来宝网 2024/2/6点击1127次
HybriDetect 2T试纸条(MGDS2A)测定性能&结果解读
HybriDetect通常用于DNA扩增产物的快速检测。许多客户会使用带有Biotin、FITC/FAM修饰的引物,反应产物包含这些标签,从而可以在HybriDetect试纸条上被检测到。如PCR和多种等温扩增技术(如LAMP-LFA)均可以和HybriDetect一起应用。此外,由于标记探针的特异性杂交,这种方法允许大量核酸(如核糖体RNA)的直接检测(无需扩增)。
艾美捷通用侧流式试纸条:HybriDetect 2T试纸条(MGDS2A):用于同时检测用FITC、生物素和地高辛标记的两种不同分析物(蛋白质、基因组扩增产物)的通用侧流式试纸条。REF: MGHD 2 1;规格:100 Texts
方法:
Milenia HybriDetect 2T是一种即用型通用试纸条(浸渍棒),基于使用金颗粒的侧流技术。该试纸条旨在开发用于同时检测两种不同分析物(如蛋白质、抗体或基因扩增)的定性或定量快速测试系统。用户需要开发两种特异性分析物溶液。溶液A:含有用FITC标记的第一探针(例如抗体、抗原、特异性探针)和用生物素标记的第二探针(例如抗体、引物)。溶液B:同样含有用FITC标记的第一探针(例如抗体、抗原、特异性探针)和用地高辛标记的第二探针(例如抗体、引物)
待测样品与开发的分析物特异性溶液混合后,将试纸条放入该溶液中。
用FITC和生物素标记的分析物A复合物首先与试纸条的样品施加区域中标记有金的FITC特异性抗体结合。用FITC和地高辛标记的分析物B复合物也与试纸条的该区域结合。毛细力使金复合物A和B扩散到分析膜上。只有被捕获的金颗粒分析物在溢出相应测试带(测试带A-分析物A,测试带B-分析物B)时,与固定的生物素配体分子结合,并随时间生成红蓝色带状。未被捕获的金颗粒流过控制带,并被物种特异性抗体固定在那里。随着孵育时间的增加,会形成一个颜色浓烈的控制带。
PCR产物测定性能:
1. 从容器中取出所需数量的试纸条并标记它们。
2. 对于每个待分析的样品,将100 uL HybriDetect测定缓冲液或个别开发的缓冲液移液到反应管或微孔板的孔中。
3. 直接将5-10 uL的杂交产物移液到样品施加区域,或者选择将5-10 uL的杂交产物加入反应管/孔中的溶液中。
4. 将试纸条的样品施加区域放入溶液中,并以直立的姿势孵育,例如5-15分钟。
5. 孵育结束后,将试纸条从测定溶液中取出,并立即解读测试结果。
注意:
如果需要更高的分析灵敏度,增加PCR产物的体积可能会有所帮助。体积、特定于分析物的溶液和孵育时间始终是个别测试开发的一部分。
测定性能 "RPA产物"
1. 从容器中取出所需数量的试纸条并标记它们。
2. 对于每个待分析的样品,将80 uL HybriDetect测定缓冲液(MGCBB)移液至反应管或微孔板的孔中。
3. 在RPA反应后,用HybriDetect测定缓冲液(MGCBB)稀释RPA反应混合物1/50或1/25(用于更高的灵敏度),并直接加载10 ul至样品施加区域。
4. 将已加载的试纸条的样品施加区域放入准备好的溶液中(参见第2点),并以直立姿势孵育,例如5-15分钟。
孵育结束后,将试纸条从测定溶液中取出,并解读测试结果。
结果解读
应用内部PCR控制:
虽然生物素标记的扩增物A主要用于检测特定目标序列,但地高辛标记的扩增物B被提供作为内部PCR扩增控制。
PCR测定的灵敏度:
Milenia HybriDetect 2T的分析灵敏度相当于琼脂糖凝胶电泳和随后用溴化乙锭染色。不受PCR产物大小和扩增循环数的影响,可以检测到低至5 pg的DNA。
