的有效期前储存于2-8°C
重组后的储存 2-8°C
预期用途 仅供研究使用
克隆 ADK9
免疫原 AAV9衣壳
配方 冻干；用750 微升无菌PBS重组
同义词 腺相关病毒9型；AAV-9
以ADK9生物素偶联物（目录号615162）为检测抗体的ELISA（1:20）
抗AAV9生物素,ADK9,小鼠单抗/anti-AAV9 Biotin, ADK9, mouse mab特点：
生物素结合物
小鼠单克隆抗体
适用于ELISA
与AAV9完整颗粒反应
同种型：IgA-κ
抗AAV9生物素,ADK9,小鼠单抗/anti-AAV9 Biotin, ADK9, mouse mab文献参考：
Emmanuel, S. N. et al. Structurally Mapping Antigenic Epitopes of Adeno-associated Virus 9: Development of Antibody Escape Variants. J. Virol. 96, (2022).
Tseng, Y.-S. et al. Generation and characterization of anti-Adeno-associated virus serotype 8 (AAV8) and anti-AAV9 monoclonal antibodies. J. Virol. Methods 236, 105-110 (2016).
Adachi, K., Enoki, T., Kawano, Y., Veraz, M. & Nakai, H. Drawing a high-resolution functional map of adeno-associated virus capsid by massively parallel sequencing. Nat. Commun. 5, (2014).
https://www.amyjet.com/products/PRO-615162.shtml
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抗AAV 9,ADK 9 - 1 R,小鼠重组抗体/anti-AAV9, ADK9-1R, mouse recombinant ab纯化、冻干
用于表征感染的不同阶段，对AAV9组装过程的分析非常有用。ADK9-1R与完整的AAV9颗粒、空和满衣壳特异性反应。识别组装衣壳的构象表位，不存在于变性衣壳蛋白和天然但未组装的衣壳蛋白中。该抗体不能用于免疫印迹。
该抗体也可用于中和实验。
ADK9-1R抗体识别与ADK9抗体相同的表位（目录号690162）。
艾美捷抗AAV 9,ADK 9 - 1 R,小鼠重组抗体/anti-AAV9, ADK9-1R, mouse recombinant ab：
货号 PRO-610178
数量 50 微克
抗体类型 重组
宿主 小鼠
亚型 IgG1
偶联物 未偶联
应用 点印迹、酶联免疫吸附测定（ELISA）、中和试验
纯化 亲和色谱
反应性 AAV9
无反应性 AAV1, AAV2, AAV3, AAV4, AAV5, AAV6, AAV8, AAVDJ, AAVrh10, AAVrh74
重组前的储存 在标示的有效期前储存于2-8°C
重组后的储存 重组后可在2-8°C下保存最多3个月；长期储存需分装后在-20°C下保存；避免反复冻融
预期用途 仅供研究使用
克隆 ADK9-1R
免疫原 AAV9衣壳
浓度 用1毫升蒸馏水重组后浓度为50 微克/毫升
配方 冻干；用1毫升蒸馏水重组（最终溶液含有0.09%的叠氮钠，0.5%的牛血清白蛋白在PBS缓冲液中，pH 7.4）
结合亲和力
KD值（AAV9）= <1.0E-12 M
同义词 腺相关病毒9型；AAV-9
用ADK9-1R抗体中和AAV9-GFP载体。HeLa细胞中显示AAV感染，感染后约48小时拍摄照片（GFP、CPE、合并）。随着ADK9-1R浓度的增加，中和作用增强。
抗AAV 9,ADK 9 - 1 R,小鼠重组抗体/anti-AAV9, ADK9-1R, mouse recombinant ab特点：
纯化、冻干
重组抗体
适用于斑点印迹、ELISA和中和测定
与AAV9反应，吸入颗粒
同种型：小鼠IgG1
抗AAV 9,ADK 9 - 1 R,小鼠重组抗体/anti-AAV9, ADK9-1R, mouse recombinant ab文献参考：
Haar, J., Blazevic, D., Strobel, B., Kreuz, S. & Michelfelder, S. MSD-based assays facilitate a rapid and quantitative serostatus profiling for the presence of anti-AAV antibodies. Mol. Ther. - Methods Clin. Dev. 25, 360–369 (2022).
https://www.amyjet.com/products/PRO-610178.shtml
