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脂质过氧化传感器/铁死亡探针--C11 BODIPY 581/591

来宝网 2024/1/10点击572次

脂质过氧化传感器/铁死亡探针--C11 BODIPY 581/591

 

C11 BODIPY 581/591(也表述为C11 BODIPY 581/591) 是一种 BODIPY 氟硼荧衍生物,具有良好的光稳定性和低荧光伪影特质。该化合物常用于活细胞内脂质过氧化和抗氧化性能的研究,以及与羟基自由基反应、检测铁死亡 (ferroptosis)

 

C11 BODIPY 581/591是一种新型的对 Lipid ROS 高选择性、高灵敏的脂质过氧化传感器。与其他 ROS 捕获探针不同,C11-BODIPY 581/591 具有良好的亲脂性,可以快速进入膜,随后可以选择性地捕获细胞内和细胞膜中的脂质过氧化,并在氧化后仍保持亲脂性,不会离开脂质膜。该过程伴随着荧光信号的变化。C11-BODIPY 581/591 结构中的多不饱和丁间二烯基在 Lipid ROS 催化氧化后,其荧光发射峰从 590 nm 偏移至 510 nm。因此,C11 BODIPY 581/591 是一种用于铁死亡研究的常用产品。

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艾美捷脂质过氧化传感器/铁死亡探针--C11 BODIPY 581/591是一种功能强大的化合物,可用于对 Lipid ROS 的可视化监测,广泛应用于荧光显微镜、流式细胞分析等领域。

 

CAY-27086,脂质过氧化传感器/铁死亡探针,C11 BODIPY 581/591参数说明:

名称 C11 BODIPY 581/591 C11 BODIPY 581/591

货号 CAY-27086

CAS 217075-36-0

分子式 C30H34BF2N2O2 ? H

分子量 504.4

纯度 95%

发射波长 591 nm (还原), 510 nm (氧化)

激发波长 581 nm (还原), 500 nm (氧化)

溶解度 DMSO: 30 mg/ml 甲醇: slight soluble

储存 -20°C

运输 美国大陆室温;其他地方可能有所不同

稳定性 4

 

参考的使用方法(具体用量根据效果进行调整):

 

1.制备储备液

(1)  1毫克的C11 BODIPY 581/591溶解在0.1983毫升的二甲基亚砜(DMSO)中,以得到10毫摩尔的C11 BODIPY 581/591储备液。 注意:建议在避光条件下将储备液保存在-20°C-80°C,并避免反复冻融

(2) 制备C11 BODIPY 581/591工作液 在无血清的细胞培养基或PBS中稀释储备液,以获得2-10微摩尔的C11 BODIPY 581/591工作液。 注意:请根据需要调整C11 BODIPY 581/591工作液的浓度。

 

2. 细胞染色

(1) 准备细胞: 对于悬浮细胞:在4°C下以1000g离心3-5分钟,弃去上清液。用PBS洗涤2次,每次5分钟。 对于贴壁细胞:弃去细胞培养基,加入胰蛋白酶解离细胞,制成单细胞悬液。在4°C下以1000g离心3-5分钟,然后弃去上清液。用PBS洗涤2次,每次5分钟。

(2) 加入1毫升C11 BODIPY 581/591工作液,室温孵育30分钟。 在4°C下以400g离心3-4分钟,弃去上清液。 用PBS洗涤2次,每次5分钟。 用无血清的细胞培养基或PBS重悬细胞,然后进行荧光显微镜或流式细胞仪检测。

 

https://www.amyjet.com/products/27086-1.shtml

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SARM1, FLAG-Tag重组蛋白的表达与纯化方法研究

 

重组人SARM1(含有28-724个氨基酸)蛋白,包含一个N-末端的FLAG标签。该蛋白经亲和纯化得到。

 

艾美捷 SARM1, FLAG-Tag重组蛋白参数:

英文名字:SARM1, FLAG-Tag Recombinant

货号:BPS-100069

规格:100ug

同义词:Human SARM1, also known as Sterile Alpha And TIR Motif Containing 1, and SAMD2, NAD(+) hydrolase SARM1, HsTIR, hSARM1, MyD88-5, NADase SARM1

物种:人类

构造:SARM1FLAG-28-724(末端))

宿主种类/表达系统:HEK293

纯度:≥90%

格式:缓冲水溶液。

 