警告和注意事项:
1.所有试剂应在原始容器中存放在 2-8 ℃的环境中。
2.使用前,将所有试剂恢复至室温(18-28 ℃)。
3.必须遵守所有组分的有效期限。
4.保护检测条免受湿气影响;容器必须始终密封。
5.只接触和标记检测条的箔纸覆盖区域(标记区域)。
6.废弃物的处理必须按照当地的法规进行。
7.检测缓冲液含有抗微生物试剂,因此避免与皮肤和/或黏膜接触。
8.适用于专业用户。
https://www.amyjet.com/brand/MGHD-21.shtml
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SPHEROTM荧光微球:粒度均一、单分散性好、稳定性好
荧光微球通常是指形状为球形,直径在几纳米至几十微米之间,微球表面或内部负载有荧光物质,在受到一定的能量激发时能够发出荧光的微粒。与纯荧光化合物相比,荧光微球具有相对稳定的发光行为和形态结构。目前,已经有能够制备各种各样的粒径从纳米级到亚微米级的荧光微球。荧光微球有比较稳定的形态结构及发光行为,受溶剂、热、电、磁等外界条件的影响比纯荧光化合物小很多。荧光微球作为一种特殊的功能微球,由于在单个微球中富集了能够发射荧光的有机或无机物质,除具有无机物和有机物的性能外,同时在外界能量刺激下还能发射荧光。
艾美捷SPHEROTM荧光微球 粒度均一、单分散性好、稳定性好、发光效率高,微球表面弧度有利于抗原决定簇和抗体结合位点的暴露面处于较好的反应状态,荧光微球能够携带许多荧光分子,较弱的刺激就可以引发较强的信号,所以只需要少量的低能辐射就能产生荧光信号,避免了使用传统的放射性微球造成的辐射危险,并在不损失检测灵敏度的前提下降低了成本。因此在众多领域都具有广泛的应用,如生物化学、生物医药、临床医学、基因分析以及光学仪器等,荧光微球在医药、生物方面的应用尤为重要。
SPHEROTM荧光微球有各种尺寸和荧光强度的单个或多个荧光团,尺寸和荧光的变化系数都很小。它们可用于乳胶凝集、荧光显微镜、共聚焦荧光显微镜。这些颗粒中的许多可以用于流式细胞术。
SPHERO 聚苯乙烯荧光微球&高荧光强度和低荧光强度的微球:
SPHERO荧光微球是通过用荧光基团溶液染色聚苯乙烯颗粒或通过在聚苯乙烯核心颗粒存在下聚合苯乙烯中的荧光团来制备的。我们可以提供不同尺寸、不同颜色荧光基团、不同荧光强度和表面官能团的各种荧光微球。选择用于制备SPHERO荧光颗粒的荧光团是非水溶性的,因此是非常稳定的。这些荧光团一旦结合到颗粒中,就不会浸出,并且它们的颜色和荧光在在适当的储存条件下可保存很长时间。
https://www.amyjet.com/brand/SPHERO-fluorescent-microspheres.shtml
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Advanced BioMatrix Irgacure 5929光引发剂 (365nm),5克,非无菌介绍与注意事项
IRGACURE 2959是一种高效的非发黄自由基光引发剂,用于紫外光固化系统,如水凝胶和生物墨水。Irgacure在365纳米波长的紫外光下具有最高的活化效率。Irgacure必须在甲醇中溶解,因为它不溶于水(例如LAP和Ruthenium)。
此Irgacure产品被视为非无菌。建议在细胞培养系统中添加抗生素或进行无菌过滤。要进行无菌过滤,将所需数量的Irgacure悬浮并通过0.2微米的小按钮过滤器进行过滤。在2周内使用无菌光引发剂。
该产品提供5克干粉。
艾美捷 Advanced BioMatrix Irgacure 5929光引发剂 (365nm),5克,非无菌。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
储存/稳定性:在凝胶冰袋上运送。将产品储存于2-8°C。称取所需量的干粉进行溶解。一旦溶解,需在2周内使用。
干粉(未溶解)在2-8°C下稳定期超过1年。
使用说明:
为了溶解光引发剂,将Irgacure在纯甲醇中以10%的溶液(100毫克/毫升)溶解。注意:溶液中的光引发剂的保质期为2周。只需溶解所需量的光引发剂。将剩余的光引发剂(粉末或溶液)储存在2至10°C。
通过将所需溶液的总体积(即甲基丙烯酰化胶原)乘以0.01来计算所需光引发剂的体积。例如,如果要制备10毫升的甲基丙烯酰化胶原,所需添加的光引发剂的计算体积为100微升。
将计算出的光引发剂体积加入所需交联溶液的体积中,并彻底混合。
将细胞加入预先制备的水凝胶/光引发剂溶液中。
将水凝胶/光引发剂/细胞溶液分配或生物打印到所需的培养器具中(例如6孔板、48孔板)。
进行紫外光交联时,将预先制备的水凝胶/打印结构直接放置在365纳米紫外光交联源下。注意:较长的曝光时间可以实现更多的交联,尽管每种细胞类型对紫外光和由光引发剂产生的自由基暴露(介导交联)具有不同的耐受程度。
美国Advanced BioMatrix是3D组织培养、细胞检测和细胞增殖等领域实验解决方案的佼佼者,在分离、纯化、冻干、细胞培养和蛋白检测、多肽粘附、附着因子、基质硬度和其他3D matrix 产品开发方面有着丰富的经验。
https://www.amyjet.com/featured/ABM-5200-5GM.shtml
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Advanced BioMatrix PhotoCol甲基丙烯酸酯胶原蛋白(仅胶原蛋白)的特性与质量标准
三维(3D)凝胶可以研究细胞外基质(ECM)的机械性质,如密度和刚度,对细胞发育、迁移和形态的影响。与二维系统不同,三维环境使细胞伸展能够同时与所有细胞表面上的整合素相互作用,从而激活特定的信号通路。凝胶的刚度或硬度也会对细胞在三维与二维环境中的迁移产生不同的影响。此外,在三维系统中,由于细胞伸展与基质纤维的纠缠,还可能出现整合素非依赖的机械相互作用,而在二维系统中,细胞附着在平坦表面上无法发生这种相互作用。
艾美捷Advanced BioMatrix PhotoCol:一种经过纯化的甲基丙烯酰化I型牛胶原套装,可以制备具有天然样式的可调节性3D胶原凝胶,并通过紫外光交联。PhotoCol 套装包括纯化的甲基丙烯酰化I型牛胶原作为核心成分,以及套装中的其他辅助试剂。
PhotoCol 甲基丙烯酸酯胶原蛋白(仅胶原蛋白),100 毫克:
胶原从牛皮中提取,含有高含量的单体。胶原起始材料来自一个封闭的牛群,并使用控制的制造过程进行纯化。
提供20 mM乙酸溶液,以在浓度范围为3至8 mg/ml的条件下溶解冻干的甲基丙烯酰化胶原。
中和溶液由碱性的10倍磷酸盐缓冲盐溶液(PBS)组成,可在最终混合物中提供生理盐和中性pH。
光引发剂溶液由Irgacure 2959在甲醇中配制而成(甲醇不包括在内),可使胶原在365 nm下进行紫外光交联。
储存/稳定性:产品在冻胶冰袋上运送。收到后,将胶原、乙酸和光引发剂储存于2至10摄氏度。不要冷冻。将中和溶液储存在室温下。适当的产品标签和分析证书上印有有效期日期。当产品按照指示处理和储存时,有效期适用。在用乙酸溶解胶原后,胶原溶液在2至10摄氏度下储存时稳定期为2个月。