储存/稳定性:–80°C 下至少 6 个月,避免冷冻/解冻循环

测定条件:根据 SARM1 荧光检测试剂盒(水解酶活性)(BPS Bioscience #78217)进行检测。

使用说明:使用前在冰上解冻并轻轻混合。不要涡旋。打开前先快速旋转一下。等分成小体积并快速冷冻以便长期储存。避免多次冷冻/解冻循环。

应用领域:可用于酶动力学研究、抑制剂筛选和选择性分析。

科学类:细胞凋亡

仅供研究使用

 

产品数据:

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SARM1, FLAG-Tag重组蛋白相关研究:

NMNAT1His 标签重组

NAD+,生物素标记

NMNAT2His 标签重组

NNMTHis 标签重组

 

相关服务:

细胞凋亡筛查和分析

 

https://www.amyjet.com/products/BPS-100069.shtml

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BCMA-CD3双特异性分子的制备技术研究

 

B 细胞成熟抗原 (BCMA),也称为肿瘤坏死因子受体超家族成员 17 TNFRSF17),是一种由 TNFRSF17 基因编码的蛋白质。TNFRSF17 是识别 B 细胞活化因子 (BAFF) 的 TNF 受体超家族的细胞表面受体。BCMA 优先在成熟 B 淋巴细胞和多发性骨髓瘤 (MM) 细胞中表达。BCMA的上调也与多发性骨髓瘤的疾病负担和预后相关。这种双特异性分子同时与癌细胞上的 BCMA T 细胞上的 CD3 结合,从而使 T 淋巴细胞更接近癌细胞。结合事件增强了未受刺激的 T 细胞并诱导对 BCMA+ 癌细胞的直接细胞毒性。

 

Anti-BCMA-Anti-CD3-Avi-His-Tag 是一种纯化的重组人双特异性分子,具有 T 细胞 Engager。在 BCMA-CHO 细胞存在下,使用 NFAT-luc 报告基因 Jurkat 细胞系 (BPS Bioscience #60621) 在 ELISA 结合测定和使用 NFAT-luc 报告基因 Jurkat 细胞系 (BPS Bioscience #79500-H) 进行功能报告基因测定中,已经测试了这种双特异性分子的特异性活性。

 

艾美捷 BCMA-CD3双特异性分子参数:

英文名字:Anti-BCMA-Anti-CD3 Bispecific Molecule

货号:BPS-100689

同义词:分化簇 3 BiTEB 细胞成熟抗原 BiTETNFRSF17 抗体

物种:人类

宿主物种/表达系统:HEK293

纯度:≥90%

纯化来自 HEK293 细胞的 His-tag 蛋白的 Ni-NTA 亲和纯化。

格式:缓冲水溶液。

配方:8 mM 磷酸盐 pH 7.4110 mM NaCl2.2 mM KCl 20% 甘油

 

储存/稳定性:在 -80°C 下可稳定保存至少 12 个月。

应用:本产品仅供研究使用。它不适合人类诊断或治疗用途。抗 BCMA CD3-Avi-His-Tag 可用于研究 BCMA+ 癌细胞介导的 T 细胞活化,使用原代 T 细胞或报告细胞系,例如 NFAT-luc-Jurkat 细胞 (BPS Bioscience #60621)。

运输温度-80°摄氏度,避免冻融循环。

科学类别:CAR-T

仅供研究使用

 

产品数据:

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BCMA-CD3双特异性分子相关研究:

NFAT荧光素酶报告基因Jurkat细胞系

BCMAFc-fusion IgG1)、Avi-Tag、生物素标记重组

BCMA CHO重组细胞系(高表达或低表达)

CD19-CD3双特异性分子

 

相关服务:

定制CAR-T细胞

 

https://www.amyjet.com/products/BPS-100689-1.shtml

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高通量3CL蛋白酶未标记(SARS-CoV-2)检测试剂盒

 

未标记的 3CL 蛋白酶检测试剂盒设计用于测量 3CL 蛋白酶活性,用于筛选和分析应用,均相检测,无需耗时的洗涤步骤。该试剂盒采用方便的 96 孔形式,含有纯化的未标记 3CL 蛋白酶 (BPS Bioscience #100823)、荧光底物和用于 100 次酶反应的 3CL 蛋白酶测定缓冲液。3CL 抑制剂 GC376 也包括在内作为对照。

 