凝胶硬度:PhotoCol?试剂盒旨在根据胶原浓度和交联程度提供具有不同硬度的胶原凝胶。
美国Advanced BioMatrix是3D组织培养、细胞检测和细胞增殖等领域实验解决方案的佼佼者,在分离、纯化、冻干、细胞培养和蛋白检测、多肽粘附、附着因子、基质硬度和其他3D matrix 产品开发方面有着丰富的经验。
https://www.amyjet.com/featured/ABM-5198-100MG.shtml
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Advanced BioMatrix-ECM Select 阵列套件Ultra-36解决方案
ECM Select Array Kit Ultra-36是一种细胞外基质筛选阵列,包含一片功能化了专有水凝胶的显微镜玻璃载玻片。36种细胞外基质(ECM)条件被印刷成阵列点位,全部来自人源。每个点位直径为400微米,以9个复制品的形式印刷(图1)。ECM被局限在每个点位内,不与相邻点位交叉扩散,因此每个点位代表一个独立的“孔”或实验。哺乳动物细胞在体内存在着影响其行为(增殖、分化、死亡等)和功能的独特微环境。在体外培养细胞时,必须重现这种微环境以实现生理相关的生长。在影响细胞在体内行为的众多因素中,细胞外基质(ECM)在确定细胞功能方面起着重要作用。目前,寻找适用于细胞培养的合适ECM是一个试错过程,需要大量的细胞以及显著的时间和成本投入。ECM Select Array Kit Ultra-36允许以较少的细胞数量在短时间内并行筛选36种ECM和ECM组合。感兴趣的细胞被接种到带有4个培养腔的载玻片上(附带提供),并在孵育箱中培养所需的时间。可以使用亮场显微镜观察细胞形态、附着和生长。通过使用特定荧光标记物对载玻片上的细胞进行染色,可以监测特定的细胞行为。荧光信号可以通过荧光显微镜成像系统进行检测。
与在多孔组织培养板中执行相同实验相比,艾美捷Advanced BioMatrix ECM Select Array Kit Ultra-36使用简单。细胞接种、固定、洗涤和处理步骤都在一个单一的溶液交换中完成,消除了多孔板处理的步骤。对于大多数细胞类型,从开始到结束,确定适用于培养细胞的合适ECM可以在不到24小时内完成。
ECM Select 阵列套件 Ultra-36参数说明:
注意事项和免责声明:本品仅供研究和开发使用,不适用于人体或其他用途。
存储、保质期和稳定性ECM Select Ultra Array Kit的保质期在-10至-30°C下至少为12个月。保质期测试正在进行中。不建议重复冻结和解冻,但有限的冻结和解冻似乎对产品没有负面影响。不建议在更低的温度下存储。
根据我们的稳定性研究,ECM Select Ultra Array Kit在2至8°C下储存3-4天时表现良好。然而,经过2周在2至8°C下储存后,一些细胞外基质条件的细胞附着能力会降低。在2至8°C下储存1个月后,载玻片上几乎所有的ECM条件都失去了细胞附着能力。
操作步骤将细胞接种到载玻片上:
1. 准备250,000个所需的细胞,用5毫升完整的培养基(细胞密度为50,000个细胞/毫升)。
2. 从-20°C的冷冻机中取出ECM Select Ultra Array Kit,放在无菌层流罩下。打开铝箔袋,取出铝箔袋中的内容。首先,将培养皿从塑料袋中取出并取下盖子。然后打开载玻片架上的盖子,轻轻将载玻片从载玻片架上取下。将载玻片放入培养皿的一个腔中。在取下载玻片时要小心,使用无菌技术,如戴无菌手套或使用无菌镊子,并且只触摸载玻片的边缘。确保印刷的斑点面朝上(载玻片上的数字和字母应清晰可见)。
3. 在载玻片上加入5毫升无菌磷酸盐缓冲液(PBS)。确保整个载玻片浸没在PBS溶液中,并避免在载玻片下方困住气泡。轻轻摇晃载玻片几次,然后吸去PBS溶液。不要触摸载玻片表面。
4. 加入5毫升所需的培养基(与培养细胞相同的培养基),确保整个载玻片浸没在培养基中。轻轻摇晃载玻片几次,然后吸去培养基溶液。不要触摸载玻片表面。
5. 轻轻振动移液器,简短地将准备好的250,000个细胞上下吸取,并立即将细胞直接加到载玻片上。在分配细胞时,通过来回移动移液器来均匀分布细胞。不要触摸载玻片表面。将盖子盖回培养皿上。
6. 小心地将含有载玻片的4孔培养皿转移到孵育箱中,在37°C、5% CO2下培养细胞过夜(最少12小时以确保高效的细胞附着,最多3天)。
注意事项:当从载玻片架上取下载玻片时,载玻片表面可能可见阵列斑点。用PBS/培养基洗涤后,这些斑点可能会消失。这是正常的,不会影响ECM阵列的性能。
注意事项:对于细胞系,12小时应足够观察到细胞附着。对于从组织中新鲜分离的细胞或之前冻存的细胞,可能需要多达2天才能观察到显著的细胞附着。
注意事项:如果需要进行细胞增殖研究,请减少细胞数量,以便在斑点上留出额外的空间供细胞分裂。建议根据细胞的大小和形态,从100,000-150,000个细胞开始。细胞越大,所需细胞数量越少。
美国Advanced BioMatrix是3D组织培养、细胞检测和细胞增殖等领域实验解决方案的佼佼者,在分离、纯化、冻干、细胞培养和蛋白检测、多肽粘附、附着因子、基质硬度和其他3D matrix 产品开发方面有着丰富的经验。
https://www.amyjet.com/featured/ABM-5170-1EA.shtml
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Advanced BioMatrix I 型牛胶原蛋白,冻干纤维粉,1克:提取与纯度分析
牛I型胶原蛋白,不溶性冻干纤维状粉末,目录号5162,提取自牛屈肌腱,原材料来自封闭/受控牲畜。制造过程符合严格的质量标准,已被证明产生了高质量的产品,并具有批次一致性。该产品纯度>96%,无法检测到II型和III型胶原蛋白。该产品以1克包装的冻干纤维状粉末形式提供。生物负荷和内毒素水平经过测试 - 该产品不被认为是无菌的。这种胶原蛋白产品天然交联,形成了适用于需要结构和强度的应用的坚固材料。该产品可以轻松制备成组织支架、泡沫、海绵、悬浮液、涂层、填料、薄膜和片材等形式,但不能形成水凝胶。使用典型的交联方法,可以调节该材料的合适体内吸收性能。这种胶原蛋白产品非常适用于组织工程应用和与无机和生物材料的结合。该产品提供用户友好的包装,便于使用和储存。避免长时间暴露在环境中。
艾美捷Advanced BioMatrix I型牛胶原蛋白,冻干纤维粉,1克 仅用于科研,不可用于临床诊断。准备和使用说明:
胶原悬浮液的制备程序(不形成完全溶解的溶液)
注意:以下程序基于在100毫升中制备1克胶原的情况,以最初制备10毫克/毫升的胶原悬浮液。可以使用较小的量和容积,但应使用相同比例的胶原和溶液。
1. 称量1克胶原纤维状粉末。
2. 用50毫升冷净化水(最终体积的50%)重新溶解1克胶原。
3. 持续搅拌胶原和水,至少搅拌15分钟,直到胶原完全湿润,溶液呈半溶解状态。
4. 向胶原混合物中加入50毫升冷0.02 M盐酸,并搅拌至少10分钟。这将得到10毫克/毫升的胶原浓度,悬浮液仍然呈半溶解状态。
5. 测量pH值,混合物的pH应为2至3。
6. 使用Waring搅拌器或类似设备,以高速均匀搅拌胶原混合物至少15分钟,确保胶原完全均质化。确保混合物的温度不超过24°C。完成后,粘稠悬浮液中几乎没有可见固体物质,但会有气泡存在。