3CL 蛋白酶底物是一种内部淬灭的 14 聚体荧光肽 (DABCYL-KTSAVLQSGFRKME-EDANS)。当供体 (EDANS) 和受体 (DABCYL) 荧光基团非常接近时,EDANS 发出的能量被 DABCYL(完整底物)淬灭。在3CL蛋白水解后,肽底物被3CL蛋白酶在谷氨酰胺和丝氨酸之间裂解,产生高荧光肽片段(SGFRKME-EDANS)。EDANS的激发峰为336 nm,发射峰为455 nm。荧光强度与3CL的活性成正比增加。

 

艾美捷 3CL蛋白酶未标记(SARS-CoV-2)检测试剂盒参数:

英文名字:3CL Protease, Untagged (SARS-CoV-2) Assay Kit

货号:BPS-78042

检测试剂盒形式:荧光

提供方式:该试剂盒采用方便的 96 孔规格或 384 孔规格,含有纯化的未标记 3CL 蛋白酶、荧光底物和 3CL 蛋白酶测定缓冲液,可进行 100 384 种酶反应。3CL 抑制剂 GC376 也作为阳性对照。

需要但未提供的材料:

荧光酶标仪能够读取exc/em=360 nm/460 nm

 

储存/稳定性:自收到之日起至少 6 个月,按指示储存。

应用:非常适合研究酶动力学和高通量 HTS) 应用。

运输温度:-80°摄氏度,避免冻融循环。

仅供研究使用

 

产品数据:

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3CL蛋白酶未标记(SARS-CoV-2)检测试剂盒相关研究:

3CL 蛋白酶 (Mpro)、MBP 标签 (SARS-CoV-2) 重组

3CL 蛋白酶,MBP 标签 (SARS-CoV-2) 检测试剂盒

3CL 蛋白酶 (SARS-CoV-1) 检测试剂盒

3CL 蛋白酶 (SARS-CoV-2) 重组

 

文献引用:

1. Jared S. Morse, et al., 2020 Chem.Bio.Chem. 21:730–738.

2. Zhang, L., et al. 2020, Science 368 (6489): 409-412.

 

https://www.amyjet.com/products/BPS-78042-1.shtml

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ROX参考染料在实时荧光定量PCR中的应用研究

 

ROX参考染料通常用于ABIStratagene等公司的实时PCR放大器。它用于补偿由PCR样品装载量变化引起的PCR管之间的差异。所需的ROX参考染料浓度可能因具体仪器而异。我公司提供浓度为25µmol/LROX参考染料溶液。不同仪器的推荐最终浓度为50 nmol/L500 nmol/L。用户可以根据仪器的推荐浓度添加ROX参考染料。

 

ROX参考染料一般用于ABIStratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪上,用于调整PCR加样误差所引起的PCR管与管之间的差异。不同仪器所需ROX Reference Dye浓度不同。

 

艾美捷ROX参比染料基本信息:

货号:B-CHM105

规格:500µL

储存:储存温度为-20°C,避光。

光谱特性:Ex/Em=578/604nm,消光系数(cm-1M-1=82000

储存条件:长期储存应在-20°C下,以防止重复冻融循环。对于短期使用,ROX参考染料可以在4°C下储存。稳定性:在适当的储存条件下稳定至少6个月。

 

ROX参比染料光谱信息:

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特定仪器上ROX的建议最终浓度:

仪器   ROX50μL PCR反应    最终浓度

"ABI PRISM 7000/7300/7700/7900HT7900HT FastABI Step OneABI Step One Plus" 1.0 μL0.6~1.0 μL 500 nmol/L300~500 nmol/L

"ABI 75007500 FastStratagene Mx3000P

Mx3005PMx4000MJ Research Chromo4 OpticonII),Corbett Rotor Gene 300" 0.1μL0.06~0.1 μL 50 nmol/L30~50 nmol/L

 

仅供研究使用,不用于人类或临床诊断

 

https://www.amyjet.com/products/B-CHM105-500uL.shtml

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重组人膜连蛋白A5(活性)的生物学功能研究

 

Annexin VANXA5Annexin A5)是annexin蛋白家族的成员,具有在存在钙离子时选择性结合到细胞膜磷脂的能力。这种特殊染料对磷脂酰丝氨酸(PS)表现出很强的亲和力,而PS位于细胞膜的内侧。在细胞凋亡的初期阶段,PS从内侧转移到细胞膜的外侧,从而使其暴露在外部环境中。作为早期细胞凋亡的独特标记物,Annexin V能够有效检测到PS向外部环境的转位事件。

 