7. 为了去除气泡,在搅拌板上搅拌悬浮液并对其进行真空处理。这将去除气泡。
8. 如果需要低于10毫克/毫升的胶原浓度,可以用0.01 M盐酸稀释胶原。
美国Advanced BioMatrix是3D组织培养、细胞检测和细胞增殖等领域实验解决方案的佼佼者,在分离、纯化、冻干、细胞培养和蛋白检测、多肽粘附、附着因子、基质硬度和其他3D matrix 产品开发方面有着丰富的经验。
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Advanced BioMatrix 丝素溶液,50 mg/ml,20mL解决方案
Advanced BioMatrix的丝蛋白溶液浓度约为50 mg/mL(5% W/V),分子量约为100 kDa,容量为20 mL。丝蛋白溶液由100%源自家养家蚕(Bombyx mori)的丝蛋白蛋白质制成。该产品在制造过程中采取了最小化污染的措施,生物负荷较低,但不被认为是无菌的。丝蛋白蛋白质是家蚕茧纤维的主要结构成分。由于丝蛋白具有高度的生物相容性和植入体内时缺乏免疫反应的特性,因此在医学相关应用中具有巨大的潜力。丝纤维被溶解成水性的丝蛋白溶液,可以作为培养基的添加剂或用于制备与组织工程相关的三维支架材料。与传统组织工程方法类似,丝蛋白支架通常在体外与特定细胞类型一起培养,因为大多数细胞会附着在丝蛋白蛋白质上,并随时间的推移进行培养以模拟组织结构。已经证明,丝蛋白蛋白质可以被许多天然产生的蛋白酶降解,因此与其他合成材料不同,丝蛋白支架是一种具有生物活性的支架。
结果,丝蛋白支架材料通过体内类似的生理途径被降解和重塑。丝蛋白蛋白质由非必需和必需氨基酸组成,丙氨酸和甘氨酸的浓度较高,并且这些氨基酸被周围细胞重新吸收以进行新的组织再生。这一点很重要,因为丝蛋白降解产物不会在局部环境中积聚引发毒性反应,而这在其他合成和天然生物材料中常见。丝蛋白具有多种形式和格式的生产能力(如涂层、薄膜、海绵、水凝胶、电纺纤维、微/纳米球),相比于胶原蛋白、壳聚糖和海藻酸酯等其他生物聚合物系统,具有更多的加工选择优势。通过各种加工技术,丝蛋白材料的性能可以进行高度修改,以改变降解速率、疏水性/亲水性、透明度、机械强度、孔隙度、氧气渗透性和热稳定性。在这方面,丝蛋白蛋白质代表了一类具有可定义材料特性的工程生物聚合物,适用于特定的应用。
艾美捷 Advanced BioMatrix 丝素溶液,50 mg/ml,20 mL仅用于科研,不可用于临床诊断。
参数说明:包装规格:20毫升
浓度:约50 mg/mL(5% W/V)
纯度:通过SDS PAGE电泳法,纯度>99%
pH值:8至10
内毒素:?5.0 EU/mL
生物负荷:低(<10 CFU),但不无菌
支架形成:已经测试并通过
凝胶化:已经测试并通过
储存:储存在-70°C的温度下
解冻/处理:缓慢解冻于2至10°C。轻轻摇动内容物混匀,不要使用搅拌器或剧烈移液器。如果解冻后未使用完整个20毫升瓶中的内容,请分装成较小的容量并在-70°C下冷冻。尽量减少产品的冻结和解冻次数。不要让产品解冻超过一周,因为蛋白质聚集很可能会发生。
稳定性/有效期:稳定性测试正在进行中。
美国Advanced BioMatrix是3D组织培养、细胞检测和细胞增殖等领域实验解决方案的佼佼者,在分离、纯化、冻干、细胞培养和蛋白检测、多肽粘附、附着因子、基质硬度和其他3D matrix 产品开发方面有着丰富的经验。
https://www.amyjet.com/featured/ABM-5154-20ML.shtml
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Advanced BioMatrix 鼠尾胶原蛋白溶液,I 型,4 mg/ml,25 mL(3D 水凝胶)+中和溶液
艾美捷 Advanced BioMatrixRatCol®胶原蛋白溶液是一种高纯度的鼠尾胶原蛋白(100毫克),浓度约为4毫克/毫升,pH值为3-4,并经过无菌过滤。RatCol®中约有97%的I型胶原蛋白,其余部分由III型胶原蛋白组成。RatCol®胶原蛋白的纯度≥99%。SDS-PAGE电泳显示出典型的α、β和γ带状图案,符合胶原蛋白的特征。产品标签和每个特定批次的分析证书上打印了实际的胶原蛋白浓度。胶原蛋白附带了一瓶预配的中和溶液,用于制备胶原凝胶。RatCol®胶原蛋白是通过酸提取过程从鼠尾的胶原蛋白中获得的,得到的是保持无胶原蛋白脱肽的I型胶原蛋白,溶解在0.02M乙酸缓冲液中。胶原链的N-和C末端的前胶原肽区域得以保留。I型胶原蛋白是皮肤、骨骼、肌腱和其他纤维结缔组织的主要结构成分,其与其他胶原蛋白的区别在于赖氨酸羟化和低碳水化合物含量较低。尽管已经鉴定出多种类型的胶原蛋白,但它们都由三肽链组成,呈三螺旋构象。主要结构(氨基酸序列)的轻微差异确定了不同类型之间的区别。主要结构的氨基酸序列主要是以甘氨酸为每三个位置的重复基序,脯氨酸或4-羟基脯氨酸经常位于甘氨酸残基之前。1,2 I型胶原蛋白是由两个α1(I)链和一个α2(I)链组成的异源三聚体,在中性pH和37°C下自发形成三螺旋支架。多细胞生物中细胞生长、分化和细胞凋亡的控制依赖于细胞与细胞外基质(ECM)的黏附。
鉴于I型胶原蛋白是ECM的丰富组分,细胞在三维胶原凝胶中培养比传统的二维系统更好地模拟体内细胞环境。这已经在多种细胞类型中得到证实,包括心脏和角膜成纤维细胞、肝星状细胞(HSCs)和神经母细胞瘤细胞。3-6一些疾病可以影响ECM的力学特性,而其他疾病状态可能是由于ECM的密度或刚度变化引起的。由于I型胶原蛋白是ECM的拉伸特性的关键决定因素,三维胶原凝胶在机械转导、将机械信号转化为生化信号的细胞信号传导研究中非常有用。6-9 三维凝胶可以研究ECM的力学特性(如密度和刚度)对细胞发育、迁移和形态的影响。与二维系统不同,三维环境允许细胞伸展与所有细胞表面的整合素同时相互作用,从而激活特定的信号传导途径。凝胶的刚度或刚性在三维与二维环境中对细胞迁移产生不同的影响。
此外,3D系统中可能存在与整合素无关的机械相互作用,这是由于细胞伸展与基质纤维的纠缠而产生的,而在细胞附着于平坦表面的二维系统中则不可能发生。10-12细胞表面的一组结构和功能多样的受体识别胶原三螺旋,从而识别不同的胶原亚型。最知名的胶原受体是整合素α1β1和α2β1。α1β1是平滑肌细胞上的主要整合素,而α2β1是上皮细胞和血小板上的主要形式。这两种形式在许多细胞类型上表达,包括成纤维细胞、内皮细胞、成骨细胞、软骨细胞和淋巴细胞。13-15某些细胞类型还可能表达其他胶原受体,如糖蛋白VI(GPVI),它在血小板中介导粘附和信号传导。16其他胶原受体包括圆盘结构域受体、白细胞相关的IG样受体-1和曼诺糖受体家族成员。17,18本产品是从鼠尾腱提取的胶原蛋白制备而成,含有较高的单体含量。起始材料来自管理的斯普拉格-道利大鼠群体,并使用符合cGMP的制造过程进行纯化。该过程包含内置的、经验证的步骤,以确保可能的朊病毒和/或病毒污染物的灭活。该产品非常适用于表面涂层,提供薄层制备用于细胞培养,或作为固态凝胶使用。
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