艾美捷重组人膜连蛋白A5(活性)基本信息:

货号:D-AKP303-10mg

规格:: 1 mg / 10 mg / 30 mg

储存:储存温度为-20°C

 

重组人膜连蛋白A5(活性)特性:

序列:人类Annexin V异构体(P08758)(Met1-Asp320)。

蛋白长度:320个氨基酸(N-Met)。

分子量:预测的分子量为36 kDa

生物活性:与磷脂酰丝氨酸(PS)结合。具有抗磷脂酶活性。

配方:从无菌PBSpH 7.4)中冻干。

储存:冻干的人类Annexin V/ANXA5活性蛋白应在-18°C以下干燥储存,保存12个月。重新溶解后,蛋白应在4°C下保存2-7天,在-18°C以下保存3个月。长期储存建议添加载体蛋白(0.1% HSABSA)。请避免冻融循环。

使用注意事项:在打开前始终进行离心。以12,000 rpm离心1分钟。使用提供的缓冲液以≥ 1 mg/mL重新溶解冻干的人类Annexin V蛋白,然后稀释。对于标记反应,使用无氨基共轭缓冲液重新溶解蛋白。蛋白质浓度应> 2 mg/mL

 

产品数据:

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左图:人膜联蛋白V/ANXA5活性蛋白(D-AKP303)的SDS-PAGE分析

右图:用喜树碱处理Hela细胞24小时,用膜联蛋白V-AF 488PI染色。细胞处于晚期

凋亡/坏死,显示膜联蛋白V-AF 488PI染色(绿色膜,红色碎片核)。

 

仅供研究使用,不用于人类或临床诊断

 

https://www.amyjet.com/products/D-AKP303-10mg.shtml

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蛋白质羰基含量检测试剂盒试剂&样品制备方案

 

蛋白质羰基是蛋白质氧化修饰过程中多种氨基酸的早期标志,其含量反映了蛋白质氧化损伤程度,是衡量蛋白质氧化损伤的主要指标。原理是羰基基团与2,4-二硝基苯肼反应,生成具有在370 nm处特征吸收峰的红色2,4-二硝基苯肼酮。

 

艾美捷蛋白质羰基含量检测试剂盒基本信息:

货号:D-AKC1200-96T

规格:: 48T / 96T

储存:在4°C下储存12个月,避光

 

提供的材料和储存条件

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所需材料但未提供的:

· 可测量370 nm处吸光度的微孔板阅读器或可见光分光光度计

· 孵化器、制冰机、冷藏离心机

· 96孔板或微玻璃比色皿、精密移液器、一次性移液头

· 去离子水、乙醇、乙酸乙酯

· Dounce匀浆器(用于组织样本)

 

试剂制备:

提取缓冲液:按照提供的使用说明使用即可。使用前应将其平衡至室温。存放于4°C。工作抗氧化剂:根据样本数量制备,取0.1克并用1毫升去离子水溶解,1毫升可用于10个样本。存放于4°C,避光。显色剂:按照提供的使用说明使用即可。使用前应将其平衡至室温。存放于4°C,避光。HCl:按照提供的使用说明使用即可。使用前应将其平衡至室温。存放于4°CTCA:按照提供的使用说明使用即可。使用前应将其平衡至室温。存放于4°C。盐酸胍:按照提供的使用说明使用即可。使用前应将其平衡至室温。存放于4°C

 

样品制备:

1. 动植物组织样品:称取0.1克组织,加入1毫升提取缓冲液,在冰上均质。以4,000 g离心10分钟于4°C。取上清液,加入0.1毫升工作抗氧化剂,室温下静置10分钟,以10,000 g离心10分钟于4°C。使用上清液进行测定,并将其放置在冰上待测。

2. 细胞或细菌:将5×10^6个细胞或细菌收集到离心管中,用冷PBS洗涤细胞或细菌,离心后废弃上清液;加入1毫升提取缓冲液超声破碎细胞或细菌5分钟(功率20%200瓦特,超声3秒,间隔7秒,重复30次)。以10,000 g离心10分钟于4°C。使用上清液进行测定,并将其放置在冰上待测。

3. 血清(血浆)样本:直接进行测试。

 

数据分析

注意:我们为您提供了计算公式,包括推导过程和最终公式。两者完全相等。建议使用粗体的简洁计算公式作为最终公式。

 

A. 96孔板计算公式

1. 根据蛋白质浓度计算

蛋白质羰基含量(μmol/mg蛋白)= [ΔA×V总÷(ε×d)]÷(V样品×Cpr) = 0.454×ΔA÷Cpr

2. 根据样品重量计算

蛋白质羰基含量(μmol/g鲜重)= [ΔA×V总÷(ε×d)]÷(W×V样品÷V总样品) = 0.454×ΔA÷W

3. 根据细胞或细菌数量计算

蛋白质羰基含量(μmol/10^4= [ΔA×V总÷(ε×d)]÷(500×V样品÷V总样品) = 0.454×ΔA÷500

4. 根据液体体积计算

蛋白质羰基含量(μmol/mL= [ΔA×V总÷(ε×d)]÷V样品 = 0.454×ΔA

 

其中:ΔA = A测试 - A对照;V总:总反应体积,0.3 mL;ε:羰基摩尔消光系数,22 L/mmol/cmd96孔板直径,0.5 cmV样品:添加的样品体积,0.06 mLV总样品:添加的提取缓冲液体积,1 mLCpr:样品蛋白质浓度,mg/mLW:样品重量,g500:细胞或细菌的总数,5×10^6

 

B. 微玻璃比色皿计算公式

上述计算公式中的光学直径 d:可以调整为 d1 cm 进行计算。

 

注意:如果基于样品蛋白质浓度的计算方法,建议使用 EZMeta™ 蛋白质羰基比色测定试剂盒。

 

仅供研究使用,不用于人类或临床诊断

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PeproTech/艾美捷:GMP级别的重组细胞因子蛋白及试剂盒方案

 

艾美捷PeproTech主要研究领域:

细胞和抗体的综合线

GMP级别细胞因子:用于细胞,基因和组织治疗

无动物成分细胞因子

ELISA试剂盒

细胞培养基试剂盒/添加物

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PeproTech的细胞因子特色如下:

●正确性:经N端序列分析。必要时,使用SDS-PAGERPHPLC和质谱分析等方法与标准品进行比对 

 纯度:经SDS-PAGERP-HPLC分析测定 

 生物活性:经相关的体外或体内生物试验测定 

 蛋白含量:经紫外分光光度和SDS-PAGE分析测定。必要时,使用HPLC法与已精确定量的标准品溶液进行比对 

 内毒素含量:经动态LAL(鲎试剂)法测定 

 微生物污染:蛋白溶液装管前经滤膜过滤除菌   

 

无动物成分(Animal Free)的重组细胞因子和蛋白 

为了紧跟当今研究发展和日益增长的市场需求,PeproTech新增设5000平方英尺的无动物成分产品生产车间。PeproTech的无动物成分产品在生产过程中使用单独的生产流程,没有引入任何动物成分,有效地避免了动物病原体、抗原和痕量物质对实验的影响,使实验结果更加明晰,可靠。且Animal Free蛋白和传统蛋白的活性是完全一样的,用户原来使用传统蛋白时的工作浓度完全可无缝对接到对应的Animal Free蛋白上,无需调试。  

 

GMP级别的重组细胞因子和蛋白

PeproTechGMP级别蛋白为高质量的细胞因子,适用于临床用细胞治疗、基因治疗及组织工程等产品的GMP生产。 

 

PeproTechGMP级别蛋白在严格的ISO 9001质量管理体系中生产,符合良好生产规范(GMP),且不含任何动物源或人源性成分。PeproTech为其GMP级别蛋白制作了详细的分析证明(CoA)、原产地证书(CoO)、及化学品安全说明书(MSDS),以便这些蛋白能够顺利通过GMP生产时的认证,并在GMP生产中得以应用。

 

ELISA试剂盒 

PeproTechABTSTMB ELISA试剂盒,均提供标准包装(standard)和小包装(mini)两种规格。一个标准ABTS/ TMB ELISA试剂盒所含组分足够检测1096孔板。一个mini ABTS/ TMB ELISA试剂盒所含组分足够检测296孔板,PeproTech提供了一种ABTS ELISA缓冲液试剂盒和一种TMB ELISA缓冲液试剂盒,分别与PeproTechABTS ELISA试剂盒和TMB ELISA试剂盒配合使用。这些缓冲液试剂盒包含1096ELISA板以及测定1096孔板所需的相关组分,并包含详细的处理说明。

捕获抗体

检测抗体(生物素化)

蛋白质标准品

HRP标记的偶联物

 

https://www.amyjet.com/brand/PeproTech-china-distributor.shtml

 


推荐仪器
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